Lelkibajok „öngyógyításának” laboratóriumi diagnosztikája TUDATMÓDOSÍTÓ SZEREK ÉS AZ ORVOSI LABORATÓRIUM FELADATAI tudományos-szakmai konferencia Dr. Mátyus Mária PhD, Kocsis György, Wolf Veronika, Halász Zsolt, 2014. április 24. Budapest

DROGSZŰRÉSEK RENDSZERE A MAGYAR HONVÉDSÉG ÁLLOMÁNYÁNÁL 1996-2000 név nélkül, randomszerűen végrehajtott, alkalmanként pszichológiai kérdőívekkel kiegészített szűrővizsgálat 2000-2003 „no-name” szűrések és drogfogyasztás gyanúja esetében végzett vizsgálatok 2003-ban az alkalmasság-vizsgálatot kiegészítettük drogszűréssel továbbá randomszerűen, és gyanújel esetében is végeztünk méréseket 2004 novemberével a hivatásos hadsereg megalakulásával megszüntettük a név nélküli mintavételeket 2005-2011 a randomszerű szűrések száma jelentősen csökkent, elsősorban alkalmasság- vizsgálatok (7/2006 HM rendelet) és gyanújel esetében vett minták mérése történt (26/2008 HM utasítás)

A MAGYAR HONVÉDSÉG ÁLLOMÁNYA KÖRÉBEN VÉGZETT DROGSZŰRÉSEK EREDMÉNYÉNEK ALAKULÁSA 2001-2006 KÖZÖTT 2006 – 2011 között a mintaszám mintegy 8000 / év volt, a pozitivitási arány mindig kisebb volt mint 1%.

MAGYARORSZÁG NÉPESSÉGE KÖRÉBEN VÉGZETT KÁBÍTÓSZER VIZSGÁLATOK EREDMÉNYEI

Pozitív monotoxikomán esetek száma 1996-2012 között

MÉRÉSI MÓDSZEREK Immunkromatográfiás gyorsteszt, egy vagy több vegyületcsoportra érzékeny mono- vagy multiteszt, csak kvalitatív, vagyis minőségi meghatározásra képes, egyszerű a használata, olcsó (1000 Ft / 6 paraméter) Immunkémiai mérőrendszerek, megerősítő szemikvantitatív, vegyületcsoport specifikus, klinikai laboratóriumi műszeres mérések, akkreditált, a nagyműszeres analitikánál jóval olcsóbb (600-1000 Ft / egy vegyületcsoport) Nagyműszeres analitika GC-MS mérőrendszerrel, vegyület specifikus minőségi és mennyiségi meghatározásra képes, speciális laboratóriumi módszer, akkreditált (3000-20000 Ft / vegyület, vegyületcsoportonként változó)

KÁBÍTÓSZEREK ÉS PSZICHOAKTÍV ANYAGOK MEGHATÁROZÁSA BIOLÓGIAI MINTÁKBÓL Minta Időablak Vizsgáló módszer Előnyök Hátrányok Vizelet Fél órától 24-48 óráig, drogfajtától, mennyiségtől függően hetekig Immunassay GC/MS, LC-MS Magas hatóanyag-tartalom jól kidolgozott módszerek minőség biztosítási kontrollok. A metabolizmusra, vérszintre nehézkes következtetni. a minta könnyen hamisítható. Vér 1-24 óra A befolyásoltság pontosan mérhető, metabolizmus meghatározható. Limitált mintamennyiség, fertőzésveszély. Nyál 1-12 óra Összefüggés van a vérszintjével. Könnyen hamisítható, nehézkes mintavétel. Izzadtság 1-2 hétig Csak minőségi meghatározás. Az értékek széles határok között mozognak. Nehézkes mintavétel, befolyásoltságról nem ad felvilágosítást. Haj Hónapokon keresztül nehézkes előkészítés Nehéz hamisítani, többször vehető, illetve vizsgálható. Az eredményt az emberi faj (bőrszín) befolyásolja. Az eredményből csak a kábítószer fogyasztás ténye állapítható meg.

HAJVIZSGÁLATOK - ÁTTEKINTÉS A XIX. század óta ismert, hogy a hajba a szervetlen alkotórészek, mint pl. a fémionok beépülnek. A hajat igazságügyi vizsgálati anyagként 1857-ben von Casper a ”Praktisches Handbuch der gerichtlichen Medicin” művében említi meg. Az írásában Hoppe- Seyler-t idézi aki egy, 1856-ban, exhumált hulla hajából arzént mutatott ki. Mintegy 100 évvel később, Goldblum és munkatársainak (1954) sikerült barbiturátokat meghatározni patkányok szőrében oly módon, hogy a takarmányba kevert gyógyszert a kísérleti állatokkal feletették. Ma már számos országban a hajvizsgálatok eredményeit az igazságügyi szakvéleményekben nem csak elfogadják, hanem meg is követelik és a vér vizsgálatok mellett rutinszerűen alkalmazzák a közúti balesetek körülményeinek felderítésében (pl. Németország).

