Az előadás letöltése folymat van. Kérjük, várjon

Az előadás letöltése folymat van. Kérjük, várjon

Az immunválasz manipulálása: az immunválasz befolyásolásán alapuló terápia  Nem antigén specifikus Immunstimuláció Immunszuppresszió  Immunmoduláció.

Hasonló előadás


Az előadások a következő témára: "Az immunválasz manipulálása: az immunválasz befolyásolásán alapuló terápia  Nem antigén specifikus Immunstimuláció Immunszuppresszió  Immunmoduláció."— Előadás másolata:

1 Az immunválasz manipulálása: az immunválasz befolyásolásán alapuló terápia  Nem antigén specifikus Immunstimuláció Immunszuppresszió  Immunmoduláció  Antigén specifikus Immunstimuláció Immunszuppresszió 2. Óra

2 Terápiás célpont: az immunválasz elemei: citokinek, adhéziós molelulák, sejtmembrán molekulák, receptorok, ellenanyagok Ellenanyagok mint gyógyszerek: specifitás  antigenicitás humanizált ellenanyagok, „targeting”

3 Immunterápiás eljárások / az immunrendszer működésének módosítása -kórokozók elleni válasz elősegítése -tumorsejtek elleni válasz elősegítése Immunstimuláció Immunszuppresszió-autoimmun folyamatok gátlása -allergiás folyamatok gátlása -transzplantációs tolerancia létrehozása -az újszülöttkori hemolítikus betegség kialakulásának megakadályozása Immunmoduláció -a TH1 / TH2 egyensúly eltolása autoimmun vagy allergiás kórképekben -az ellenanyagválasz izotípus megoszlásának megváltoztatása allergiás kórképekben

4 A FERTŐZÉSEKKEL SZEMBENI VÉDELEM a fertőzést követően   hagyományos gyógyszeres (antibiotikumok, vírus anyagcsere gátlók)  passzív immunizálás (ellenanyagok, sejtek)  aktív vakcinálás a fertőzést megelőzően  vakcinálás  1) a specifikus felismerő készlet arányának növelése 2) specifikus immunológiai memória létrehozása

5 Fertőző betegségek, járványok Edward Jenner, 1796, himl ő „A landmark was discovery of the germ theory, which included small parasites, bacteria and viruses. This theory was mainly based on the studies of Robert Koch ( ), Louis Pasteur ( ) and many others.” IMMUN STIMULÁCIÓ -vakcináció

6 Karikatúra az E. Jenner által bevezetett himlő oltás következményeiről

7 .... ezen egészségtámogató eszközökkel összhangzó egészségápolási szabályok teljesen elegend ő k a himl ő ragályozástól való megóvásra, és azért is a mesterséges himl ő vel való beoltás nemcsak fölöslegesnek t ű nik fel, hanem az egyúttal a természet törvényeivel ellenkez ő kihágásnak tekintend ő. Az emberi vagy állati vérb ő l nyert genny beoltásával külö n böz ő betegségek csírái terjesztetnek széjjel, melyek lényegesen hozzájárulnak az emberi nem degenerátiójához’’ ” Van-e az oltásnak a természet törvényei szerint létjogosultsága? Isten ments ! ” Bilz F. E.: A természetes gyógymód, 1905

8

9 Antigénspecifikus immunstimuláció: Aktív immunizálás:  Aktív immunizálás: elölt kórokozó legyengített kórokozó keresztreaktív, nem patogén élő kórokozó, vagy ennek része nem toxikus, módosított forma (mikrobiális toxin) Eredmény: ellenanyag termelés + effektor T sejtek memória válasz Adjuvánsok: cél: immunstimuláció elősegítése ag koncentrálása hosszú ideig fenntartása APC stimulálása a szervezet specifikus védekező képességének fokozása

10  Passzív immunizálás:  Passzív immunizálás: hiperimmunizált állatból vagy emberből IgG –kész antigénspecifikus ellenanyag előnye: gyors, de átmeneti hátránya: nincs memória válasz, az ellenanyag eliminációja, neutralizáció, allergia, fajspecifikus immunválaszt válthat ki alkalmazás: tetanusz, kígyóharapás humán IgG: ellenanyag defficiencia  Adaptív immunitás: immunkompetens sejtekkel történő terápia -gyermekkori immundeficienciák: Kongenitális sejtes immundefficiencia forrás: csontvelő (MHC kompatibilis), vagy fötális máj, timusz immunkompetens sejtjei -enzimhiányos betegségek: adenozin deamináz, nukleozid foszforiláz szomatikus génterápia: csontvelői őssejtbe bejuttatott virális vektor, mely a kívánt hiány-gént tartalmazza.

