Az előadás letöltése folymat van. Kérjük, várjon

Az előadás letöltése folymat van. Kérjük, várjon

Az immunrendszert célzó terápiák:  Stimuláció  Szuppresszió  Moduláció.

Hasonló előadás


Az előadások a következő témára: "Az immunrendszert célzó terápiák:  Stimuláció  Szuppresszió  Moduláció."— Előadás másolata:

1 Az immunrendszert célzó terápiák:  Stimuláció  Szuppresszió  Moduláció

2

3 SCF IL-7 IL-15 IL-3 IL-4 IL-5 IL-9 GM-CSF Az immunfolyamatok szabályozása citokinek A SEJTEK ÉRÉSE Tímusz Csontvelő

4 Az immunfolyamatok szabályozása FELISMERÉS a felismerő készlet alakulása B-sejtek csontvelő naív B T-sejtek tímusz extratimikus érés belső környezet naív T ELLENANYAG KÉSZLET IgMIgG,IgA,IgE TDTI rövid életű plazmasejtek hosszú életű plazmasejtek külső környezet klonális kiterjedés (immunválasz) T-effektorok T-memória B1-sejtek IgM anti-idiotípus ellenanyagok reumafaktorok

5 IgG és IgE közvetített ADCC komplement aktiváció Az immunfolyamatok szabályozása EFFEKTOR FOLYAMATOK Ellenanyag osztály, alosztály megoszlás  FcR  fagocitózis, ADCC komplement aktiváció

6 Az immunfolyamatok szabályozása EFFEKTOR FOLYAMATOK gyulladási citokinek

7 Az immunfolyamatok szabályozása EFFEKTOR FOLYAMATOK citokin egyensúly

8 antigén felismerés BCR / TCR (jelátvivő láncok, koreceptorok) MHC a antigénből származó peptidek kötése és bemutatása adhéziós és kostimulációs molekulák (ligandumok) sejtek, sejtek és az extracelluláris mátrix közötti „kommunikáció”, homing, aktiváló vagy gátló jelek FcR CR Ag-EA ill. Ag-(EA)C immunkomplexek kötődése  aktiváló vagy gátló jelek TOLLR/ PRR patogénekre jellemző szénhidrát motívumok felismerése  endocitózis, fagocitózis, aktiváció citokinek és receptoraik sejtek, sejtek és az extracelluláris mátrix közötti„kommunikáció”, homing, sejtműködés szabályozása, aktiváló vagy gátló jelek

9  A BCR komplex L H H L Variábilis ( V ) Konstans ( C ) sejtmembrán a jelátvitelért felelős járulékos láncok: Ig , Ig  Transzmembrán domén

10 Az Ig hipervariabilis régiói CD: complementarity determining region

11 A pre-TCR és a TCR szerkezete

12 MHC IMHC II

13  2 mikroglobulin Az MHC I szerkezete és a hozzá kötődő molekulák peptid-kötő árok CD8, tapasin peptid-szállító fehérje komplex calreticulin

14 A nagy affinitással kötődő peptidek stabilizálják a molekulát, ami a Golgi-rendszeren át a felszínre jut Az antigénprezentáció endogén útja MHCI molekulák  lánca és a  2 m az ER-ban szintetizálódik Az  lánc a calnexin chaperon fehérjéhez, majd a  2 m hez kötődik. Igy alakul ki az MHCI megfelelő konformációja a peptidkötéshez A peptideket az endogén fehérjékből a proteaszóma állítja elő és a TAP „pumpálja” az ER-ba

15 Az antigénprezentáció exogén útja MHCII molekulák  és  lánca az ER-ban szintetizálódik A két lánc párosodását az invariáns lánc (li) chaperon biztosítja és egyben gátolja a peptidek kötődését Az li a korai endoszmába irányítja az MHCII molekulát Az li hasítási termékét, a CLIP-et egy erősebben kötődő peptid szorítja le

16 Immunterápiás eljárások / az immunrendszer működésének módosítása -tumorsejtek elleni válasz elősegítése -kórokozók elleni válasz elősegítése Immunstimuláció Immunszuppresszió-autoimmun folyamatok gátlása -allergiás folyamatok gátlása -transzplantációs tolerancia létrehozása -az újszülöttkori hemolítikus betegség kialakulásának megakadályozása Immunmoduláció -a TH1 / TH2 egyensúly eltolása autoimmun vagy allergiás kórképekben -az ellenanyagválasz izotípus megoszlásának megváltoztatása allergiás kórképekben

17 A FERTŐZÉSEKKEL SZEMBENI VÉDELEM a fertőzést követően  hagyományos gyógyszeres (antibiotikumok, vírus anyagcsere gátlók) passzív immunizálás (ellenanyagok, sejtek) aktív vakcinálás a fertőzést megelőzően  vakcinálás  a specifikus felismerő készlet arányának növelése specifikus immunológiai memória létrehozása

18 Fertőző betegségek, járványok Edward Jenner, 1796, himl ő „A landmark was discovery of the germ theory, which included small parasites, bacteria and viruses. This theory was mainly based on the studies of Robert Koch ( ), Louis Pasteur ( ) and many others.” IMMUN STIMULÁCIÓ -vakcináció

19 Európa első oltással foglalkozó kórháza Londonban

20 .... ezen egészségtámogató eszközökkel összhangzó egészségápolási szabályok teljesen elegend ő k a himl ő ragályozástól való megóvásra, és azért is a mesterséges himl ő vel való beoltás nemcsak fölöslegesnek t ű nik fel, hanem az egyúttal a természet törvényeivel ellenkez ő kihágásnak tekintend ő. Az emberi vagy állati vérb ő l nyert genny beoltásával külö n böz ő betegségek csírái terjesztetnek széjjel, melyek lényegesen hozzájárulnak az emberi nem degenerátiójához’’ ” Van-e az oltásnak a természet törvényei szerint létjogosultsága? Isten ments ! ” Bilz F. E.: A természetes gyógymód, 1905

21 Karikatúra az E. Jenner által bevezetett himlő oltás következményeiről

22

23 Az immunválasz manipulálása: az immunválasz befolyásolásán alapuló terápia  Nem antigén specifikus Immunstimuláció Immunszuppresszió  Immunmoduláció  Antigén specifikus Immunstimuláció Immunszuppresszió

24 Célpont: az immunválasz elemei: citokinek, adhéziós molelulák, sejtmembrán molekulák, receptorok, ellenanyagok Ellenanyagok mint gyógyszerek: specifitás  antigenicitás humanizált ellenanyagok, „targeting”

25 Antigénspecifikus immunstimuláció:  Aktív immunizálás: elölt kórokozó legyengített kórokozó keresztreaktív, nem patogén élő kórokozó, vagy ennek része nem toxikus, módosított forma (mikrobiális toxin) Eredmény: ellenanyag termelés + effektor T sejtek memória válasz Adjuvánsok: ag koncentrálása hosszú ideig fenntartása APC stimulálása a szervezet specifikus védekező képességének fokozása

26  Passzív immunizálás: hiperimmunizált állatból vagy emberből IgG –kész antigénspecifikus ellenanyag előnye: gyors, de átmeneti hátránya: nincs memória válasz, az ellenanyag eliminációja, neutralizáció, allergia, fajspecifikus immunválaszt válthat ki alkalmazás: tetanusz, kígyóharapás humán IgG: ellenanyag defficiencia  Adaptív immunitás: immunkompetens sejtekkel történő terápia -gyermekkori immundeficienciák: Kongenitális sejtes immundefficiencia forrás: csontvelö (MHC kompatibilis), vagy fötális máj, timusz immunkompetens sejtjei -enzimhiányos betegségek: adenozin deamináz, nukleozid foszforiláz szomatikus génterápia: csontvelői őssejtbe bejuttatott virális vektor, mely a kívánt hiány-gént tartalmazza.