HAJVIZSGÁLAT- MINATVÉTEL A mintát a fej hátsó részéről közvetlenül a fejbőrről vágják le. (A hajszálak ne csússzanak el egymáson!) A vett hajminta átmérője ceruza vastagságú, hossza 1-6 cm . A mintát a két végén rögzítik és fejbőr felé eső részét megjelölik. A mintavételi adatlapon a donorra vonatkozó adatokon kívül rögzítik a haj állapotát, súlyát, hosszát, a mintavétel helyén a fejbőrön maradt haj hosszát, és a festék típusát (ha festik). A mintát alufóliába kell csomagolni és egy zárható, fényt át nem eresztő, kóddal ellátott tokba helyezve szállítani. Tárolni fénytől védett helységben, páncélszekrényben kell oly módon, hogy a mintához jogosulatlan személy ne férhessen hozzá. Óvintézkedés: „chain of custody”, szennyeződés, bomlása, manipulálás!

IDŐABLAK EGYSZERI FOGYASZTÁSNÁL

HAJVIZSGÁLATOK IDŐABLAKA ISO 9001:2008; MEES 1.0/2007; ISO 14001:2004 (HÉMORI) szabványok szerint tanúsított kórház

NYÁLVIZSGÁLAT - MINTAVÉTEL

POZITIVITÁSI HATÁRÉRTÉKEK GC-MS MÉRÉSSEL Vizelet (ng/mL) Vér (ng/m3) Haj (ng/mg) Nyál (ng/mL) THC 11-Nor-Δ9-THC-COOH: 15 Δ9-THC :0.5 THC-9-COOH :1.0 11-OH-THC :0.5 Kannabinol :0.5 Kannabidiol :0.5 Δ9-THC :5.0 THC-9-COOH :5.0 11-OH-THC :5.0 Opiát 6-Monoacetil-Morfin:10 Morfin :300 Kodein:300 6-Monoacetil-Morfin:5 Morfin :2 Kodein :2 6-Monoacetil-Morfin:1 Morfin :1 Kodein :1 Heroin :1 Morfin :5 Kodein :5 Amfetaminok Amfetamin :300 Metamfetamin :300 MDMA :300 MDA :300 MDE :300 Amfetamin :2 Metamfetamin :2 MDMA :2 MDA :2 MDE :2 Efedrin :2 Norefedrin :2 Amfetamin :2 Metamfetamin :2 MDMA :2 MDA :2 MDE :2 Amfetamin :20 Metamfetamin :10 MDMA :5 MDA :5 MDE :5 Kokain Benzoilekgonin: 300 Metilekgonin :300 Benzoilekgonin :5 Kokain :5 Benzoilekgonin: 2 Kokain: 2.5 Benzoilekgonin: 10 Kokain :10

KLASSZIKUS ÉS ÚJ DROGOK SZÁZALÉKOS MEGOSZLÁSA A LEFOGLALÁSOK SZERINT BSZKI adatai

HATÓANYAGOK A LEFOGLALÁSOK MENNYISÉGE SZERINT 2007 2008 2009 2010 2011 2012 1 THC 2 amfetamin AM-2201 3 heroin mefedron 4-MEC pentedron 4 kokain MDMA MDPV 5 mCPP 5FUR-144 6 ketamin GBL fluoramfetamin UR-144 7 metadon JWH-018 AKB 48 8 metamfetamin 9 JWH-073 10 2C-B metilon BSZKI adatai

Klinikai esetek Dr. Lakatos Ágnes Ph.D. (POTE) adatai alapján

Az analitikus problémája: Új anyagok, anyagcsoportokkal kerül szembe A metabolizmus ismeretlen Hatása ismeretlen Referencia anyagok hiánya Kereskedelmi immundiagnosztikai tesztek még nem állnak rendelkezésre

DESIGNER-DROGOK KIMUTATÁSA VIZELETBŐL GC-MS MÓDSZERREL A módszer alkalmas egy mérésből, szimultán módon 43 vegyület: drogok, designer drogok, barbiturátok és benzodiazepinek vizeletből történő minőségi kimutatására. A vizsgálat eredményei alapján a kábítószerek fogyasztásának ténye kizárható, illetve igazolható. A vizeletminta kábítószer tartalmát folyadék-folyadék extrakciót (LLE) és származékképzést követően gázkromatográfiás-tömegspektrometriás (GC-MS) technikával határozzuk meg, SCAN üzemmódban. A mintavétel és tárolás megegyezik az eddig alkalmazott eljárásokkal. Új eljárást kellett kidolgozni,

