Perinatalis Intenzív Centrumokból származó ESBL-termelő Klebsiella törzsek komplex epidemiológiai tipizálása Damjanova, I., Tóth, Á., Pászti, J., Jakab, M. „Johan Béla” Országos Epidemiológiai Központ 2004 06. 02.

A széles spektrumú -laktamázok (ESBL) jellemzői Az oxyimino-cephalosporinokat hatástalanítják; Több speciesben megtalálhatók: P. aeruginosa, Enterobacteriaceae család; Gyorsan terjednek horizontális és vertikális irányba– többnyire mobilis genetikai elemeken (gyakran plazmidon) vannak kódolva; Jelenleg több, mint 190 különböző ESBL-t ismerünk; Több családba soroljuk: TEM, SHV, CTX-M, OXA stb.

Célkitűzés Multirezisztens ESBL-termelő Klebsiella pneumoniae és K. oxytoca törzsek jellemzése, molekuláris-epidemiológiai vizsgálata Endémiás és/vagy epidémiás klónok igazolása, idő- és térbeli nyomonkövetése, egyéb járványügyi összefüggések keresése.

Komplex tipizálás Az ESBL termelés fenotipusos megállapítása két korongos módszerrel és E-teszttel, egyéb rezisztencia vizsgálatok; Az ESBL enzimek termelését indukáló gének kimutatása PCR, ill. PCR-RFLP módszerrel; A járványtörzsek igazolása fágtipizálással, ERIC-PCR-rel és makrorestrikciós profilvizsgálattal (PFGE); Plazmidprofil meghatározás (Klebsiella esetében elengedhetetlen)

Járványokból izolált 132 ESBL-termelő Klebsiella spp. törzs származása Kórház,megye Törzsszám Species 1998 „A”,Bács-Kiskun 24 K.pn. 2002 10 „B”,Fejér 41 2003 28 „C”,Csongrád 11 „D”,Vas K.oxytoca „E”,Baranya 8

Járványokból származó ESBL-termelő Klebsiella spp Járványokból származó ESBL-termelő Klebsiella spp. törzsek antibiotikum rezisztenciája (MIC,mg/L) CAZ:ceftazidime,CTX:cefotaxime, AMC: amoxicillin-clavulanate, CRO: ceftriaxon, FEP: cefepime,CN: gentamicin, NET: netilmicin, AK: amikacin, CIP:ciprofloxacin

Járványokból izolált ESBL-termelő Klebsiella törzsek komplex tipizálásának eredményei *: Fággal nem tipizálható

Járványokból izolált ESBL-termelő Klebsiella törzsek ERIC-PCR profilja M 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 M M: marker; 1:K70/02,7A1 szubtípus; 2:K71/02,7B; 3: K75/02,7D; 4:K79/02,7D; 5: K36/02,3B; 6:K39/02,7A; 7:K80/02,7A; 8: K85/02,7A; 9: K26/02, 14A; 10: K27/02, 14A; 11: K100/98, 14; 12: K105/98, 14; 13: K20/03, 14A; 14:K2/03,OA1; 15:K5/03,OA1; 16: K109/03,3C; 17:133/03,3C; 18:ATCC 700603

MR ESBL-termelő Klebsiella járvány törzsek PFGE mintázata M 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 M M: marker; 1: K70/02,klón A; 2: K71/02, klón B; 3: K75/02, klón C; 4: K79/02, klón C; 5: K36/02, klón D; 6: K39/02, klón E; 7: K80/02, klón E; 8: K85/02, klón E; 9: K26/02, klón F;10: K27/02, klón F; 11: K100/98, klón G;12: K105/98, klón G; 13: K20/03, klón H;14: K2/03, klón I; 15: K5/03, klón I; 16: K109/03, klón J; 17: K133/03, klón J; 18: ATCC 700603.

ESBL-termelő Klebsiella járványtörzsek PFGE profiljaiból szerkesztett családfa (UPGAMA, Dice koefficiens) J J I I GGFFHEEEDABCC Min. 90%-os homológia esetén klón meghatározás

ESBL termelő Klebsiella járványtörzsek és transzkonjugánsaik plazmid profiljai 94 kb 1. 2. 3. 1. Járványtörzsek plazmid profiljai: 1-9 plazmid/törzs 2,3. Különböző járványokból izolált reprezentatív törzsek és azok transzkonjugánsainak plazmid profiljai

ÖSSZEFOGLALÁS Az általunk vizsgált 7 járványt 10 epidémiás ESBL-termelő, multirezisztens klón okozta; Az egyes klónok csak egy járvány kialakításában vettek részt, egy osztályon belül, max 6 hónapig voltak izolálhatók; 7 klón SHV-5, 3 pedig SHV-2a típusú β-laktamázt termelt; az enzimeket – egy kivételével – 94 kb méretű plazmid kódolta; A konjugativ plazmidok restrikciós profilja 4, 3, valamint 2 járvány esetében megegyezett: feltehetően a plazmid horizontális terjedése az ország több kórházában és beépülése a „helyi” törzsekben felelős a járványok kialakulásáért