Elektroporáció.

Slides:



Advertisements
Hasonló előadás
Daganatkeltő hatások A karcinogének egy adott populációban szignifikánsan emelik a daganatok gyakoriságát 2 fő típus: Mutagén (genotoxikus) daganatkeltő.
Advertisements

Mi az a mikroorganizmus?
Génexpresszió más (nem-E.coli) prokariótában
Matematika II. 1. előadás Geodézia szakmérnöki szak 2012/2013. tanév/
VER Villamos Berendezések
Biokémia: az élő anyagok kémiája
DNS replikáció DNS RNS Fehérje
Mozgó Objektumok Detektálása és Követése Robotkamera Segítségével
Bakteriális genom térképezés Készítette: Mlinarics Edina IV. Biológus Bioinformatika SZIT.
KOMETABOLIZMUS. A fogalom tisztázása Régóta ismert tény, hogy a mikroorganizmusok képesek átalakítani szerves vegyületeket, de a termék felhalmozódik.
Strukturális genomika Gyakorlati feladatok. SNP-k és vizsgálatuk Mi az SNP?
Molekuláris farming kutatása, fejlesztése és alkalmazása növényeknél
C mIg H mIg L TCR  TCR  T-SEJT  C V Antigén receptor TCR A B- ÉS T-SEJTEK ANTIGÉN FELISMERŐ RECEPTORAI HASONLÓ SZERKEZETŰEK TCR =  +  A.
B LIMFOCITÁK IMMUNOLÓGIA INFORMATIKUS HALLGATÓKNAK Dr HOLUB MARCSILLA
Információhordozó makromolekulák
Leszámoló rendezés Készítette: Várkonyi Tibor Zoltán VATNABI.ELTE
Az orvosi biotechnológiai mesterképzés megfeleltetése az Európai Unió új társadalmi kihívásainak a Pécsi Tudományegyetemen és a Debreceni Egyetemen Azonosító.
Az élő sejtek belső rendezettségi állapotukat folyamatosan fentartják. Ezt bonyolult mechanizmusok biztosítják, amelyek révén a sejt energiát von el a.
Génexpresszió (génkifejeződés)
MUTÁCIÓ ÉS KIMUTATÁSI MÓDSZEREI
A kromoszómák működése, jellemzői:
Szteroid hormonok.
Bevezetés a genetikába
Eukarióták Fő genetikai jellemzők Például az élesztő
Transzdukció Bakteriofágok közvetítte genetikai információ csere
A λ bakteriofág +++. Kb db fág van a bioszférában Bakteriofágok vegetatív replikációs ciklusa.
Ahhoz, hogy dolgozni tudjunk égy adott génnel, vagy szekvenciával nagy mennyiségű DNS-re van szükségünk, ezért valamilyen módon „klónozni” kell, a gén.
Transzdukció Készítette: Őri Zsuzsanna Emese 2007.március 30.
Plazmidok Készítette: Vásárhelyi Miklós. : E. Coli jól használható genetikai kísérletekben: Genomja kicsi(4,2*10 6 bázispár, kb. ezrede az emberének)
Készítette: Leidecker Orsolya
Készítette: Kiss László
Készítette: Sólyom Katalin Április 22.
Plazmid tartalmú mikrobák tenyésztése és kinetikája BIOREAKT 2009_MSc Genetikailag manipulált mikroorganizmusok (GMO)idegen-fehérje termelésének egyik.
Készítette: Vancsó Ildikó
Ionizáló sugárzások egészségügyi hatásai
PROGRAMOZOTT SEJTHALÁL
A baktériumok törzse.
C mIg H mIg L TCR  TCR  T-SEJT  C V Antigén receptor TCR A B- ÉS T-SEJTEK ANTIGÉN FELISMERŐ RECEPTORAI HASONLÓ SZERKEZETŰEK TCR =  +  A.
Nyitott biologiai rendszerek
AZ EMBERI IMMUNRENDSZER FELÉPÍTÉSE, MŰKÖDÉSE
ELŐNYÖK ÉS LIMITÁCIÓK MOLEKULÁRIS MIKROBIOLÓGIAI VIZSGÁLATI MÓDSZEREK ALKALMAZHATÓSÁGA A BIOREMEDIÁCIÓBAN Balázs Margit.
AZ ÁLLATI ÉS A NÖVÉNYI SEJT ÖSSZEHASONLÍTÁSA
Matematika II. 1. előadás Geodézia szakmérnöki szak 2010/2011. tanév Kataszteri ágazat tavaszi félév.
1, GÉNKÖNYVTÁRAK ALKALMAZÁSA
A P elemek mobilitásának szabályozása
Az eukarióta sejtciklus szabályozása
A P elem technikák: génmanipuláció tetszés szerint
Az evolúció fényében Szathmáry Eörs Collegium Budapest ELTE.
Evolúcióbiológia és asztrobiológia
Az élővilág legkisebb egységei
Egyed alatti szerveződési szintek
PLAZMA SEJT ANTIGÉN CITOKINEK B-SEJT A B – SEJT DIFFERENCIÁCIÓT A T-SEJTEK SEGÍTIK IZOTÍPUS VÁLTÁS ÉS AFFINITÁS ÉRÉS CSAK T-SEJT SEGÍTSÉGGEL MEGY VÉGBE.
HARC A VÍRUSOK ELLEN, A VÉDŐOLTÁSOK FEJLESZTÉSE LABORATÓRIUMI KÖRÜLMÉNYEK KÖZÖTT Szekeres Zsófi.
1. 2 MICROTESTER ÚJ TECHNIKA A MIKROBIOLÓGIÁBAN Dr. Reichart Olivér Dr. Szakmár Katalin Budapest, február 15. A redox-potenciál mérésen alapuló.
Sejtek genetikai módosítása (gének bevitele vagy eltávolítása)
Escherichia coli baktérium
Molekuláris klónozás a gyakorlatban. CRISPR/Cas rendszerek Adaptív bakteriális immunitás Idegen nukleinsavak ellen ( pl. vírusok) Ezek integrálása a genomba,
Baktériumok.
Géntechnikák labor kiselőadás Készítette: Nagy Zsuzsanna
BAKTÉRIUMOK.
lecke A gének megváltozása. A génösszetétel megváltozása
Komenczi Bertalan Információelmélet
Molekuláris biológiai módszerek
Gyakran felvetődő kérdés
TRANSZPLANTÁCIÓS IMMUNOLÓGIA I.
TRANSZPLANTÁCIÓS IMMUNOLÓGIA II.
Új molekuláris biológiai módszerek
Biotechnológia.
Híg oldatok tulajdonságai
Híg oldatok tulajdonságai
Előadás másolata:

