Az előadás letöltése folymat van. Kérjük, várjon

Az előadás letöltése folymat van. Kérjük, várjon

7. szeminárium VAKCINÁCIÓ, POLIKLONÁLIS ÉS MONOKLONÁLIS ELLENANYAGOK.

Hasonló előadás


Az előadások a következő témára: "7. szeminárium VAKCINÁCIÓ, POLIKLONÁLIS ÉS MONOKLONÁLIS ELLENANYAGOK."— Előadás másolata:

1 7. szeminárium VAKCINÁCIÓ, POLIKLONÁLIS ÉS MONOKLONÁLIS ELLENANYAGOK

2 AZ ELSŐ VÉDŐOLTÁS Edward Jenner Bebizonyította, hogy egy másik egyedből izolált gyenge patogénnel történő vakcináció védettséget adhat egy hasonló, azonban veszélyesebb kórokozó ellen. A WHO oltási kampányának köszönhetően 1975-re az ellenőrzött országokban nullára csökkent a fertőzések száma, így 1979-ben kijelentették, hogy a feketehimlő vírusa kipusztult.

3 IMMUNIZÁLÁS ATTENUÁLT (LEGYENGÍTETT) KÓROKOZÓKKAL VESZETTSÉG ELLEN Louis Pasteur Nyulakban tenyésztett vírusokat, majd az érintett idegek szárításával legyengítette azokat, és belőlük készített oltóanyagot.

4 DIPHTERIA ÉS TETANUS TOXIN ELLENI ANTITESTEK (ANTITOXINOK) Koch Laboratórium, Németország, Megfigyelések: Védő hatású anyagok (kórokozó-specifikus antitestek) a vérben Néhány betegség csak egyszer fordul elő életünk során (a fertőzés későbbi védettséget vált ki) Egyes betegségek oltással megelőzhetőek A vér antibakteriális komponenseket tartalmaz, pl. antitoxinok  szérum terápia = passzív immunizálás Emil Behring Shimbasaru Kitasato

5 EXTRACELLULÁRIS PATOGÉNEK (ec. baktériumok, többsejtű paraziták) INTRACELLULÁRIS PATOGÉNEK (vírusok, ic. baktériumok, egysejtű paraziták) A veleszületett és szerzett immunitás legtöbb effektor sejtje közreműködik, de kitüntetett szerepet játszanak az antitestek. NK- és CD8+ T-sejtek, valamint Th1- makrofág válasz jellemző. A neutralizáló antitestek segítenek. Osztódás a sejten kívül Osztódás a sejten belül MI TÖRTÉNIK, AMIKOR MEGFERTŐZŐDÜNK EGY PATOGÉNNEL?

6 A VAKCINÁCIÓ ALAPELVEI I. Célok: fertőzések megelőzése, a betegség illetve a továbbterjedés megakadályozása Specificitás: egy adott kórokozó elleni immunválasz kiváltása Memória: A fertőzést követő folyamat amely lehetővé teszi az adott, vagy hasonló korokozó elleni azonnal védelmet

7 Naív sejt effektor sejtek Antigén felismerése első alkalommal (elsődleges immunválasz) Antigén felismerése második alkalommal (másodlagos immunválasz) memória sejtek effektor sejtek A HATÉKONYABB IMMUNVÁLASZ ALAPELVE

8 ELSŐDLEGES ÉS MÁSODLAGOS ADAPTÍV IMMUNVÁLASZ

9 A VAKCINÁCIÓ ALAPELVEI II. A védelem mechanizmusai: 1.antitestek: neutralizáció – megtelepedés gátlása precipitáció/agglutináció – terjedés gátlása 2.T-sejtes válasz: A segítő T-sejtek elősegítik az antitesttermelést, fokozzák a sejtes immunválaszt, valamint az immunológiai memória kialakulását

10 Élő, csökkentett fertőzőképességű mikróbák (ált. vírusok): MMR (Morbilli /kanyaró/ - Mumpsz - Rubeola /rózsahímlő/), OPV (orális polio vakcina = Sabin-csepp), BCG (tuberkulózis), Rotavírus, Influenza, Sárgaláz Előnyeik:  Utánozzák a természetes kórokozót  Beindítja a természetes immunválaszt is (PAMP-PRR)  CD4 és CD8 T-sejt válasz  Hatékonyabb CTL válasz Hátrányuk:  Legyengült immunrendszer esetében fertőzést válthat ki A sejtek belsejében szintetizálódó vírusfehérjéket a sejt hatékonyan prezentálja az MHC I molekulákon keresztül. (A többi vakcina típusra nem igaz.) VAKCINÁK TÍPUSAI I. Élő, attenuált (legyengített) kórokozót tartalmazó vakcinák

