ELVÁLASZTÁSTECHNIKA 1

relatív affinitásának SZORPCIÓS JELENSÉGEK 1. Adszorpció 2. Megoszlás 3. Ioncsere: Alapja : felületen másodlagos kötőerők érvényesülése mozgófázis és az állófázison rögzített folyadék közötti megoszlás mozgófázisban az ellenion (kation, vagy anion) másik ionnal lecserélhető poláros felület a poláros anyagot, apoláros felület az apoláros anyagot köti jobban fázisokban való relatív oldhatóság függvénye mozgófázisban lévő ionok relatív affinitásának függvénye 1

SZORPCIÓS JELENSÉGEK Alapja : 4. Kizárás 5. Komplexképződés… kisebb méretű molekula behatol a gél pórusaiba, mozgása lelassul, nagyobb méretű molekula akadálytalanul áthalad a gélen  host - guest (gazda-vendég) kölcsönhatás (antitest - antigén) (receptor - hormon) (enzim - szubsztrát) a különböző molekulák relatív méretének függvénye  „molekuláris felismerés” 1

GÁZKROMATOGRÁF (műszer) GÁZKROMATOGRÁF felépítése: 3. oszlop 1. gázpalack (vivőgáz) 2. mintaadagoló (minta) 4. detektor 5. jelfeldol- gozó egység „splitter” Részei: oszlop 1. Gázpalack  fecskendő (μl) (folyadékminta) 2. Mintaadagoló  szelep (gázminta) 3. Oszlop  mérete: hossz: 2 - 4 m-től ~ 100 m-ig, átmérő: 2 - 5mm-től ~ 0,1 - 0,5 mm-ig  formája: „töltött” szilárd adszorbenssel, ill. bevonva nem-illékony foly-.kal (d: 3 - 6 mm, hossz: 1 - 5 m) nagyobb kapacitás, kisebb felbontás „nyitott” hosszú, vékony üvegkapilláris, a falán adszorbeált folyadékkal (d: 0,1 - 0,5 mm, hossz: 15 - 100 m) kisebb kapacitás, nagyobb felbontás külső fal állófázis (0,1-5μm) I. oszlopkromatográfia: 1. klasszikus, 2. GC, 3. HPLC, 4. ionkr. II. rétegkromatográfia : 1. papírkr. 2. vékonyrétegkr. 1

a) Hővezetőképességi detektor (TCD) DETEKTOROK TÍPUSAI 4. Detektorok  gyors és a komponens koncentrációjával lineáris válaszjelet adjon Követelmény:  valamennyi komponens kimutatására alkalmas legyen  a detektor a mozgófázisnak (pl. vivőgáznak) (is) függvénye a) Hővezetőképességi detektor (TCD) b) Lángionizációs detektor (FID) Whea- stone-híd vivőgáz + minta vivőgáz fűtött fémblokk H2 O2 fémszál minta I c) Tömegspektrometriás detektor (GC - MS) komponensek tömegszám szerinti szeparációja konc. I. oszlopkromatográfia: 1. klasszikus, 2. GC, 3. HPLC, 4. ionkr. II. rétegkromatográfia : 1. papírkr. 2. vékonyrétegkr.

NAGYHATÉKONYSÁGÚ FOLYADÉKKROMATOGRÁFIA MŰSZER oszlop: (kolonna)  felépítése: minta  töltet: szilikagél (módosított), adszorbens, ioncserélő, gél,… szűrő előkolonna: 30 μm gömbök  hőfok: szobahőmérséklet (!) 25 °C mozgófázis: folyadék  oldószerek, oldószer-keverékek főkolonna: 3 μm gömbök HPLC-készülék felépítése: 4. oszlop detektor 1. eluens (mozgófázis) 2. pumpa 3. mintaadagoló (minta) 5. detektor 6. rekorder  nagy nyomás biztosításához pumpa:  „pulzálás-mentes” (több pumpa) mintabevitel:  fecskendő  szelepes megoldás detektor:  UV spektrofotometriás, fluoreszcencia, vezetőképességi, tömegspektrometriás,.. UV-detektor I. oszlopkromatográfia: 1. klasszikus, 2. GC, 3. HPLC, 4. ionkr. II. rétegkromatográfia : 1. papírkr. 2. vékonyrétegkr. 1