Az előadás letöltése folymat van. Kérjük, várjon

Az előadás letöltése folymat van. Kérjük, várjon

BIOTECHNOLÓGIA D MsC gyakorlat Tervezési feladat.

Hasonló előadás


Az előadások a következő témára: "BIOTECHNOLÓGIA D MsC gyakorlat Tervezési feladat."— Előadás másolata:

1 BIOTECHNOLÓGIA D MsC gyakorlat Tervezési feladat

2 Ar1 oriV Ar1 oriV vad típus mutáns poláris hatás ? Deléciós mutagenezis a leolvasási keret sértése nélkül oriV: szűk gazdaspecificitás oriT Ar: antibiotikum rezisztencia

3 A FELADAT ÁLTALÁNOS MEGFOGALMAZÁSA • A LEOLVASÁSI KERET MEGSÉRTÉSE NÉLKÜL KI KELL ÜTNI EGY GÉNT EGY BAKTÉRIUMBAN • ÉS HELYETTE UGYANEBBEN A BAKTÉRIUMBAN KELL TERMELTETNI A KIÜTÖTT GÉN TERMÉKÉT FÚZIÓS FEHÉRJE FORMÁJÁBAN

4 MEGOLDÁSI SÉMA • 1. A megadott célgént tartalmazó genomi lókusz letöltése, a célgén és a környező gének pozíciójának kijelölése • Eszköz: internet, adatbankok • pl. NCBI, Genbank •

5

6

7

8

9

10 complement( ) Csak a – régió kell Ekkor a gén bp-nál kezdődik és bp-nál ér véget Complement!

11

12

13

14

15

16

17

18

19

20

21

22

23

24

25

26

27

28

29

30

31

32

33

34

35

36 Ar1 oriV Ar1 oriV vad típus mutáns poláris hatás ? Deléciós mutagenezis a leolvasási keret sértése nélkül oriV: szűk gazdaspecificitás oriT Ar: antibiotikum rezisztencia

37 bp DE! A két szakasznak nagyjából egyforma hosszúnak kell lennie, Hogy azonos legyen a rekombinációs valószínűség

38 A VEKTOR KIVÁLASZTÁSA Szempontok: 1.Az adott feladathoz szabad-e, kell-e replikálódnia a vektornak a célsejtben 2.Olyan antibiotikum rezisztenciát hordozzon, mely antibiotikumra a sejt érzékeny 3.Milyen módon lehet bejuttatni a célsejtbe DNS-t

39

40

41

42

43 PROKARIÓTA EXPRESSZIÓS VEKTOR ELEMEI TT SZF SDkódoló szekvencia Pr TSZE TTGACAN 17 TATAAT 5’ UAAGGAGGN (3-11) START kodon AUG GUG UUG STOP kodon UAAU UGA UAG ARORI  GS Pr: promóter TT: transzkripciós terminációs szignál, SZF: szabályozó fehérje,, TSZE: transzlációt szabályozó elemek, SD: Shine-Dalgarno szekvencia, AR: antibiotikum rezisztencia, ORI: replikációs origo GS: gazdasejt Fúziós partner


Letölteni ppt "BIOTECHNOLÓGIA D MsC gyakorlat Tervezési feladat."

Hasonló előadás


Google Hirdetések