11 Vegyi anyagokkal, hővel, vagy radioaktivitással elölt patogének Influenza, Pertussis (szamárköhögés), Hepatitis A, IPV (Inaktivált polio vakcina = Salk) Előnyeik:  Tartalmazza a mikrobiális mintázatot (PAMP), melyet a természetes immunitás felismer Hátrányaik:  Nem serkenti a CD8+ T-sejtek működését  az inaktivációs eljárás következtében csökkenhet az immunogenitás VAKCINÁK TÍPUSAI II. Elölt (inaktivált) kórokozót tartalmazó vakcinák

12 Vegyi anyagokkal, hővel, vagy radioaktivitással elölt patogének Tetanusz és diftéria toxoidok (DT), Hepatitis B, Hib (Haemophilus influenzae B típus), Meningococcus C antigen Toxoidok: inaktivált exotoxinok Hib: kapszuláris poliszacharidot tartalmaz Hep B: sejtfelszíni antigén, amelyet élesztő sejtekben klónoznak Men C: poliszacharid antigén fehérje hordozóhoz kötve (komplex antigén) Előnyeik:  Tisztított mikrobiális antigének  Egyszerűen előállíthatóak  Mellékhatások kockázata kissebb Hátrányaik:  Nem serkenti a CD8+ T-sejtek működését  Adjuvánsok hozzáadása szükséges VAKCINÁK TÍPUSAI III. Alegység vakcinák

13 A biztonsági szabványok sokkal szigorúbbak a preventív kezelések esetében a terápiás kezelésekhez képest Az élő-attenuált vakcinák hatékonyabbak lehetnek, mint a nem-replikálódó vakcinák, ám használatuk kockázatosabb Az indukált immunválasznak elég erősnek kell lennie ahhoz, hogy klinikailag releváns legyen Egyéni és társadalmi szintű kockázatok és haszon (relatív, és idővel változik) Etikai kérdések NE FELEDD! Biztonság Hatékonyság

14 NÉHÁNY ELLENJAVALLAT A VAKCINÁCIÓVAL SZEMBEN  Ne adjunk oltást aktuálisan beteg személynek!  Ne oltsunk élő vakcinával immunszupprimált betegeket!  Ne adjunk élő vakcinát terhes nőknek !  Minden típusú oltást kerüljünk a terhesség első trimeszterében!  HIV fertőzött egyén (immunszuppresszált állapot!) oltható MMR-el de BCG-vel nem.

15 MONOKLONÁLIS ELLENANYAGOK monoklonális ellenanyagok egy B-limfocita klónjai kötődés egy fajta epitóphoz poliklonális ellenanyagok több B-limfocita klónjai POLIKLONÁLIS ELLENANYAGOK kötődés több fajta epitóphoz

16 POLIKLONÁLIS ELLENYANYGOK Ag Immunszérum Poliklonális antitest Ag B-sejt készlet Aktivált B-sejtek Ellenanyag termelő plazmasejtek Antigén specifikus antitestek - Több B-limfocita klón termékei - Különböző antigén-specificitás, affinitás és izotípus

17 MONOKLONÁLIS ELLENANYAGOK (MAb)  egyetlen B-limfocita klón termékei  azonos antigén- specificitás, affinitás és izotípus  jelenléte emberekben patológiás állapotot jelez (plazmasejt tumor = myeloma multiplex)

18 (1) Egér immunizálása (antigénnel) (2) B-sejtek izolálása a lépből (3) Myeloma sejtek tenyésztése (4) Myeloma sejtek és B-sejtek fúziója (5) A sejtvonalak elkülönítése (6) A megfelelő sejtvonalak kiválasztása (7) In vitro (a) vagy in vivo (b) felsokszorozás (8) Összegyűjtés MONOKLONÁLIS ANTITESTEK ELŐÁLLÍTÁSA (az előállításról bővebben a függelékben)

19 Poliklonális ellenanyagMonoklonális ellenanyag Felsimert antigéndeterminánsok száma néhány (gyakori keresztreakciók) többnyire egy Specificitáspolispecifikusmonospecifikus Affinitás változó (különböző antitestek) magas Nem specifikus immunglobulinok koncentrációja magasalacsony Előállítás költségealacsonymagas Standardizálhatóságnincs (vagy nehéz)könnyű Mennyiségkorlátozottkorlátlan Alkalmazhatóságmódszerfüggőkitűnő POLIKLONÁLIS ÉS MONOKLONÁLIS ANTITESTEK TULAJDONSÁGAI