ÉRTÉKELÉS A vizsgált komponensek minőségi azonosítása a keresett vegyületek standardjai segítségével létrehozott spektrum-könyvtár (AMDIS) alapján történik. Az AMDIS a tömegspektrumok összehasonlítása alapján végzi az azonosítást, 80% fölötti egyezés, valamint a retenciós idők egyezése esetén azonosítható a vegyület. Az előszűrésen pozitív mintából a pontos mennyiségi meghatározást GC-MS-el, új minta-előkészítéssel, az analitikai standardból készített kalibrációs görbe segítségével végezzük el. A spektrum könyvtárat saját méréseinkkel fejlesztjük, AMDIS:

VIZSGÁLAT GC/MS MÉRŐRENDSZERREL Gázkoromatográf Tömegspektrométer anyagmennyiség mennyiség idő m/z

A vizsgált minták minőségi és mennyiségi meghatározása

MINŐSÉGI MEGHATÁROZÁS 100% T Q1 Q2 Q3 T = Target (cél) ion : Mennyiségi meghatározás Q1-3 = Qualifier ionok : Minőségi meghatározás

MENNYISÉGI MEGHATÁROZÁS I. Csúcsterület / magasság Standard Minta Koncentráció (ng/mL)

MENNYISÉGI MEGHATÁROZÁS II. Csúcsterület / magasság Standard Minta Koncentráció (ng/mL)

MENNYISÉGI MEGHATÁROZÁS III. Csúcsterületek aránya Standard Deuterizált Standard Minta Koncentráció (ng/mL)

MENNYISÉGI MEGHATÁROZÁS IV. Csúcsterületek aránya Standard Deuterizált Standard Minta Koncentráció (ng/mL)

AMFETAMINOK - FENETILAMINOK 2C-E MDA 3,4-DMMA MDAI 3-FA MDEA 4-FA MDMA 4-FMA metamfetamin 4-MA PMA amfetamin PMMA fentermin TMA MBDB R-ek: funkciós csoportok

AMFETAMINOK - KATINONOK

ARILCIKLOHEXILAMINOK: ketamin metoxetamin FENILPIPERAZINOK: MCPP TRIPTAMINOK: AMT

ÓPIÁTOK 6-MAM Dezomorfin Dihidrokodein Metadon Morfin

BARBITURÁTOK: BENZODIAZEPINEK: butálbitál fenobarbitál secobarbitál pentobarbitál BENZODIAZEPINEK: diazepám flunitrazepám

METKATINON POZITÍV MINTA

A MÓDSZER ALKALMAZÁSI TERÜLETE A módszer alkalmas a fent felsorolt drogok, designer drogok, barbiturátok és benzodiazepinek vizeletből, egy lépésben történő minőségi kimutatására. A vizsgálat eredményei alapján a kábítószerek fogyasztásának ténye kizárható, illetve a további mennyiségi meghatározással igazolható.

KÖLTSÉGEK Immunkromatográfiás gyorsteszt: 1000Ft /6 drog, nem akkreditálható, designer drogokat nem vizsgál. Immunkémiai mérőrendszerek, akkreditált,megerősítő szemikvantitatív, vegyületcsoport specifikus, 600-1000 Ft / egy-egy vegyületcsoport, de designer drogokat nem vizsgál, Szimultán GC-MS meghatározás: 1500 Ft/43 vegyület, akkreditálható, designer drogokat, gyógyszereket vizsgál, saját fejlesztéssel bővíthető a mérhető vegyületek száma, jelenleg nincs GC-MS eljárásunk szintetikus kannabinoidok mérésére

AZ LC/MS/MS MÓDSZER ELŐNYEI Nincs szükség kivonásra (költség-, idő-); A származékolás elhagyható (költség-, idő-); Létezik, illetve könnyen bővíthető spektrumkönyvtár (akár 1000 kábítószer-, gyógyszer-, designer drog- hatóanyag és metabolit); Előszűrésre és megerősítő vizsgálatra egyaránt alkalmas; Ez a jelen technológiája klinikai toxikológiai vizsgálatokra;

ÖSSZEFOGLALVA A drogszűrések jelenlegi rendszerét módosítani szükséges, mivel az a drogpiacon jelenleg megtalálható kábítószerek 50%-át vizsgálja. A laboratóriumi képességeket folyamatosan fejleszteni kell, mivel a terjesztők az új-tipusú drogokat szüntelenül módosítva látják el a kábítószerpiacot. (módszerek, eszközök (LC-MS-MS), személyek) Együttműködés a prevencióval, klinikummal. Együttműködés más drogvizsgáló laboratóriumokkal: ISZKI, Erzsébet Kh. Toxikológia, BSZKI, POTE, SOTE. Egyedül nem megy!

KÖSZÖNÖM MEGTISZTELŐ FIGYELMÜKET! ISO 9001:2008; MEES 1.0/2007; ISO 14001:2004 (HÉMORI) szabványok szerint tanúsított kórház