Előadást letölteni
Az előadás letöltése folymat van. Kérjük, várjon
1
Géntechnikák Labor FÁG DISPLAY
Fekete Nóra 2007. III. 29.
2
Mi a fág display? Gyors és eredményes módszer fehérjék vizsgálatára.
A fág genomjába egy fehérjét kódoló gént ültetünk, ami így megjelenik a fág felszínén.
3
Első lépés: Gén beillesztés
Sokféle gént (gyakran egy organizmus minden génjét) egy- egy fág genomjába illesztenek- minden fágba eltérő gént. Beillesztés a pIII-as génnél.
4
2. lépés: Protein display
A megváltoztatott pIII gén mostmár egy hozzáadott szegmentet tartalmaz, ami megjelenik a fág felszínén. Egy fág csak egy fehérjét/peptidet termel.
5
3. lépés: Könyvtár létrehozása
Az így kapott gyűjteményt könyvtárnak hívjuk. A rokon fehérjék megőrzik legtöbb fizikai és kémiai tulajdonságukat
6
4. lépés: Target Exposure
Az előzőleg immobilizált célmolekulához hozzáadjuk a fág könyvtárat.
7
5. lépés: Kötődés A könyvtár néhány tagja kötődni fog a célmolekulához. A rengeteg fehérje közül kiválaszthatjuk azokat, amik a legspecifikusabban kötődnek.
8
6. lépés: Izolálás Inkubálás után lemossuk a nem kötődött fágokat.
9
7. lépés: Amplifikáció A kiválasztott legspecifikusabban kötődő fehérjét kódoló fágot baktériumon tenyésztve gyorsan termelődik nagy mennyiség a kívánt fehérjéből, amit ezek után szekvenálhatunk. Egy milliárd fehérjéből általában félét választanak ki.
Hasonló előadás