20 VÉDETT EGYÉN szérum ellenanyag PASSZÍV IMMUNIZÁLÁS  A recipiens immunrendszere nem aktiválódik  Azonnali, de ideiglenes védelem/hatás  Immunglobulin lebomlás: 3-6 hónap Humán immunglobulint termelő transzgénikus egér egér monoklonális ellenanyagok VESZÉLYEZTETETT EGYÉN (immundeficiens - hypogammaglobulinaemia) immunizálás humán monoklonális ellenanyagok humanizált monoklonális ellenanyag immunizálás

21 TERÁPIÁBAN HASZNÁLT ANTITESTEK KÜLÖNBÖZŐ TÍPUSAI Egér Kiméra Humán Humanizált *A humanizált ellenanyagok nem humán fajokból származnak, amelyek fehérje szekvenciáit megváltoztatták, annak érdekében, hogy fokozzák hasonlóságukat az emberekben termelődő antitest variánsokhoz (kivéve CDR hurkok)!

22 PASSZÍV IMMUNIZÁLÁS TípusAlkalmazás Intramuszkuláris (kevésbé hatékony az alacsonyabb dózis miatt) HBV-Ig; Varicella-zoster-Ig; Diftéria és tetanusz antitoxinok. Intravénás (IVIG)Bruton-agammaglobulinémia; Variábilis és kevert immundeficienciák hypogammaglobulinémiával; Méreg ellenes ellenanyag terápia; Ezek mesterségesen szerzett immunitást eredményeznek, míg az anyai IgG átjutását a magzatba rendszerint természetesen szerzettnek nevezzük.

23 A MONOKLONÁLIS ELLENANYAGOK DIAGNOSZTIKUS ALKALMAZÁSAI Sejt típusok azonosítása Immunhisztokémia Leukémiák/limfómák jellemzése sejtfelszíni (CD „cluster of differentiation”) markerekkel Sejtek izolálása CD34+ őssejtek izolálása autológ/allogén transzplantációhoz (perifériás vérből) Vércsoport meghatározás (anti-A, anti-B, és anti-D monoklonális ellenanyagokkal) Sejtfelszíni és intracelluláris antigének azonosítása Sejt aktivációs állapot

24 A MONOKLONÁLIS ELLENANYAGOK TERÁPIÁS ALKALMAZÁSAI 1)Anti-TNF-α terápia A TNF-α túltermelése jellemző több szisztémás autoimmun betegségre is. 2)Tumor ellenes terápia / Célzott kemoterápia Kevés tumor-specifikus marker, ezért limitált a használhatósága, azonban a mellékhatások tekintetében sokkal jobbak, mint a többi szer. 3)Immunszuppresszió, transzplantációt követő kilökődés megelőzése Sejttípus specifikus 4)Gyógyszer semlegesítés Pl. anti-digoxin antitestek digoxin túladagolás kezelésére

25 Infliximab (Remicade): 1998 óta, kiméra Adalimumab (Humira): 2002 óta, rekombináns humán Etanercept (Enbrel) – dimer fúziós fehérje (TNF-α receptor + Ig Fc-rész) Nem valódi monoklonális ellenanyag, nincs Fab vég, a specificitást a TNF-receptor adja! Az anti-TNF-α terápia alkalmazási területei: Rheumatoid arthritis Spondylitis ankylopoetica (Behterew-kór) Psoriasis vulgaris, arthritis psoriatica Crohn-betegség, colitis ulcerosa (rendszerint – még – nem a terápia első vonalaként) 1) ANTI-TNF-α TERÁPIA

26 Nem konjugált antitest (ábrán: Naked MAb) Anti-CD20 (rituximab – Mabthera/Rituxan, kiméria): B-sejtes Non-Hodgkin lymphoma Anti-CD52 (campath – Mabcampath, humanizált): krónikus lymphoid leukémia Anti-ErbB2 (trastuzumab – Herceptin, humanizált): mellrák Anti-VEGF (bevacizumab – Avastin, humanizált): colorectalis tu. (+ Lucentis!) Anti-EGFR (cetuximab – Erbitux, kiméra): colorectalis tu. (+ Vectibix, rekomb. humán!) A tumoros sejtek pusztítása opszonizált fagocitózis, ADCC vagy komplement-mediált lízis útján. Konjugált antitest (ábrán: Immunoconjugates) Anti-CD20 + ittrium-90 izotóp (ibritumomab - Zevalin) Anti-CD20 + jód-131 (tositumomab – Bexxar) A konjugátum a tumorsejtek közvetlen közelében fejti ki hatását. 2) TUMOR ELLENES TERÁPIA