27

28 Vakcináció –antigén specifikus immunstimuláció Oltóanyag: Kórokozó, vagy általa termelt fehérje pl. toxin ellen Élő, legyengített vírus hatékonysága  elölt vírusé (effektor mechanizmusok, CD8+T sejt szám  )  Rekombináns DNS technológia Immunizálás dendritikus sejtek segítségével –új típusú vakcinák- a jövő  Kórokozó legyengítése: sejttenyészetben szaporított vírus, ahol eredetileg nem nő (majom)  mutációk  vírus szaporodása  emberi sejtekben nem szaporodik  - oltóanyag  In vitro mutagenezis:  In vitro mutagenezis: virus gén megváltoztatása visszafordíthatatlanul pl. influenza- évente más - antigén shift tervezett mutagenezis

29 Vírusok legyengítése nem emberi sejtekben való tenyésztéssel

30 Patogén vírus Virulencia gén izolálása Virulencia gén mutációja vagy eltávolítása

31  Nem patogén mutánsok kifejlesztése: a virulenciához szükséges gén eltávolítása Salmonella typhi: UDP galactóz epimeráz mutáció  LPS szint csökken Targeting: aromás aa bioszintéziséhez szükséges enzim mutációja  Tyr, Phe szintézis nincs  ezért cssak lassú szaporodás a bélrendszerben - vaccina Csirke salmonella – állatok oltása  Konjugátum vakcina: B és helper T sejteknek ugyanazon molekuláris komplexben levő epitópokat kell felismerniükB és helper T sejteknek ugyanazon molekuláris komplexben levő epitópokat kell felismerniük Haemophilus influenzae B: Tsejt-független B sejt válasz poliszaharid a baktérium kapszulára tetanusz toxoid + poliszaharid konjugátum - T sejtektől függő, hatékony válasz 2 év alatt is Tetanusz toxoid specifikus T sejtek citokineket termelnek – B sejt válasz:a bakteriális poliszaharid ellen

32  Konjugátum vakcina: B és helper T sejteknek ugyanazon molekuláris komplexben levő epitópokat kell felismerniükB és helper T sejteknek ugyanazon molekuláris komplexben levő epitópokat kell felismerniük Haemophilus influenzae type B vaccine

33 Reverz immunogenetika T sejt epitópok meghatározására Maláriára jellemző, a 9. helyen Pro tartalmú peptid - azonosítás T sejtek proliferációja Peptid -> terápia

34  Legyengített élő mikroorganizmus, mint vektor más gének beépítése: kombinált vaccina: - baktérium, pl. Salmonella: +tetanusz toxoid ag, vagy: + Listeria monocytogenes Leishmania antigének Yersinia pestis Schistosoma mansoni - vírus vektor, pl. vaccinia +peptidek vagy fehérjék más mikroorganizmusokból mint hordozó: antigén beépítve, több ag egyszerre adható nem ismételhető: vektor hosszan tartó védettséget vált ki heterológ vaccinák - rekombináns DNS technológia  Szintetikus peptidek T sejt epitóp azonositása,  peptid szintézis Hátrány: sokfélesség ISCOM: immune stimulatory complex liposzómába zárt peptid – sejtbe bejut

35 Immunstimuláló komplex peptiddel Fúzió Peptid transzport az ER -be Peptid bemutatása az MHCI-en keresztül a T sejtek számára

36 Sikeres vakcinációs kampányok SSPE stands for subacute sclerosing panencephalitis

37

38

39

40

41

42 Diseases for which effective vaccines are still needed Diseases for which effective vaccines are still needed. *The number of people infected is estimated at ~200 million, of which 20 million have severe disease. †Current measles vaccines are effective but heat- sensitive, which makes their use difficult in tropical countries. Estimated mortality data for 1999 from World Health Report 2000 (World Health Organization).

43 polio, influenza, mumpsz, sárgaláz herpes, varicella, EBV HIV, hepatitis B, hepatitis C A vírus fertőzések típusai

44 Az immunválasz kialakulása a vírus fertőzést követően

45

46

47 Az ellenanyagválasz nem megfelelő specificitású, izotípusú illetve lokalizációjú Az ellenanyagválasz nem ad kielégítő védelmet A patogén adaptációs mechanizmusai gátolják a hatékony immunválasz kialakulását

48 DNS targeting: · · megfelelő ligandum, · internalizáció és endoszóma · fúzió lizoszómákkal · lizoszomális enzimek degradálják Szintetikus virus Új Típusú Vakcinák:

