Az előadás letöltése folymat van. Kérjük, várjon

Az előadás letöltése folymat van. Kérjük, várjon

Tumorőssejt markerek azonosítása valós idejű polimeráz láncreakcióval dermatofibroszarkoma tumorokból Készítette: Czigléczki Gábor.

Hasonló előadás


Az előadások a következő témára: "Tumorőssejt markerek azonosítása valós idejű polimeráz láncreakcióval dermatofibroszarkoma tumorokból Készítette: Czigléczki Gábor."— Előadás másolata:

1 Tumorőssejt markerek azonosítása valós idejű polimeráz láncreakcióval dermatofibroszarkoma tumorokból Készítette: Czigléczki Gábor

2 „Minél előbbrehalad a tudás, annál jobban megkettőzi erőfeszítéseit a butaság, hogy fenntartsa az előítéletek hatalmát.” Nicolas-Sebastian Roch de Chamfort

3 Tartalomjegyzék 1.Őssejtek, tumorőssejtek 2.Dermatofibroszarkóma 3.PCR 4.RT-PCR 5.Saját kísérletek: –RNS- izolálás –Reverz transzkripció –Valós idejű kvantitatív PCR

4 Az őssejt Az őssejt olyan sejt, amely képes osztódni, és amelyből további sejtek keletkeznek, ami biztosítja a szervezet növekedését és megújulását. Csoportjai: embrionális őssejtek germinális őssejtek szomatikus őssejtek

5 Normális Őssejtek Multipotens progenitorok Elkötelezett progenitorok Érett sejtek Őssejt mutáció  Proliferáció Újabb mutáció(k) az őssejtben vagy a progenitor sejtekben  Proliferáció  Sejt halál  Önmegújulás  Immunválasz elkerülése

6 Az őssejtek és daganatok hasonlóságai a korlátlan proliferáció szövetspecifikus differenciációs képesség klónképzés Keletkezhetnek e daganatok őssejtekből?

7 Betegség kiújulása Tumor visszahúzódás Konvencionális Betegség enyhülése kemoterápia Célzott LSC terápia Célzott LSC + konvencionális terápia Tumor sejtszám csökkenés Célzott terápiák

8 A dermatofibrosarcoma

9

10 A polimeráz láncreakció Angol név: Polymerase Chain Reaction Felfedezője: Kary B. Mullis-1985 Lehetővé teszi a DNS egy kis darabjának megsokszorosítását

11 A reakció összetevői DNS templát Taq-polimeráz—Thermus aquaticus baktériumból Nukleotidok Puffer Primerek

12

13 Hőmérsékleti profil

14

15 Az agargél-elektroforézis

16 Felhasználása Fertőző betegségek kimutatása Igazságügyi orvostani vizsgálatok Ősi DNS elemzése Örökletes betegségek kimutatása

17

18 A SOX-2 gén vizsgálata A SOX-2 transzkripciós faktor, valamint tumormarker is Kérdés: A SOX-2 jellemző-e a tumor fibroszfer és adherens állapotára egyaránt, és ha igen, akkor mekkora a génkifejeződés mértéke?

19 RNS-izolálás tumoros sejtekből 1.Homogenizálás 2.Kloroform hozzáadása  3 fázisra különül el 3.Felső fázis (RNS) elkülönítése 4.RNS kicsapása izopropanollal 5.Felesleges izopropanol eltávolítása abszolút alkohollal

20 6.Koncentrációmérés

21 Reverz transzkripció 1.Master mix összeállítása: Fiziológiás oldat Nukleotidok Random primer Rn-áz gátló Reverz transzkriptáz

22 2.Megfelelő hőmérséklet biztosítása termosztáttal

23

24 A PCR-gép

25

26

27

28 Köszönetnyilványítás Ezúton is szeretnék köszönetet mondani Dr. Hegyesi Hargitának, aki minden segítséget megadott, hogy ez a beszámoló létrejöhessen, és Dr. Falus Andrásnak, aki engedélyezte a kutatásba való bekapcsolódást

29 Felhasznált irodalom Kary B. Mullis: A polimeráz láncreakció felfedezése Dr. Hegyesi Hargita: Bevezetés a humángenetikába Kopper László, Hajdú Melinda: Tumor- őssejtek Dr. Tóth Sára: Tumor őssejtek

30 Köszönöm a figyelmet!


Letölteni ppt "Tumorőssejt markerek azonosítása valós idejű polimeráz láncreakcióval dermatofibroszarkoma tumorokból Készítette: Czigléczki Gábor."

Hasonló előadás


Google Hirdetések