27 Basiliximab Daclizumab 3) IMMUNSZUPPRESSZIÓ IL-2R antagonista antitestek – meggátolják a T-sejt aktivációt, és vele a transzplantátum kilökődését Egyéb: Omalizumab (Xolair) Anti-IgE közepes-súlyos allergiás asztmára Efalizumab (Raptiva): anti-CD11a, humanizált – psoriasis (pikkelysömör)

28 CÉLZOTT MAb TERÁPIÁK NameTypeTargetIndications Alemtuzumab (Mabcampath) Daclizumab (Zenapax) Basiliximab (Simulect) Rituximab (Rituxan/Mabthera) Trastuzumab (Herceptin) Gemtuzumab Ibritumomab (Y 90 ) Edrecolomab Gefitinib Imatinib Monoclonal Ab, humanized Monoclonal IgG1, chimeric Monoclonal IgG1, humanized Monoclonal IgG4, humanized Calicheamicinnel konjugált Monoclonal IgG1, murine Monoclonal IgG2, murine EGFR-TKI KIT-TKI CD52 IL-2 R CD20 HER2/neu CD33 CD20 EpCAM EGFR TK TK CLL, CML transplantation Lymphoma, RA Breast cancer, NSC lung cancer leukemia lymphoma CRC NSCLC GIST, CML

29 KIEGÉSZÍTŐ INFORMÁCIÓK

30 Kötelező védőoltások (Magyarország – 2014) Oltás neveBeadás időpontja BCG0-4 hetesen DTPa+IPV+Hib2 hónaposan PCV-132 hónaposan DTPa+IPV+Hib3 hónaposan DTPa+IPV+Hib4 hónaposan PCV-134 hónaposan MMR15 hónaposan PCV-1315 hónaposan DTPa+IPV+Hib18 hónaposan DTPa+IPV6 éves korban Kampányoltások MMR revakcináció11év, általános iskola 6. osztályában, szeptember dTAp emlékeztető oltás11év, általános iskola 6. osztályában, október Hepatitis B13 év, általános iskola 7. osztályában, szeptember OLTÁSI NAPTÁR BCG: Bacillus Calmette-Guérin/tuberculosis elleni oltóanyag, TBC (gümőkór) ellen DTPa: diftéria-tetanusz-acelluláris pertussis komponenseket tartalmazó oltóanyag. Diftéria: torokgyík, Tetanusz: merevgörcs, Pertussis: szamárköhögés IPV: Inaktivált poliovírus vakcina. Polio: gyermekbénulás Hib: Haemophilus influenzae b elleni oltóanyag B típusú Haemophilus influenzae [Hib]: bakteriális agyhártyagyulladás PCV 13: 13-valens konjugált pneumococcus vakcina A pneumococcus baktérium egyebek mellett tüdő-, középfül- és agyhártyagyulladást okozhat MMR = morbilli-mumpsz-rubeola elleni vakcina. Morbilli: kanyaró, Mumpsz: parotitis epidemica, Rubeola: rózsahímlő dTap = diftéria-tetanusz-acelluláris pertussis komponenseket tartalmazó oltóanyag újraoltás céljára Heptatitis B: Hepatitisz B elleni oltás, Hepatitis B: fertőző májgyulladás

31 A MONOKLONÁLIS ELLENANYAGOK NEVEZÉKTANA ElőtagCélpontEredetUtótag Változó -ki(n)- interleukin-u- humán mab -ci(r)- kardiovaszkuláris-o- egér -co(l)- vastagbél tu.-xi- kiméra -neu(r)- idegrendszer-zu- humanizált

32

33 Spleen Immunisation Myeloma cell HGPRT - B cells, HGPRT + PEG fusion HAT selection Testing supernatants for specific antibody production Selection of hybridoma cells *Hypoxantine-guanine phosphoribosyltransferase * HAT= hypoxanthine, aminopterine, thymidine aminopterine

34 Myeloma multiplexes beteg plazmasejteiegészséges egyén plazmasejtjei Myeloma multiplex = plazmasejt tumor Klónok korlátlan szaporodása  monoklonális antitest termelés (azonos könnyű- és nehézlánc típus, azonos alosztály – ha van)


Letölteni ppt "7. szeminárium VAKCINÁCIÓ, POLIKLONÁLIS ÉS MONOKLONÁLIS ELLENANYAGOK."

Hasonló előadás


Google Hirdetések