49 Ellenanyag termelés +citotoxikus T sejtek megjelenése –védelem a vírus ellen

50 Intranasalis, intrarectális, intravaginális immunizálás CTL indukálása Peyer plakkokban, lamina propriában történik Adjuvánsok : pl. kolera toxin B: cAMP indukció, IL-12 termelés különösen alkalmas nyálkahártya immunizálásra DNS alapú vakcináció: Bejuttatás: In vivo elektroporácó, génpisztoly – intramuszkulárisan Teljes Protein gén, vagy peptid epitóp MHCI, MHCII prezentáció Virális vektor (vaccinia, poxvirus) erősíti rec DNA vakcina hatását ligandum Nukleáris transzlokációs szignál DNS plazmid ? Terápiás gén Szövetspecifikus regulálható promoter Endoszomális lizis, vagy bypass

51 a vakcina típusavírusbaktériumparazita élő, legyengített kórokozó polio, kanyaró, mumpsz, rubeola, bárányhimlő, sárgaláz, rotavírusok, dengue láz, hepatitis A, tuberkulózis, tífusz, kolera, shigellózis, lepra elölt kórokozó polio, influenza, veszettség, hepatitis A/B szamárköhögés, tífusz, kolera, lepra, H. pylori, malária toxinok diftéria, tetanusz, kolera, lépfene, shigellózis, E. coli alegység vakcinákhepatis B, herpes simplex 2, influenza, papilloma, HIV, veszettség HiB, szamárköhögés, tífusz meningococcusok, pneumococcusok, H. pylori, malária, schistosomiasis, leishmaniasis vektor vakcinák HIV, kanyaró, veszettségtuberkulózis, tífusz, kolera, shigellózis malária nukleinsav vakcinák HIV, influenza, herpes simplex 2, veszettség, hepatitis B, hepatitis C, hepatitis D, papilloma, HTLV1, CMV tuberkulózis, tífuszmalária, schistosomiasis, leishmaniasis VAKCINÁK / kísérleti szakaszban

52 TERVEZÉS az epitóp kiválasztása az adjuváns kiválasztása irányítás, a bejuttatás helyének és módjának kiválasztása

53 PAMPVirulencia Faktorok Evolúció során konzervált termékKülönböző patogéneknél más-más A mikroorganizmusok alapvető funkcióinak fenntartására fejlődött ki A gazdaszervezet adaptációja eredményeként fejlődött ki Nem specifikus a patogénre, patogének bizonyos csoportjára specifikusA patogénekre specifikus A természetes immunrendszert célozza PRR nem ismeri fel közvetlenül, néhány közülük befolyásolhatja a gazdaszervezet válaszát a PRR-en keresztül A patogén felismerés és annak patogén virulenciát szolgáló módosulása PAMP: patogen associated molecular pattern

54 Patogén mutációk szerepe a T-sejt felismerés gátlásában

55

56 A megfelelő epitópok kiválasztása

57 N C konformációs determináns hozzáférhető lineáris determináns nem hozzáférhető lineáris determináns N C denaturáció limitált proteolízis C N C N új determináns

58 Stratégia új generációs vakcinák fejlesztésére Stratégia új generációs vakcinák fejlesztésére Vírusok – nem fejeznek ki megfelelő T sejt epitópot (szelekció az evolúció során) Tumor – hatékony T sejtek deléciója Immunogenitásának fokozása: „epitóp enhancement”  peptid- MHC kötődés affinitásának növelése, MHCII –T H sejtek (pl. HIV), horgonyzó aminosavak javítása, kombinatórikus peptid könyvtár  peptid-MHC komplex TCR-hez kötődés affinitásának növelése: kis és nagy affinitású T sejtek aktiválása, vagy repertoár torzulás pl.: tumor epitópot felimerő T sejtek számának növelése  TCR keresztreaktivitás növelése: peptid kiméra – különböző vírus törzsek felismerése

59 A 9 aminosavból álló peptidek megkötésére alkalmas peptid-kötő árokban csak a horgonyzó aminosavak illeszkednek a megfelelő peptid-kötő zsebekbe A 9 aminosavból álló peptidek megkötésére alkalmas peptid-kötő árokban csak a horgonyzó aminosavak illeszkednek a megfelelő peptid-kötő zsebekbe A HLA-A2 és -B27 molekulák peptidkötése L V R HLA-A2HLA-B27

