A Zyflamend hatása az emberi prosztatarák sejtekre Jun Yan, Ph.D. Urológiai Intézet Irving Rákkutató Központ Columbia Egyetem

Prosztatarák CA Cancer J Clin 2008 Becsült új rákos megbetegedések száma férfiak nők Prosztata Tüdő- és hörgő Vastag- és végbél Húgyhólyag Non-Hodgkin limfóma Bőrmelanóma Vese- és vesemedence Szájüreg- és garat Leukémia Hasnyálmirigy Összesen Mell Tüdő- és hörgő Vastag- és végbél Méhnyak Non-Hodgkin limfóma Pajzsmirigy Bőrmelanóma Petefészek Vese- és vesemedence Leukémia Összesen Becsült halálesetek száma A prosztatarák egy jelentős egészségügyi probléma. Az Egyesült Államokban évente körülbelül 240000 férfinál diagnosztizálják ezt a rosszindulatú daganatos betegséget (ez nincs összhangban a táblázattal!!!). Noha az egyértelmű, hogy a férfiakban van egy örökletes hajlam a prosztatarák kialakulására, egyéb tényezők - mint például a rassztípus, az életkor és az étrend – befolyásolhatják a betegség kifejlődését. férfiak nők Tüdő- és hörgő Prosztata Vastag- és végbél Hasnyálmirigy Máj- és epe Leukémia Nyelőcső Húgyhólyag Non-Hodgkin limfóma Vese- és vesemedence Összesen Tüdő- és hörgő Mell Vastag- és végbél Hasnyálmirigy Petefészek Non-Hodgkin limfóma Leukémia Méhnyak Máj- és epe Agy- és egyéb idegrendszeri daganat Összesen CA Cancer J Clin 2008

Az életkor a prosztatarák egyik fontos kockázati tényezője fehér színes bőrűek amerikai indián/őslakos alaszkai ázsiai vagy csendes-óceáni 100000 emberre eső előfordulási arány spanyolajkú A prosztatarák kifejlődésével kapcsolatba hozható tényezők közül az életkor messze a legfontosabb. (1.3. ábra). Ez a betegség ritka az 50 évesnél fiatalabb férfiak körében; a betegség előfordulási gyakorisága jelentősen nő a 60 év feletti férfiakban, az összes prosztatarák több mint 70 %-át a 65 évnél idősebb férfiaknál diagnosztizálják. SEER: Surveillance Epidemiology and End Results. http://seer.cancer.gov/csr Prosztatarák megbetegedések aránya az USA-ban Forrás: SEER Életkor a diagnóziskor (évek)

A prosztatarák betegek PSA szűrése Az Amerikai Urológiai Szövetség (AUA) és az Amerikai Rákellenes Társaság a PSA teszt és a digitális végbélvizsgálat évenkénti elvégzését javasolja a normális kockázatú, 50 év feletti férfiaknál. A magasabb kockázatú férfiaknál már fiatalabb kortól is javasolják a szűrővizsgálatot. PCPT-n történő részvétel feltétele: legalább 55 éves férfi, jó egészségi állapot, a vizsgálat kezdetekor nem diagnosztizált prosztatarák Prosztata Specifikus Antigén (PSA) 3 ng/ml Beleegyezés a prosztata szövetminta-vételbe a vizsgálat végén.

Androgén Receptor Jel Mechanizmus Nat Rev Cancer 2001

A prosztatarák kemoprevenció egy nagy klinikai vizsgálata PCPT: The Prostate Cancer Prevention Trial A vizsgálat célja annak megállapítása, hogy a finasteride hatóanyag (a gyógyszer neve: Proscar) megakadályozhatja-e a prosztatarák kialakulását a legalább 55 éves férfiak körében. Eredmények: 2003. júniusában a vizsgálatot idő előtt leállították, mivel egyértelműen igazolható volt, hogy a finasteride csökkentette a prosztatarák előfordulási gyakoriságát. . http://www.cancer.gov/ SELECT: The Selenium and Vitamin E Cancer Prevention Trial A vizsgálatba legalább 55 éves férfiakat vontak be, az afro-amerikai férfiak esetében 50 év volt a minimális életkor. Eredmények: A SELECT vizsgálati adatok 2008-ban végrehajtott első független elemzése igazolta, hogy a szelén és az E-vitamin táplálék-kiegészítés 5 éven át tartó adagolása (akár együtt, akár külön-külön) nem akadályozta meg a prosztatarák kialakulását. http://www.cancer.gov/pcpt http://www.cancer.gov/clinicaltrials/digestpage/SELECT 6

Mit profitálunk ezekből a vizsgálatokból? A prosztatarák megelőzhető. A nagyszabású klinikai vizsgálat elindítása előtt több adatot kell szereznünk pre-klinikai és kisebb klinikai vizsgálatokból. 7

Kiegészítő és alternatív gyógyászat CAM: A kezelések azon formái, melyeket a hagyományos kezelések mellett (kiegészítő) vagy azok helyett (alternatív) alkalmazzák. Az NCI és a CAM Országos Központ klinikai vizsgálatokat végez a CAM alkalmazási lehetőségeire a rák megelőzésében és rákterápiában. http://www.cancer.gov/ Ezek a módszerek orvosi szempontból nem tekinthetők általánosan elfogadottnak. A hagyományos kezelések hosszú és alapos kutatási fázison mennek keresztül, melynek során igazolják, hogy az alkalmazott gyógymódok biztonságosak és hatásosak, de a CAM módszerek kevéssé ismertek.