Elektroporáció

Transzformáció A transzformáció az a folyamat, amikor a sejtek „tiszta” DNS–t vesznek fel és építenek be. A DNS transzportálódik a citoplazmába, ahol rekombináció történik. genetikai információátvitel (az első, amit felfedeztek) fontos a donor DNS megtartása a recipiensben géntérképezés transzformációval Típusai: Természetes transzformáció — a mikróbáknak csak egy kis csoportjára jellemző — általában lineáris DNS 2. Mesterségesen indukált transzformáció — a legtöbb (de nem az összes) mikroorganizmus képes így DNS felvételre — általában plazmid DNS DNS felvételére képes sejt: kompetens.

Mesterséges kompetencia A transzformáció a molekuláris biológia egyik legfontosabb, alapvető technikája. Lehetőséget ad arra, hogy idegen DNS–t vigyünk be egy baktériumba. Gyakran csak úgy transzformálható a sejt, ha mesterségesen kompetenssé tesszük. /* Alapelv: az E. coli felvesz és replikál gyűrűs DNS–t. */ A mesterséges transzformáció két típusa: Kémiai kompetencia Elektroporáció/elektrotranszformáció

A transzformáció hatékonysága Transzformációs gyakoriság Sejtszámra: transzformánsok száma/μg DNS plazmidok száma/μg DNS a sejtek hány %–a kapott plazmidot DNS-re: a DNS molekulák hány %–a transzformált sejtet Módszer sejtszámra DNS–re kémiai kompetencia 1% 12% elektrotranszformáció 10% 90%

Elektroporáció = elektrotranszformáció nagyfeszültséget adunk a baktérium szuszpenzióra a hirtelen megnőtt térerősség átmeneti lyukakat eredményez a sejtfalban így a kisméretű plazmidok, vektor konstrukciók átjuthatnak a sejten kívüli nagy plazmidkoncentráció gyors beáramlást eredményez nagy a sejtpusztulás, de mivel sok baktériumsejtet lehet alkalmazni, a túlélők elegendőek a legtöbb kísérlethez E. coli esetén ez a leghatékonyabb módszer (nagyobb transzformációs gyakoriság, nagyobb méretű DNS)

Elektroporáció Elektroporációs küvetta

Köszönöm a figyelmet:)!