Arginin ammonifikáció Készítette: Vas Nóra. Arginin ammonifikáció Ammonifikáció mérésére szolgáló labor kisérlet Ammonifikáció fontossága:  Ökoszisztémák.

Az előadások a következő témára: "Arginin ammonifikáció Készítette: Vas Nóra. Arginin ammonifikáció Ammonifikáció mérésére szolgáló labor kisérlet Ammonifikáció fontossága:  Ökoszisztémák."— Előadás másolata:

1 Arginin ammonifikáció Készítette: Vas Nóra

2 Arginin ammonifikáció Ammonifikáció mérésére szolgáló labor kisérlet Ammonifikáció fontossága:  Ökoszisztémák nitrogén ellátását ez a folyamat biztosítja a nitrogén fixálás mellett

3 Mérés elve Ammónia meghatározáson alapszik a módszer, miután a minta 3 órán át volt 30°C- on inkubátorban argininnel.

4 Felhasznált eszközök Centrifuga Centrifugáláshoz alkalmas lombik (12 ml) 30 °C-ra állítható inkubátor

5 Felhasznált oldatok Agrinin oldat  100 mg L-agrinin-t feloldani 30 ml desztillált vízben, 50 ml-re feltölteni Kálium-klorid  149 g kálium-kloridot feloldani desztillált vízben, és 1000 ml-re feltölteni Fenolát oldat  2 g fenolátot feloldani desztillált vízben és 100 ml-re feltölteni Nitroprusszid-nátrium oldat  50 mg nitroprusszid-nátriumot feloldani 900 ml desztillált vízben, majd feltölteni 1000 ml-re NaOH/NaOCl oldat  5 g NaOH-t és 25 ml NaOCl feloldunk desztillált vízben, majd 1000 ml-re kiegészítjük Ammónia standard oldat I.  3,82 g NH 4 Cl-t feloldani desztillált vízben, majd 1000 ml-re kiegészíteni Ammónia standard oldat II.  Az I. jelű standardból 10 ml-t kell hígítani 1000 ml-re desztillált vízzel

6 Mérés menete A mérés előtti 24 órán hagyjuk a talajmintát szobahőmérsékleten Körübelül 2 g mintát mérjünk be 6 db centrifugacsőbe, lazán zárjuk le őket és helyezzük az inkubátorba 15 percre 30°C-on. 3 lombikba mérjünk be 0,5 ml-t csepegtetve az arginin oldatból és helyezzük ismét az inkubátorba 3 órára 30°C-on.

7 Mérés menete A másik 3 lombikhoz adjunk 0,5 ml desztillált vizet, azonnal tároljuk -20°C-on. 8 ml KCl oldatot adjunk a mintákhoz, zárjuk le a lombikokat és 30 percig rázassuk. Centrifugáljuk a mintákat 5-10 percig. Centrifugálás után a felülúszó folyadékból 0,5 ml-t kimérünk és hozzáadunk:  1,5 ml KCl-t,  1 ml-t a fenolát oldatból  0,5 ml-t nitroprusszid-nátrium oldatból és  0,5 ml-t a NaOH/NaOCl oldatból.

8 Mérés menete Ismét az inkubátorba helyezzük a mintákat 30 percre 30 °C-on. A minták optikai denzitását mérjük 630 nm-en KCl vak mintával szemben.

9 Kalibrálási sor Pipettázzunk 0; 0,5; 1; 2,5; és 4 ml-t a II. számú standard oldatból 10 ml-es mérőlombikba, majd egészítsük ki 10 ml-re KCl oldattal.

10 Számítás Korrekció után az értékek a következő összefüggés alapján számíthatóak: NH 4 -N (µg g -1 dwt h -1 ) = (NH 4 -N (µg ml -1 ) x 4.25) / (t x dwt)  t = inkubációs idő órában  dwt = 1 g nedves talaj száraz tömege

11 Felhasznált irodalom Alef K. and Nannipieri P. (Editors): Methods in Applied Soil Microbiology and Biochemistry, Academic Press Limited, London, 1995