Az előadás letöltése folymat van. Kérjük, várjon

Az előadás letöltése folymat van. Kérjük, várjon

Elválasztástechnika2011Eke Zsuzsanna Elválasztástechnikai Kutató és Oktató Laboratórium Elválasztástechnika kv1n1lv1.

Hasonló előadás


Az előadások a következő témára: "Elválasztástechnika2011Eke Zsuzsanna Elválasztástechnikai Kutató és Oktató Laboratórium Elválasztástechnika kv1n1lv1."— Előadás másolata:

1 Elválasztástechnika2011Eke Zsuzsanna Elválasztástechnikai Kutató és Oktató Laboratórium Elválasztástechnika kv1n1lv1

2 Elválasztástechnika2011Eke Zsuzsanna Ionpárképző reagens (Quaterner alkil ammónium só) N+N+ Ion-párképző só [Molekula ION] - Mérendő komponens ionos formája N+N+ [Molekula ION] - C18 szilárd fázis Ionpár fordított fázisú folyadékkromatográfia

3 Elválasztástechnika2011Eke Zsuzsanna Ionpárképző reagens (Alkil szulfonsav só) [Molekula ION] + Mérendő komponens ionos formája C18 szilárd fázis Ionpárképző só S O O O-O- O S O [Molekula ION] + O-O- Ionpár fordított fázisú folyadékkromatográfia Esetleg: CF 3 COO - ; BF 4 - ; ClO 4 -, PF 6 -

4 Elválasztástechnika2011Eke Zsuzsanna A. Ionkizárásos kromatográfia B. Ionkromatográfia Ioncsere: ha az állófázis állandó töltéssel rendelkezik; Ioncserélő kapacitás: megkötött ellentétes ion mennyiség egységnyi tömegű tölteten (mmol/g vagy mekv./g); „Ioncserélő gyanták” Ioncserés folyadékkromatográfia

5 Elválasztástechnika2011Eke Zsuzsanna Ionkromatográfia

6 Elválasztástechnika2011Eke Zsuzsanna Hidrofób kölcsönhatású kromatográfia

7 Elválasztástechnika2011Eke Zsuzsanna HILIC Állófázis: mint a normál fázisú kromatográfiában Eluens: mint a fordított fázisú kromatográfiában 3-40% vízzel (A víz az erős oldószer !!!) Alkalmazásai: RP-hez túl poláros, nehezen visszatartható komponensek elválasztására

8 Elválasztástechnika2011Eke Zsuzsanna Komponensek tulajdonságát észlelik  UV- látható abszorbancia detektor (UV- VIS)  Fluoreszcenciás detektor (FLD)  Elektrokémiai detektor (ECD)  Radiokémiai detektor (RD)  Tömeg detektorok (MSD) Előnyök: specifikusság, érzékenység, szelektivitás Hátrányok: minden vegyület más (pl. más UVmax) A folyadékkromatográfiás detektorok

9 Elválasztástechnika2011Eke Zsuzsanna Mozgófázis tulajdonságát észlelik  Törésmutató detektor (RID)  Vezetőképesség detektor (CD)  Fényszórásos detektor (LSD) Előnyök : nagyon sok komponensre – majdnem univerzális Hátrányok: zaj, érzékenység A folyadékkromatográfiás detektorok

10 Elválasztástechnika2011Eke Zsuzsanna UV-VIS detektor Alapelv: Lambert-Beer törvény

11 Elválasztástechnika2011Eke Zsuzsanna VWD – Variable Wavelenght detector Átfolyó cella Diffrakciós rács tükör tükör Mintafotodióda tükör tükör deutérium lámpa Fénynyaláb osztó A diffrakciós rács monokromatikus fényt állít elő A monokromatikus fényt megosztjuk a referencia és minta fotodióda között Az intenzitásbeli különbséget a cellában történő abszorbancia okozza lencse

12 Elválasztástechnika2011Eke Zsuzsanna Diódasoros detektor – DAD, Diodarray detector Diode Array Grating Optical Slit Detector Flow Cell Homium Filter Achromatic Lens UV Lamp Vis Lamp

13 Elválasztástechnika2011Eke Zsuzsanna Ismétlés vége

14 Elválasztástechnika2011Eke Zsuzsanna UV/VIS detektorhoz képest:  Érzékenyebb  Szelektívebb (Csak fluoreszkáló komponensek detektálására alkalmas) Fluoreszcenciás detektor – FLD

15 Elválasztástechnika2011Eke Zsuzsanna Az antracén gerjesztési és emissziós spektruma metanolban   h 1 Vibrációs alszintek excitation h 2 emisszió Wavelength / nm Intenzitás gerjesztés Fluoreszcenciás detektor – FLD

16 Elválasztástechnika2011Eke Zsuzsanna Fluoreszcenciás detektor – FLD

17 Elválasztástechnika2011Eke Zsuzsanna Fluoreszcenciát csökkentő tényezők: Oldott oxigén vagy más szennyező Fluoreszcenciát befolyásoló tényezők

18 Elválasztástechnika2011Eke Zsuzsanna  A mérendő komponens koncentrációja;  Gerjesztési forrás intenzitása;  Besugárzott minta térfogata (cella térfogat);  A z emittált fényt elnyelő oldószer, vagy oldott anyagok (koelució, szennyezések);  A szórt fény megnöveli a zajt (nagy molekulák, más fényvisszaverő felület) Fluoreszcens detektálást befolyásoló egyéb tényezők

19 Elválasztástechnika2011Eke Zsuzsanna 225/ / / / / / / /495 Gerjesztési / emissziós hullámhossz  ex / em PAH-ok mérése HPLC-FLD-vel

20 Elválasztástechnika2011Eke Zsuzsanna Olyan vegyületek detektálására alkalmazzuk, amelyek un. „elektroaktív” csoportot tartalmaznak. Ezek a csoportok könnyen: Oxidálódhatók Redukálhatók Szerkezet megvizsgálásával és egy ciklikus voltammogram felvételével tervezhetővé válik. Elektrokémiai (amperometriás) detektor-ECD

21 Elválasztástechnika2011Eke Zsuzsanna 21 Előnyök: Igen szelektív, igen érzékeny Hátrányok: Fémek jelenléte jelentősen zavarja (Fe, Ni, etc.). Gradiens nem alkalmazható Kis hőmérséklet- és áramlás- ingadozások is zavarják = NEM ROBOSZTUS Elektrokémiai (amperometriás) detektor-ECD

22 Elválasztástechnika2011Eke Zsuzsanna Elektrokémiai (amperometriás) detektor - ECD OxidálhatóRedukálható FenolokKetonok OximokAldehidek MerkaptánokOximok PeroxidokKonjugált savak/észterek/nitrilek HidroperoxidokKonjugált kettőskötés Aromás aminok, diaminok Aktív halogén Purin vázasokAromás halogén Nitrovegyületek

23 Elválasztástechnika2011Eke Zsuzsanna Fő alkalmazási terület: metabolizmus kutatásban Radiokémiai detektor - RD A mérendő komponens rádióaktivitása által kiváltott fény emissziót méri (Heterogén – homogén szcintilláció) Mérhető pl: 35 S, 14 C, 3 H, 131 I

24 Elválasztástechnika2011Eke Zsuzsanna 1.Porlasztás: Nitrogén gáz segítségével az oszlopot elhagyó eluenst elporlasztjuk. 2.Mozgó fázis elpárologtatása: Egy fűtött csőben áramoltatjuk át, ahol az oldószer elpárolog. 3. Detektálás: A száraz minta részecskéket lézer fénnyel világítjuk meg egy átfolyó cellában. A részecskék által szórt fényt detektáljuk. A detektált fény arányos a részecskék számával (koncentrációjával). Fényszórásos detektor – Evaporative Light Scattering Detector, ELSD

25 Elválasztástechnika2011Eke Zsuzsanna  Univerzális detektor, de csak akkor alkalmazható, ha az elválasztott komponensek törésmutatója eltér az eluens törésmutatójától;  Gradiens elúcióval nem kompatibilis (0,1% eluens összetétel változás már a törésmutató változását idézheti elő);  Hőmérséklet változás (0,001  C –ra termosztáljuk);  Pumpa pulzálás kontroll !!!!  Off-line eluens keverés Refraktív index (törésmutató) detektor – RID


Letölteni ppt "Elválasztástechnika2011Eke Zsuzsanna Elválasztástechnikai Kutató és Oktató Laboratórium Elválasztástechnika kv1n1lv1."

Hasonló előadás


Google Hirdetések