60 új peptidek tervezése nagyobb affinitás keresztreagáló

61 A vakcina hatékonyságának fokozása a szekvencia módosításával

62 TERVEZÉS az adjuváns kiválasztása

63 az antigén immunogenitásának fokozása /a hordozó és az adjuváns partikularizáció (Al-hidroxid/foszfát, liposzómák, viroszómák) polimerizáció ( mannóz polimerek, MAP) emulzió (olaj / víz) mikrokapszuláció ( különböző sebességgel bomló polimerek) bakteriális eredetű termékek más kémiai adjuvánsok ( polinukleotidok, CpG ) citokinek ( IL-2, IL-4, IL-6, IL-10, IL-12, GM-CSF, TNF- , IFN-  ) antigén irányítás ( CR-ok, FcR-ok, MR, TLR-ok)

64

65

66

67 TERVEZÉS irányítás, a bejuttatás helyének és módjának kiválasztása

68 BCR CR FcR B / Mf / DC (alpopuláció) ?

69 vakcina típus élő, legyengítettelölt / alegységDNS / RNS az immunválasz típusa ellenanyag közvetítettB- sejtek+++ sejtesCD4+ T-sejtek+/- TH1+/-TH1*+++ TH1* CD8+ T-sejtek antigén bemutatásMHC I / IIMHC IIMHC I / II memóriahumorális+++ sejtes++++/-++ előállításaa kifejlesztés és termelés technikai kivitelezhetősége ár+++++ szállítás és tárolás++++ biztonságosság A különböző vakcina típusok összehasonlítása

70

71 naiv memória ÉLETKOR naiv memória életkor TOXICITÁS az adjuváns kedvezőtlen hatása (TH1/TH2) beépülés a genomba / onkogének aktiválása autoimmunitás előidézése (molekuláris mimikri) szennyeződések okozta (vírus, prion)

72 A hatékony vakcina: - biztonságos –alkalmazható gyermekeknek, felnőtteknek, mindenkinek - hatékony a fertőzés ellen, vagy a betegség ellen (kevésbé jó) - megfelelő, tartós védettséget biztosít- memória (védettség élethosszig) - neutralizáló ellenanyagot indukál - T sejtes választ indukál - stabil, olcsó, kevés mellékhatás - könnyen alkalmazható (orális vakcina, egy alkalom az ideális-pl. Sabin csepp) - elfogadható és alkalmazható mindenhol (fejlődő világ). Adjuváns alkalmazása: Adjuváns alkalmazása: nem specifikus szignál- makrofágok stimulálása citokin indukció,antigén-depó: lassú felszívódás alumínium hidroxid alap, vagy olaj emulzió. Kevert oltásnál egyik adjuválhatja a másikat (pl. Bordatella Pertussis+ tetanus+diftéria) citokinek együttes alkalmazása: IL-12 - TH1 választ segiti Az immunizálás módja: Lényeges az antigén szervezetbe jutásának helye Orális vakcinák – mucosa szerepe (MALT)

73 CTL aviditás növelése: HLA- tetramer: peptid+HLA biotinilálva + avidin a tetramerekkel nagy aviditású CTL stimuláció (vírus), vagy: CTL szelekció –visszaadás – tumor sejtek hatékony pusztítása Cytokinek és kostimulátor molekulák: Adjuváns szerepe: megfelelő citokinek megfelelő mennyiségben való szintézisének stimulációja Vakcinával kombinált alkalmazás Citokin gén transfekció- erősíti a virális vektor hatását IL-12, IL-2, IL-15 Ko-stimulátorok: B7-1 (CD80), CD40L (CD154)

74 Dendritikus sejtek mint vakcina hordozók

75 A tumornövekedéssel párhuzamosan kifejlődő anti-tumor válasz modellje a)Tumor sejt megjelenik b)Immunrendszer észleli, DC feldolgozza, bemutatja a tumor antigéneket c)Aktivált T sejtek, ellenanyagok megkísérlik elpusztítani a tumort d)Tumor eltávolítása nem hatékony: sok sejt, sok mutáció-megváltozott ag, tumor gazdasejt elleni pusztító hatása. Elvándorlás, áttét

76 Az anti-tumor válasz manipulálása – terápiás vakcináció Immunszuppresszív környezet, tumor megváltozása!

77 Az anti-tumor válasz kiváltása – megelőző vakcináció Tumor-specifikus memóriasejtek aktiválása  hatékony másodlagos válasz


Letölteni ppt "Az immunrendszert célzó terápiák:  Stimuláció  Szuppresszió  Moduláció."

Hasonló előadás


Google Hirdetések