Műszerezettség és mintaelőkészítés kapcsolat Kiegészítések
1. Nagy műszerezettség és mintaelőkészítési szükséglet Fogalmak: On-line Off-line At-line In-line
Folyadékkromatográf, mint mintaelőkészítő egység! Kolonna követelmény: rövidebb, mert az MS, mint elválasztó egység működik. Feladata a mátrix interferencia elkerülése! Ionelyomás vagy érzékenyítés elkerülése!
Mi különbség az LC-MS és az LCMS-MS nyújtotta teljesítmény között? LC-MS: minőségi információ kevés! LC-MS-MS: minőségi információ, interferencia mentes mennyiségi analitika!
Tömeganalizátorok használata 2012! Q kvadrupol IT ioncsapda TOF repülési idő analizátor IMS ion mobilitási spektométer ICR ion ciklotron tömegspektrometer LIT lineáris ioncsapda
LC-MS-MS
Mátrixot tartalmazó mintáknál és nagyon eltérő polaritásúaknál, a minta előkészítést a folyadékkromatográfiában grádienselucióval végezzük! Elsődlegesen oldószergrádienssel!
Folyadékkromatográfiás módok hatékonysága és elemzési időszükséglet összefüggése a grádienselúcióban! Mérőszáma:csúcskapacítás(P). A csúcsfelbontó kapacitás a vegyületek molekulatömegétől, a folyadékkromatográfiás módtól és a töltet morfológiájától függ!
Az elválasztást csúcskapacitással(P)jellemezzük. Fizikai értelme, hány komponenst tudunk elhelyezni, szorosan egymás mellett, hogy a felbontás,Rs=1. Feltételezve, hogy csúcsok egyenlő szélességűek(w) P=tg/w, vagy P=1+tg/w
Folyadékkromatográfiásan kis molekulatömegű anyagok
Választási lehetőségek HPLC UPHLC megvalósítása: az alábbiakkal 2 mikrométer alatti töltetek:teljesen porózus vagy héjszerű HTLC:kolonna stabilitás Héjszerű töltetek: 3 vagy 2 um alatti töltetek
Nagy molekulatömegű anyagok
QxQ: mennyiségi analitikára. Nincs tökéletes kolonna, amelynél a mátrix zavarás kiküszöbölhető lenne! Kísérő vagy kettős belső standard alkalmazása szükséges a false pozitív vagy false negatív hiba kiküszöbölésére!
Mátrixhatás kiküszöbölése: 1.Mátrixra való kalibrálás:szpájk. 2.Kisérő standard vagy kettős belső standard 3.Izotóp higításos módszer
Izotóp hígításos módszernél vagy deuterizált vagy szén izotóp jelzett.
Minőségi meghatározásra: MADI-TOF Nem alkalmas mennyiségire! MALDIxQqQ, mind mennyiségi, mind minőségi analitikára!
Trendek: Kis felbontású készülékek helyett nagy felbontásúak!
HPLC-MS, helyett UHPLC-MS
2D-LC-MS
Szoftver segítség az adatfeldolgozáshoz! Orbitrap analizátor bevezetése!
Ion mobilitási spektrométer elve Megjelentek az ion mobilitás spektrométer (IMS) kombinációk!
Spektrum. IMS: gyors felvételek
Ma oz off-line technika a döntő
LC-SPE on line Off-line oldószercsere SPE-NMR on-line
Követelmények az SPE-vel szemben: Adott mozgófázisnál az oszlop visszatartása nagy legyen. Ezt segíti a mozgófázis gyengébbik komponensének adagolása! Össze kell hangolni a folyadékkromatográfiás módszert, az SPE kémiájával
RPLC-víz NPLC-n-hexán HILIC-AN Minden esetben a fókuszáló hatást kell kihasználni!
RPLC: Ha vegyület logP vagy logD értéke 2 alatt van, akkor a fókuszáló hatás kevésbé érvényesül! Ha logP vagy logD értéke 2, akkor a víz hozzáadására a visszatartás jelentősen nő,érvényesül a fókuszáló hatás!
SPE mintadúsító és tisztító oszlopok felületi kémiája nagy átfedést mutat a folyadékkromatográfiás kolonnákéval! Szilikagél alapú alkilmódosítottak! Poláris fordított fázisú töltetek! C-8 módosítás Szerves polimer alapúak ioncserélők
NMR jel függ a kolonna elejének koncentráló hatásától!
LC-FTIR, nincs újabb fejlesztés. Ok: érzékenység megfelelő oldószer kiválasztása a méréshez az on-line csatolásnál Off-line technika nehézkes
Új trend a GC-MS technikában: GC-MS-MS a GC-MS helyett Elemanalitikában a speciációs elemzés előtérbe kerülése, Így GC-ICP-LRMS vagy HRGC-HRMS LC-ICP-LRMS vagy UHPLC-HRMS
IC-ICP-MS helyett IC=ionkromatográf CIC=capillary ion chromatograph CIC: kisebb mozgófázis fogyasztás nagyobb érzékenység