Zyflamend® A Zyflamend tíz gyógynövény keveréke (rozmaring, kurkuma, gyömbér, szent bazsalikom, zöldtea, hu zhang, Chinese goldthread, barberry, oregano and Scutellaria baicalensis [skullcap]). In-vitro körülmények között mutatott gyulladás gátló hatás. Dr. Aaron Katz a CUMC klinikán jelenleg egy Fázis I klinikai vizsgálatban tanulmányozza a Zyflamend hatását prosztata intraepiteliális neoplásiával (PIN) diagnosztizált férfiakban.

A vizsgálat céljai Vizsgálni a Zyflamend prosztatarákra, különösen az androgén-függő prosztatarákra kifejtett hatásait. Értelmezni ennek mechanizmusát, mely magyarázatul szolgálhat a preklinikai vizsgálat eredményeire.

A vizsgálatainkban használt sejttípusok Prosztatarák sejttípusok Androgén Receptor PSA Androgén- függőség LNCaP + VCaP PC3 - CASP2.1 N.A. CASP1.1

24 és 48 órás Zyflamend kezelés 0 óra 24 óra 48 óra VCaP LNCaP

A Zyflamend kezelés idő- és koncentráció függő növekedésgátlása (I) 1.nap: fekete 2.nap: szürke 3.nap: fehér Életképes sejtek száma (%-ban) Zyflamend koncentráció

A Zyflamend kezelés idő- és koncentráció függő növekedésgátlása (II) 1.nap: fekete 2.nap: szürke 3.nap: fehér 1.nap: fekete 2.nap: szürke 3.nap: fehér Életképes sejtek száma (%-ban) Életképes sejtek száma (%-ban) 1.nap: fekete 2.nap: szürke 3.nap: fehér 1.nap: fekete 2.nap: szürke 3.nap: fehér Életképes sejtek száma (%-ban) Életképes sejtek száma (%-ban) Zyflamend koncentráció Zyflamend koncentráció

Sejtkolónia-képződési vizsgálat (I) 0 0.063 0.125 μ l/ml LNCaP 0.250 0.500 1.000 μ l/ml

Sejtkolónia-képződési vizsgálat (II) 0 0.063 0.125 μ l/ml PC3 0.250 0.500 1.000 μ l/ml

Lágyagar vizsgálat (I) 10X 20X LNCaP

Lágyagar vizsgálat (III) 10X 20X VCaP

Lágyagar vizsgálat (II) 10X 20X PC3

A Zyflamend a G1 gátlását és apoptózisát idézte elő (az ábrák nem erre utalnak!) Populáció % Zyflamend koncentráció LNCaP Zyflamend koncentráció

Sejt apoptózis és szaporodás gátló tényezők (effektorok) Sejtszaporodás gátlás

A Zyflamend Caspase-3 hasadást és p21/p27 expressziót idézett elő az LNCaP sejtekben

A Zyflamend daganatellenes hatásai a VCaP sejtekben

A Zyflamend csökkenti az AR fehérje koncentrációt óra Rövid kölcsönhatási idő Rövid kölcsönhatási idő Hosszú kölcsönhatási idő Hosszú kölcsönhatási idő óra 24

Összefoglalás A Zyflamend gátolja a sejtburjánzást és az androgén-függő és független prosztatarák sejtekben egyaránt apoptózist vált ki. A Zyflamend csökkenti az androgén receptor szintet a prosztatarák sejtekben.

Jövőbeni célok A Zyflamend prosztatarák sejtekkel szemben mutatott kemopreventív és kemoterápiás hatásait kiváltó mechanizmusok további kutatása. i) Hogyan aktiválja a Zyflamend az AR jel mechanizmust? ii) A Zyflamend és az androgén antagonisták közötti bármilyen szinergizmus feltárása A Zyflamend hatásainak tanulmányozása in-vivo körülmények között (a szervezetben).

Androgén Receptor jel mechanizmus Finasteride Casodex Zyflamend Nat Rev Cancer 2001

Future Directions (ugyanaz, mint a 26. dia) To further dissect the mechanisms underlying the chemopreventive and chemotherapeutic effects of Zyflamend in prostate cancer cells. i) How does Zyflamend target AR signal pathway; ii) Any synergism between Zyflamend and androgen antagonist on prostate cancer To test the effects of Zyflamend in vivo.

Köszönetnyilvánítás Columbia Egyetem Aaron E. Katz, M.D. Cory Abate-Shen, Ph.D.