11 Vakcináció – antigén specifikus immunstimuláció Oltóanyag: Kórokozó, vagy általa termelt fehérje pl. toxin ellen Élő, legyengített vírus hatékonysága  elölt vírusé (effektor mechanizmusok, CD8+T sejt szám  ) – de: veszélyek!  Új technikák: Rekombináns DNS technológia Immunizálás dendritikus sejtek segítségével –új típusú vakcinák- a jövő  Kórokozó legyengítése: sejttenyészetben szaporított vírus, ahol eredetileg nem nő (majom)  mutációk  vírus szaporodása  emberi sejtekben nem szaporodik  - oltóanyag  In vitro mutagenezis:  In vitro mutagenezis: virus gén megváltoztatása visszafordíthatatlanul pl. influenza- évente más - antigén shift tervezett mutagenezis

12 Vírusok legyengítése nem emberi sejtekben való tenyésztéssel Antigen drift: antigén-összetételében végbemenő állandó, folyamatos és általában kismértékű változásokat antigén-drift-nek nevezzük Antigen shift: két vírustörzs keveredik egy gazdasejtben úgy, hogy a gének, melyek új vírusrészecskékbe és megfelelő fehérjéikbe vannak csomagolva, részben az egyik, részben a másik törzsből származnak

13 Patogén vírus Virulencia gén izolálása Virulencia gén mutációja vagy eltávolítása

14  Nem patogén mutánsok kifejlesztése: Vírusok: polio, mumps, rubella, kanyaró, stb. - a virulenciához szükséges gén eltávolítása vagy mutációja Baktérium: Salmonella typhy : nem fertőző mutánsok szelekciója (UDP galactóz epimeráz enzim mutációja - LPS szintézishez szükséges, mutánsban az LPS csökken) Targeting: enzim  Tyr, Phe szintézishez, nincs  ezért cssak lassú szaporodás a bélrendszerben - vakcina Csirke salmonella - oltás  Konjugátum vakcina: B és helper T sejteknek ugyanazon molekuláris komplexben levő epitópokat kell felismerniükB és helper T sejteknek ugyanazon molekuláris komplexben levő epitópokat kell felismerniük Haemophilus influenzae B: Tsejt-független B sejt válasz poliszaharid a baktérium kapszulára tetanusz toxoid + poliszaharid konjugátum - T sejtektől függő, hatékony válasz 2 év alatt is Tetanusz toxoid specifikus T sejtek citokineket termelnek – B sejt válasz:a bakteriális poliszaharid ellen

15  Konjugátum vakcina: B és helper T sejteknek ugyanazon molekuláris komplexben levő epitópokat kell felismerniükB és helper T sejteknek ugyanazon molekuláris komplexben levő epitópokat kell felismerniük Haemophilus influenzae type B vaccine

16  Reverz immunogenetika T sejt epitópok meghatározására Pl: Maláriára jellemző, a HLAB53 véd a fatális cerebrális malária ellen. HLAB53–hoz kötődő peptidek azonosítása: a 2. helyen Pro tartalmú saját nonapeptid – azonosítás patogénnel fertőzött sejtből.-> Plasmodium falciparum fehérjében Erős cytotoxikus T sejt választ vált ki. T sejtek proliferációja Peptid -> terápia

17  Legyengített élő mikroorganizmus, mint vektor más gének beépítése: kombinált vaccina: pl. Salmonella: tetanusz toxoid ag, + Listeria monocytogenezis Leishmania Yersinia pestis Schistosoma mansoni gének vírus: nem patogén,– többféle gén beépítése (növényi vírusok) „kórokozó” mint hordozó: antigén beépítve, több ag egyszerre nem ismételhető heterológ vakcinák  Szintetikus peptidek T sejt epitóp azonositása,  peptid szintézis Hátrány: sokfélesség ISCOM: immune stimulatory complex liposzómába zárt peptid – sejtbe bejut

18 Immunstimuláló komplex peptiddel Fúzió Peptid transzport az ER -be Peptid bemutatása az MHCI-en keresztül a T sejtek számára

19 Sikeres vakcinációs kampányok SSPE stands for subacute sclerosing panencephalitis, a brain disease that is a late consequence of measles infection in a few patients.

