Petasiger és Paryphostomum metacercaria-k előfordulása pontyfélék oldalvonalszervében Cech Gábor 1, Molnár Kálmán 1, David I. Gibson 2, Papp Melitta 3,

Az előadások a következő témára: "Petasiger és Paryphostomum metacercaria-k előfordulása pontyfélék oldalvonalszervében Cech Gábor 1, Molnár Kálmán 1, David I. Gibson 2, Papp Melitta 3,"— Előadás másolata:

1 Petasiger és Paryphostomum metacercaria-k előfordulása pontyfélék oldalvonalszervében Cech Gábor 1, Molnár Kálmán 1, David I. Gibson 2, Papp Melitta 3, Deák-Paulus Petra 3, Juhász Lajos 4, Tóth Norbert 4, Székely Csaba 1 1 MTA Agrártudományi Kutatóközpont, Állatorvos-tudományi Intézet, Budapest 2 Department of Life Sciences, Natural History Museum, London 3 NÉBIH, Állategészségügyi Diagnosztikai Igazgatóság, Budapest 4 Debreceni Egyetem, Mezőgazdaság- Élelmiszertudományi és Környezetgazdálkodási kar, Természetvédelmi Állattani és Vadgazdálkodási Tanszék, Debrecen

2 A digenetikus fejlődésű mételyek jelentősége -A laposférgek Platyhelminthes törzsének Trematoda osztályába tartozó férgek a legjelentősebb humán és állati kórokozók közé tartoznak. -Számos fajról ismert, hogy halakban esetenként súlyos elváltozásokat képesek okozni, mint például a Diplostomum pseudopatheceum a szemlencsében, vagy a Thylodelphis nembe tartozó fajok a szem üvegtestében. Ebbe a csoportba tartozik az Apophallus muehlingi faj is, amely a pontyfélék feketepettyes betegségének egyik változatát idézi elő. -zoonotikus tényező: pl. Trichobilharzia fajok, amely az emberi bőrön viszkető, vörös kiütéseket okoznak.

3 metacercaria cercaria adult pete miracidium redia

4 Paryphostomum és Petasiger fajok (bevezetés) Koncérból és vörösszárnyú keszegből 2 metacercaria mintát (CK1 és CK2) sikerült izolálni Keszthely területéről, melyeket morfológiai tulajdonságaik alapján Paryphostomum radiatum-ként határoztunk meg A 2 mintából DNS izoláltunk, felszaporítottuk az ITS régiót, majd megszekvenáltuk azokat A génbanki adatokkal való összevetés során azt az eredményt kaptuk, hogy a 2 minta a Petasiger phalacrocoracis fajhoz tartozik Újabb mintavételezés

5 Mintavételézés Hortobágy Kis-Balaton Zala-torkolat Keszthelyi öböl Mintázott gazdafajok: Metacercaria: vörösszárnyú keszeg (Scardinus erythrophtalmus), koncér (Rutilus rutilus), karikakeszeg (Blicca bjoerkna), ponty (Cyprinus carpio), dévérkeszeg (Abramis brama) stb. Adult férgek: kormorán (Phalacrocorax carbo) Duna Balatonszemes Tihany Tisza Balatonkenese

6 Módszerek -morfológiai vizsgálatok: mikroszkópos vizsgálatok natív példányokon -molekuláris vizsgálatok: nested PCR az ITS szakaszra (~1000 bázispár) ITS szakasz szekvenálása (fajazonosítás) szekvenciák analízise, filogenetikai vizsgálata 18S rDNS5,8S rDNS28S rDNS ITS1 ITS2 ITS régió

7 HalGyűjtés helye Vizsgált/ferőzött halak száma Halhossz Fertőzött pikkelyek az oldalvonalban (%) Metacercaria-k átlagos száma a pikkelyekben Bodorka K, KB, Sz, Ti55/747-13551-5 (2) D, K, Sz, T, Ti, U19/2315-30451-6 (2,2) Vörösszárnyú keszeg K, T, Ti, U6/67-12601-7 (1,9) K, T, Ti6/816-30601-6(2,1) Kárász K, H, Ti, U3/2110-14301-2 (1,2) K, KB, Sz, Ti0/731-3500 Ponty H2/8115-1851(1) KB, S4/745-55651-6(2,5) CompóK, KB2/220-22651-4(1,3) Szivárványos ökleK5/54-7751-6(2) BagolykeszegT2/230-3151 Lapos keszegD, T1/631-3251 Karikakeszeg K, Sz, U0/187-1200 H, K, S, T, Ti, U1/1816-30101 DévérkeszegH, K, S, T, Ti, U0/11712-5000 Szélhajtó küszK, Ti, U0/567-1300 PaducD0/440-4400 MárnaD0/250-5200 Pettyes busaH0/328-3000 AmurH0/328-3100 NaphalK, Ti3/127-16201-3(1,2) SüllőH, K1/928-3651 SügérK, Ti, U0/138-1000 AngolnaH, K, Ti0/9900 Folyami gébK, KB, Sz, Ti0/806-1400 D - Duna, H- Halgazdaság, K - Keszthely, KB - Kis-Balaton, S - Siófok, Sz - Balatonszemes, T - Tisza, Ti - Tihany, U - Balatonújhely A metacercaria-k előfordulása

