Az előadás letöltése folymat van. Kérjük, várjon

Az előadás letöltése folymat van. Kérjük, várjon

Elválasztástechnika Mikronalalitikai kurzus elválasztástechnika.

Hasonló előadás


Az előadások a következő témára: "Elválasztástechnika Mikronalalitikai kurzus elválasztástechnika."— Előadás másolata:

1 Elválasztástechnika Mikronalalitikai kurzus elválasztástechnika

2 Oszlopkromatográfia 1. Gélszűrés és gélpermeációs kromatográfia 2. Ioncserés kromatográfia 3. Affinitás kromatográfia 4. Adszorpciós kromatográfia Elektroforézis 1. natív 2. SDS 3. izoelektromos fókuszálás 4. 2D elektroforézis Elválasztástechnikák Mikronalalitikai kurzus elválasztástechnika

3 1. Gélszűrés és gélpermeációs kromatográfia Az elválasztás alapja: molekulaméret különbség Oszloptöltet: porózus anyag (agaróz vagy keresztkötött poliakrilamid) Eluálás: kiszorítás (sóoldat, víz, híg sav) Mikronalalitikai kurzus elválasztástechnika- oszlopkromatográfia

4 1. Gélszűrés és gélpermeációs kromatográfia sómentesítés, puffercsere frakcionálás, molekulatömeg meghatározás Mikronalalitikai kurzus elválasztástechnika- oszlopkromatográfia

5 2. Ioncserés kromatográfia Az elválasztás alapja: töltéskülönbség Az oszloptöltet 3 részből áll: -oldhatatlan hordozó (mátrix) -a hordozóhoz kovalens kötéssel kapcsolódó, töltéssel, rendelkező funkcionális csoport -ellenionok Eluálás: az ionkötés megbontásával (sók, pH) Mikronalalitikai kurzus elválasztástechnika- oszlopkromatográfia

6 2. Ioncserés kromatográfia tisztításfrakcionálás, Mikronalalitikai kurzus elválasztástechnika- oszlopkromatográfia

7 3. Affinitás kromatográfia Oszloptöltet: a ligandum kémiai úton inert porózus matrixhoz kötve Eluálás: a kötés megbontásával (sóoldat, pH, vagy a ligandot tartalmazó oldat) Az elválasztás alapja: Biospecifikus affinitás különbség (antigén/ antitest; enzim/ inhibitor; receptor/ hormon) Mikronalalitikai kurzus elválasztástechnika- oszlopkromatográfia

8 3. Affinitás kromatográfia specifikus ligandok: híg minták tisztítása osztályspecifikus ligandok: tisztítás és frakcionálás Mikronalalitikai kurzus elválasztástechnika- oszlopkromatográfia

9 4. Adszorpciós kromatográfia Az elválasztás alapja: felület-affinitás különbség (igen nagy felület a tömeghez képest) normál fázisú rendszer: poláros kölcsönhatás fordított fázisú rendszer: hidrofób kölcsönhatás Mikronalalitikai kurzus elválasztástechnika- oszlopkromatográfia

10 4. Adszorpciós kromatográfia Oszloptöltet:- hidroxiapatit (kristályos kalciumfoszfát) -normál fázisú rendszer: szilikagél, aluminiumoxid -fordított fázisú rendszer: derivatizált szilikagél (C4, C8, C18) Eluálás: folyamatos megoszlás az álló és mozgó fázis között -hidroxiapatit: mozgó fázis: foszfát puffer -normál fázisú rendszer: mozgó fázis: apoláros oldószer pl. hexán -fordított fázisú rendszer: mozgó fázis: vizes oldat Mikronalalitikai kurzus elválasztástechnika- oszlopkromatográfia

11 4. Adszorpciós kromatográfia tisztításfrakcionálás Mikronalalitikai kurzus elválasztástechnika- oszlopkromatográfia

12 Fordított fázisú HPLC (RP-HPLC) Mikronalalitikai kurzus elválasztástechnika- oszlopkromatográfia

13 Fordított fázisú HPLC (RP-HPLC) Mikronalalitikai kurzus elválasztástechnika- oszlopkromatográfia

14 Elektroforézis rendszerek Mátrix agaróz poliakrilamid (PAGE) üvegfelület (kapilláris elektroforézis) Futtatórendszer lap elektroforézis »horizontális »vertikális kapilláris elektroforézis (CE) Mikronalalitikai kurzus elválasztástechnika-elektroforézis

15

16 Fehérjék elelktroforetikus elválasztása A fehérje tulajdonságai alapján 1.natív: töltés, méret, alak homogén gradiens 2.SDS: méret homogén gradiens 3.izoelekromos fókuszálás: izoelektromos pont 4. kétdimenziós elektroforézis: két elektroforézis technika kombinálása (izoelektromos fókuszálás + SDS vagy natív elektroforézis) Mikronalalitikai kurzus elválasztástechnika-elektroforézis

17 2. SDS elektroforézis Mikronalalitikai kurzus elválasztástechnika-elektroforézis

18 3. izoelekromos fókuszálás Mikronalalitikai kurzus elválasztástechnika-elektroforézis

19 4. kétdimenziós elektroforézis Mikronalalitikai kurzus elválasztástechnika-elektroforézis


Letölteni ppt "Elválasztástechnika Mikronalalitikai kurzus elválasztástechnika."

Hasonló előadás


Google Hirdetések