20

21

22

23

24

25 Diseases for which effective vaccines are still needed Diseases for which effective vaccines are still needed. *The number of people infected is estimated at ~200 million, of which 20 million have severe disease. †Current measles vaccines are effective but heat- sensitive, which makes their use difficult in tropical countries. Estimated mortality data for 1999 from World Health Report 2000 (World Health Organization).

26 polio, influenza, mumpsz, sárgaláz herpes, varicella, EBV HIV, hepatitis B, hepatitis C A vírus fertőzések típusai:

27 Az immunválasz kialakulása a vírus fertőzést követően

28 Az ellenanyagválasz kinetikája

29 A vírus-specifikus ellenanyagok célpontjai:

30 Az ellenanyagválasz nem megfelelő specificitású, izotípusú illetve lokalizációjú Az ellenanyagválasz nem ad kielégítő védelmet A patogén adaptációs mechanizmusai gátolják a hatékony immunválasz kialakulását PROBLÉMÁK PROBLÉMÁK:

31 Ellenanyag termelés +citotoxikus T sejtek megjelenése –védelem a vírus ellen DNS targeting: · · megfelelő ligandum, · internalizáció és endoszóma-irányítás · fúzió lizoszómákkal · lizoszomális enzimek degradálják Szintetikus virus

32 Intranasalis, intrarectális, intravaginális immunizálás CTL indukálása Peyer plakkokban, lamina propriában történik Adjuvánsok : pl. kolera toxin B: cAMP indukció, IL-12 termelés különösen alkalmas nyálkahártya immunizálásra DNS alapú vakcináció: Bejuttatás: In vivo elektroporácó, génpisztoly – intramuszkulárisan Teljes Protein gén, vagy peptid epitóp MHCI, MHCII prezentáció Virális vektor (vaccinia, poxvirus) erősíti rec DNA vakcina hatását ligandum Nukleáris transzlokációs szignál DNS plazmid ? Terápiás gén Szövetspecifikus regulálható promoter Endoszomális lizis, vagy bypass

33 a vakcina típusavírusbaktériumparazita élő, legyengített kórokozó polio, kanyaró, mumpsz, rubeola, bárányhimlő, sárgaláz, rotavírusok, dengue láz, hepatitis A, tuberkulózis, tífusz, kolera, shigellózis, lepra elölt kórokozó polio, influenza, veszettség, hepatitis A/B szamárköhögés, tífusz, kolera, lepra, H. pylori, malária toxinok diftéria, tetanusz, kolera, lépfene, shigellózis, E. coli alegység vakcinákhepatis B, herpes simplex 2, influenza, papilloma, HIV, veszettség HiB, szamárköhögés, tífusz meningococcusok, pneumococcusok, H. pylori, malária, schistosomiasis, leishmaniasis vektor vakcinák HIV, kanyaró, veszettségtuberkulózis, tífusz, kolera, shigellózis malária nukleinsav vakcinák HIV, influenza, herpes simplex 2, veszettség, hepatitis B, hepatitis C, hepatitis D, papilloma, HTLV1, CMV tuberkulózis, tífuszmalária, schistosomiasis, leishmaniasis VAKCINÁK / kísérleti szakaszban

34 Vakcina TERVEZÉS az epitóp kiválasztása az adjuváns kiválasztása irányítás, a bejuttatás helyének és módjának kiválasztása

35

36 A megfelelő epitópok kiválasztása

37 N C konformációs determináns hozzáférhető lineáris determináns nem hozzáférhető lineáris determináns N C denaturáció limitált proteolízis C N C N új determináns