8 Morfológia megfigyelések I. - Metacercaria 2 féle típusú metacercaria volt megfigyelhető : egyenlő tüskék a szájnyílás körül 3 nagyobb tüske a szájnyílás körül A metacercaria-k az oldalvonal pikkelyeiben helyezkednek el

9 Morfológia megfigyelések II. – Adult példányok

10 Morfológia megfigyelések III. – Adult példányok Paryphostomum radiatumPetasiger phalacrocoracisPetasiger exaeretus A Pa. radiatum minden mintában előfordult, de csak az utóbélben megtalálható A Pe. phalacrocoracis egy kivételével minden esetben, az előbélben fordul elő A Pe. exaeretus csak két mintában (Hortobágy), szintén az előbélben fordul elő A Paryphostomum és a Petasiger genus-ok a szívóka helyzete alapján biztonságosan elkülöníthetőek

11 KM3 Petasiger phalacrocoracis PA1 Petasiger phalacrocoracis PA2 Petasiger phalacrocoracis PA4 Petasiger phalacrocoracis KM1 Petasiger phalacrocoracis Petasiger phalacrocoracis AY245709 CK2 Petasiger phalacrocoracis CK1 Petasiger phalacrocoracis PH1 Petasiger sp. PH2 Petasiger sp. Paryphostomum radiatum AY245708 KM7 Paryphostomum radiatum Isthmiophora melis AY168932 KM6 Paryphostomum radiatum KM5 Paryphostomum radiatum Isthmiophora hortensis AB189982 Echinostoma hortense U58101 PA3 Petasiger sp. KM2 Petasiger sp. KM4 Petasiger sp. Fasciola hepatica JF432078 Echinostoma trivolvis AF067852 Echinoparyphium recurvatum KJ435271 Euparyphium albuferensis AJ564384 100 60 100 49 65 88 100 0.02 A Paryphostomum és Petasiger fajok molekuláris vizsgálatának eredményei I. Adult példányok morfológiai vizsgálata alapján Petasiger exaeretus

12 A Paryphostomum és Petasiger fajok molekuláris vizsgálatának eredményei II. Isthmiophora melis KM5 Paryphostomum radiatum KM6 Paryphostomum radiatum KM7 Paryphostomum radiatum Echinostoma sp. PCerc-3 Echinostoma sp. PCerc-2 Paragonimus westermani KM2 Petasiger exaeretus KM4 Petasiger exaeretus PA3 Petasiger exaeretus Echinostoma sp. PCerc-4 Echinostoma sp. LCerc-2 Echinostoma sp. LCerc-3 Petasiger sp. 4 Petasiger sp. 3 Petasiger islandicus 1 Petasiger islandicus Petasiger sp. 1 Petasiger sp. 2 Petasiger neocomense Fasciola hepatica 100 99 51100 69 99 51 93 76 98 77 0.1 CK1 Petasiger phalacrocoracis CK2 Petasiger phalacrocoracis PA2 Petasiger phalacrocoracis Petasiger phalacrocoracis PH1 Petasiger sp. E. melis I. hortensis Procyon lotor (raccoon) KM4 Petasiger exaeretus PA3 Petasiger exaeretus Drepanocephalus spathans Drepanocephalus auritus Petasiger sp. 1 Petasiger sp. 3 Petasiger sp. 4 Petasiger sp. 2) Petasiger islandicus PA1 zx1 Echinostoma rubrum Echinostoma revolutum Fasciola hepatica 96 100 91 52 98 97 96 99 82 57 53 43 64 0.01 nadI (nicotinamide adenine dinucleotide dehydrogenase I alegység) 28S rDNS

13 Összefoglalás Sikerült kárókatonából kimutatni a Paryphostomum radiatum- ot, ami a pontyfélék oldalvonalszervében telepedik meg. A Petasiger phalacrocoracis-t adult példányait kárókatonából, illetve metacercaria-it több halfajból azonosítottuk (koncér, vörösszárnyú keszeg, karikakeszeg). További két, feltehetőleg Petasiger fajt mutattunk ki, ebből egy esetében az adult és metacercaria fejlődési állapotot is azonosítottuk (Petasiger exaeretus), a második esetében csak a metacercaria került elő, aminek faji identifikácója egyelőre megoldatlan. A metacercaria-k valamennyi pontyfélét megfertőzhetik, kizárólag a pikkelyek középvonal érzőszerveiben telepednek meg, ahol intenzív fertőzést okozhatnak.

14 Köszönöm a figyelmet! A kutatást támogatta: PD OTKA 108813 és KTIA-AIK-12-1-2013-0017