Az előadás letöltése folymat van. Kérjük, várjon

Az előadás letöltése folymat van. Kérjük, várjon

Bioaktív komponensek kimutatása növényi mintákból Dr. Remenyik Judit PhD (Kertészettudományi és Növényi biotechnológia Tanszék Biokémiai és molekuláris.

Hasonló előadás


Az előadások a következő témára: "Bioaktív komponensek kimutatása növényi mintákból Dr. Remenyik Judit PhD (Kertészettudományi és Növényi biotechnológia Tanszék Biokémiai és molekuláris."— Előadás másolata:

1 Bioaktív komponensek kimutatása növényi mintákból Dr. Remenyik Judit PhD (Kertészettudományi és Növényi biotechnológia Tanszék Biokémiai és molekuláris diagnosztikai laboratórium)

2 Mérés menete Mintavétel Minta tárolás Minta előkészítés Mérés

3 Mintavétel Adott fajra, fajtára jellemző legyen Adott termőhelyre jellemző legyen 1.Nagy számú/ nagy tömegű egyed gyűjtése 2.Homogenizálás 3.A minta tárolása 4.A minta szállítása

4 A minta tárolása Minden esetben a mérendő komponenstől függ! 1.+8 °C 2.-20°C 3.Liophilizálás °C

5 A minta előkészítése Homogenizálás Feltárás Kioldás Szűrés, tisztítás

6 Bioaktív komponensek Cukor tartalom- egyszerű cukrok (glükóz, fruktóz szacharóz ) Savtartalom (almasav, citromsav) Fehérje tartalom Rost tartalom (oldhatatlan, oldható) Szárazanyag Nitrát tartalom

7 Bioaktív komponensek Antioxidáns sűrűség meghatározás Vízoldékony- és zsíroldékony antioxidánsok 1.Vízoldékony antioxidánsok: a.C-vitamin b.Antioxidáns fehérjék (enzimek) c.Vízoldékony színanyagok (antocianinok, flavonoidok) d.B-vitaminok e.Galluszsav

8 Bioaktív komponensek 2. Zsíroldékony antioxidánsok a.Karotinoidok b.Tokoferolok c.Szabad zsírsavak d. Izoprén származékok e. Klorofollok f.Polifenolok g.A-vitamin

9 Laboratoriumunkban vizsgált komponensek

10

11

12 α-tokoferol: R1,R2,R3=CH3 ß-tokoferol: R1,R3=CH3; R2=H γ-tokoferol: R2,R3=CH3; R1=H δ-tokoferol:R3=CH3; R1,R2=H

13 Antioxidáns kapacitás mérése kemiluminométerrel

14 A mérés elve 1.A fotoérzékeny vegyületet hν energiával besugározzuk. S+ hv→ S.+ + O 2.- A O 2.- reagálnak a minta antioxidáns anyagaival. 2.A detektor vegyület lép ezután reakcióba a maradék O 2.-. O D → hv 3. A kisugárzott energiát méri a detektor.

15 Minták adatanalízise (ACW)

16 Minták adatanalízise (ACL)

17 Spektrofotometria A fényintenzitás változását mérjük. Az UV-VIS tartományban az anyagok szelektíven adszorbeálják a fényt. A= ε*c*l A mérést minden estben az adszorpciós maximumon mérjük. Hibalehetőségek: Fényszóródás, oldószerpárolgás A ε nem helyes meghatározása.

18 Mérés 1. C-vitamin tartalom meghatározása 3.4. A C-vitamin (L-aszkorbinsav)

19 A mérés alapja Erősen redukáló hatású Fe 3+ → Fe 2+ Fe 2+ színes komplexet képeznek az α,α, dipiridil reagenssel Fotometriás meghatározás 1.Látszólagos C-vitamin tartalom 2.Reduktonok 3.Valódi C-vitamin tartalom

20 NAGYHATÉKONYSÁGÚ FOLYADÉKKROMATOGRÁFIA MŰSZER oszlop:(kolonna)  felépítése: minta detektor szűrő előkolonna: főkolonna  töltet: szilikagél (módosított), adszorbens, ioncserélő, gél,…  hőfok: szobahőmérséklet (!) 25 °C mozgófázis:  oldószerek, oldószer-keverékek folyadék HPLC-készülék felépítése: pumpa: mintabevitel: detektor:  nagy nyomás biztosításához  „pulzálás-mentes” (több pumpa)  fecskendő  szelepes megoldás  UV spektrofotometriás, fluoreszcencia,vezetőképességi,tömegspektrometriás,.. UV-detektor 3. mintaadagoló (minta) 4. oszlop 5. detektor 1. eluens (mozgófázis) 2.pumpa 6. rekorder I.oszlopkromatográfia: 1. klasszikus, 2. GC, 3. HPLC, 4. ionkr. II. rétegkromatográfia : 1. papírkr. 2. vékonyrétegkr.

21 A kromatogram értékelése


Letölteni ppt "Bioaktív komponensek kimutatása növényi mintákból Dr. Remenyik Judit PhD (Kertészettudományi és Növényi biotechnológia Tanszék Biokémiai és molekuláris."

Hasonló előadás


Google Hirdetések