38 Stratégia új generációs vakcinák fejlesztésére Stratégia új generációs vakcinák fejlesztésére Vírusok – nem fejeznek ki megfelelő T sejt epitópot (szelekció az evolúció során) Tumor – a hatékony T sejtek delécióját segíti elő Immunogenitásának fokozása: „epitóp enhancement”  peptid- MHC kötődés affinitásának növelése, MHCII –T H sejtek (pl. HIV), horgonyzó aminosavak javítása, kombinatórikus peptid könyvtár  peptid-MHC komplex TCR-hez kötődés affinitásának növelése: kis és nagy affinitású T sejtek aktiválása, vagy repertoár torzulás pl.: tumor epitópot felimerő T sejtek számának növelése  TCR keresztreaktivitás növelése: peptid kiméra – különböző vírus törzsek felismerése

39 A 9 aminosavból álló peptidek megkötésére alkalmas peptid-kötő árokban csak a horgonyzó aminosavak illeszkednek a megfelelő peptid-kötő zsebekbe A HLA-A2 és -B27 molekulák peptidkötése L V R HLA-A2HLA-B27

40 A vakcina hatékonyságának fokozása a szekvencia módosításával új peptidek tervezése

41 az antigén immunogenitásának fokozása /a hordozó és az adjuváns partikularizáció (Al-hidroxid/foszfát, liposzómák, viroszómák) polimerizáció ( mannóz polimerek, MAP) emulzió (olaj / víz) mikrokapszuláció ( különböző sebességgel bomló polimerek) bakteriális eredetű termékek más kémiai adjuvánsok ( polinukleotidok, CpG ) citokinek ( IL-2, IL-4, IL-6, IL-10, IL-12, GM-CSF, TNF- , IFN-  ) antigén irányítás ( CR-ok, FcR-ok, MR, TLR-ok) - targeting TERVEZÉS

42 vakcina típus élő, legyengítettelölt / alegységDNS / RNS az immunválasz típusa ellenanyag közvetítettB- sejtek+++ sejtesCD4+ T-sejtek+/- TH1+/-TH1*+++ TH1* CD8+ T-sejtek antigén bemutatásMHC I / IIMHC IIMHC I / II memóriahumorális+++ sejtes++++/-++ előállításaa kifejlesztés és termelés technikai kivitelezhetősége ár+++++ szállítás és tárolás++++ biztonságosság A különböző vakcina típusok összehasonlítása

43 naiv memória ÉLETKOR naiv memória életkor TOXICITÁS az adjuváns kedvezőtlen hatása (TH1/TH2) beépülés a genomba / onkogének aktiválása autoimmunitás előidézése (molekuláris mimikri) szennyeződések okozta (vírus, prion)

44 A hatékony vakcina: - biztonságos –alkalmazható gyermekeknek, felnőtteknek, mindenkinek - Hatékony a fertőzés ellen, vagy a betegség ellen (kevésbé jó) - megfelelő, tartós védettséget biztosít- memória (védettség élethosszig) - neutralizáló ellenanyagot indukál - T sejtes választ indukál - stabil, olcsó, kevés mellékhatás - könnyen alkalmazható (orális vakcina, egy alkalom az ideális-pl. Sabin csepp) -elfogadható és alkalmazható mindenhol (fejlődő világ). Adjuváns alkalmazása: Adjuváns alkalmazása: nem specifikus szignál- makrofágok stimulálása citokin indukció,antigén-depó: lassú felszívódás alumínium hidroxid alap, vagy olaj emulzió. Kevert oltásnál egyik adjuválhatja a másikat (pl. Bordatella Pertussis+ tetanus+diftéria) citokinek együttes alkalmazása: IL-12 - TH1 választ segiti Az immunizálás módja: Lényeges az antigén szervezetbe jutásának helye Orális vakcinák – mucosa szerepe (MALT)

45 Dendritikus sejtek mint vakcina hordozók


Letölteni ppt "Az immunválasz manipulálása: az immunválasz befolyásolásán alapuló terápia  Nem antigén specifikus Immunstimuláció Immunszuppresszió  Immunmoduláció."

Hasonló előadás


Google Hirdetések