OECD GUIDELINE FOR THE TESTING OF CHEMICALS Soil Microorganisms: Carbon Transformation Test OECD ÚTMUTATÓ VEGYI ANYAGOK TESZTELÉSÉRE Talaj Mikroorganizmusok: Szén Lebontás Vizsgálata

Bevezetés  Mezőgazdaságban használt vegyszerek hatása a mikroorganizmusok szén lebontó tevékenységeire  Egyszeri szennyezés hosszú távú hatásainak vizsgálata  Az EPPO ajánlásán alapul, de figyelembe vesz más útmutatókat (US EPA, SETAC, ISO)

Szén lebontás: szerves anyag átalakítása szervetlen végtermékké (CO 2 ) mikroorganizmusok által EC x (Effective Concentration): a vizsgált anyag azon koncentrációja, mely x % gátlást okoz a szén lebontásában (EC 50, EC 25, EC 10 ) Alapfogalmak

Kezdeti megfontolások  Növényvédőszer, trágya toxikus tulajdonságainak vizsgálata a mikrobiális aktivitás megfigyelésével  A mikrobáknak alapvető szerep jut a szénformák lebontásában és az anyagkörforgalmakban  A szennyezőanyag csökkenteni fogja az aktív biomassza mennyiségét  Az aktivitás csökkenését kísérjük figyelemmel EC x értékek számíthatók  A szennyezők mennyisége előre látható, számítható (ismert mennyiséget „szórunk ki”)

A módszer leírása Eszközök:  Tároló: kémiailag inert, vízvesztés megakadályozása, légcsere lehetővé tétele, méret  Oxigén fogyás vagy CO 2 növekedés mérésére alkalmas eszköz Talaj tulajdonságai:  50-75% homoktartalom  pH:  Szerves C tartalom: %  Mikrobiális biomassza tömeg ismert mennyiségű: C tartalma min1%-a a TOC- nak (az ilyen talajban a szennyezőanyag adszorpciója minimális, hozzáférhetősége maximális)

Talaj begyűjtése és tárolása: □ Talajminta származási helyének pontos leírása, kritériumai □ A talaj felső rétegéből kell mintát venni: 0-20cm → aerob körülmények! □ Szállítás megfelelő viszonyok között: ne változzanak a talaj kezdeti tulajdonságai □ Tárolás: sötét,hideg, levegőztetés Talaj kezelés és előkészítés: □ Rostálás, növényi részek eltávolítása □ Talajnedvesség beállítása 40-60%-ra A vizsgálandó anyag előkészítése: □ Hordozóanyag: vizes oldat vagy inert szilárd anyag (finom kvarchomok) □ Szerves oldószerek nem alkalmasak □ Illékony anyagok homogén elosztása Tesztelt mennyiségek: □ 2 koncentrációban adjuk az anyagot a talajhoz: a kisebb az előre látható környezeti konc., a nagyobb ennek többszöröse □ Pl.: PEC és 5×PEC □ Ismeretlen szennyezőknél min. 5 koncentráció

A teszt kivitelezése Körülmények: □ 3 párhuzamos mérés minden mintára, és a kontrollra (vak minta) □ Elsötétítés □ 20 ± 2 ºC □ Nedvességtartalom állandón tartása: 40-60% □ 28 napig tart a mérés Mintavétel és analízis: □ 0,7,14 és 28 nap elteltével glükóz-indukált respirációs ráta mérés minden mintában □ Ha a 28. napon az eltérés a vakhoz képest nagyobb, mint 25%, akkor a mérést folytatni kell, amíg ez a különbség beáll, de max. 100 napig

Glükóz-indukált respirációs ráta mérés: □ A talajmintákba glükóz oldatot/szilárd glükózt keverünk □ A mikrobák légzése felugrik a maximális értékre □ A maximális légzéshez szükséges glükóz mennyisége: mg/kg száraz talaj (de ki is mérhető) □ Folyamatosan mérjük az O 2 fogyást vagy a CO 2 felszabadulást, a glükóz adagolás után 12 óráig □ A respirációs ráta kiszámítható

Adatfeldolgozás és jelentés Adatfeldolgozás: □ O 2 fogyás vagy a CO 2 felszabadulás mérése □ Táblázatos formában megadni minden mintára □ A glükóz-indukált respirációs ráta kifejezése mg CO 2 /kg száraz talaj/h vagy mg O2/kg száraz talaj/h mértékegységben □ A szennyezőanyag mennyiségének függvényében ábrázoljuk a respirációs rátákat □ A minták összehasonlítása a vakmintával (amihez nem adtunk szennyező anyagot) □ Megfelelő statisztikai módszer az eredmény kiértékelésére (F-próba, 95% konfidencia szint) □ EC x értékek kiszámítása

Eredmény: Ha a maximális koncentrációban adagolt mintában 28 nap elteltével egyik mintavételkor sem nagyobb a különbség a vakmintához képest, mint 25%, akkor az anyagról elmondható, hogy nincs hosszú távú hatása a talaj szén lebontására. A jelentésnek tartalmaznia kell: □ A használt talaj teljes körű leírása □ A vizsgált anyag leírása □ A vizsgálat körülményei □ Eredmények és kiértékelés

OECD Guideline for the testing of chemicals No Soil Microorganisms: Carbon Transformation Test Forrás: