Collembola szaporodásának vizsgálata vegyi anyaggal szennyezett talajokon

Bevezetés A vizsgálat célja, annak meghatározása, hogy szennyezett talaj hogyan befolyásolja a collembola (ugróvillások) szaporodási képességét Az ugróvillások ökológiailag fontos fajok a talaj szennyezettségének meghatározásánál. A szennyezett talajok ökotoxikológai tesztelésére igen alkalmasak, mert nagyon érzékenyek a talajlevegő szerves szennyezőanyagaira. A collembola szinte minden talajtípusban előfordul, gyakran 10 5 db is található m 2 -enként. Kedveli a humuszban gazdag talajokat.

A vizsgálat elve Szerves anyaggal szennyezett (OECD előírás) mesterséges talajon vizsgáljuk a collembola szaporodását. Az értékelést: 2 hét, majd 3 hét elteltével végezzük. A talaj szennyezettségét a felnőtt állatok halálozási és szaporodási %-ával határozzuk meg.

A vizsgálat kritériumai A kontroll felnőtt ugróvillások halálozási %-a a vizsgálat végén nem haladhatja meg a 20%-ot. A vizsgálat végén a fiatal állatok száma vizsgálati edényenként nem haladhatja mega 100-at. A variációs együttható számításánál a fiatal állatok számának 30%-nál kevesebbnek kel lennie. A referencia anyagot időközönként meg kell vizsgálni. A referencia anyagban a bórsav nem lehet több 100 mg/kg száraz talajra vonatkoztatva, mert akár 50%-al is csökkentheti az állatok szaporodási képességét.

 A vizsgálat leírása Vizsgálati edények, eszközök: –A vizsgálati edények 30 g nedves talaj befogadására legyen képes –A vizsgálati edény anyaga lehet üveg, vagy nem toxikus műanyag, –A vizsgálati edény mélysége 2-3 cm, –A vizsgálati edény fedele legyen átlátszó, és biztosítsa a talaj párolgását, légcseréjét, csökkentse a víz párolgását,

 A vizsgálat leírása Szükséges berendezések –Szárítószekrény, –Sztereó mikroszkóp –pH mért és luxmérő –Megfelelő pontosságú mérleg –Hőmérséklet szabályozózó –Páratartalom szabályozózó berendezés –Inkubátor szoba hőmérsékletét szabályozó berendezés –Csipesz, vagy kis szívó légáram készülék

 A vizsgálat leírása A vizsgált talaj: Módosított OECD mesterséges talaj, szerves anyag tartalma 5% –5% tőzegmoha tőzeg, levegőn szárított finomra őrölt –20% kaolin (kaolin tartalom min 30%) –74% ipari homok –  1% CaCO 3 analitikai tisztaságú

 A vizsgálat leírása Előkészítés: –Az összetevők összekeverése, (laboratóriumi mixer) –A talajt nevesítése ionmentes vízzel – optimum 40–60% –pH meghatározása, beállítása –Talaj szennyezése – vizsgálandó szerves oldószerrel, peszticiddel

 Vizsgálati eljárás Körülmények: –A vizsgálati középhőmérséklet 20 ± 1 °C hőmérséklet tartományban 20 ± 2 °C, –A világos sötét ciklus (12 óra világosság, 12 óra sötét) –Megvilágítás erőssége 400 és 800 lux az edény falán, –Egyenletes talajnevesség biztosítása fogyás  2%, –Páratartalom  80% –pH-t elején végén mérni kell

 Vizsgálati eljárás Mérések –Minden vizsgálati edénybe 30 g friss vizsgálati talaj kerüljön –Az oldószer vagy diszpergálószer koncentrációja minden vizsgálati edényben ugyan az legyen –Az ugróvillásokat kis szívó berendezéssel áthelyezzük a vizsgált talajra (10 hím 10 nőstény) –Kb. 2–3 mg granulált sütőélesztőt – élelmiszer forrás- adjunk az állatkáknak –Az vizsgálati edényeket behelyezzük az inkubátorba –A 21. napon az állatokat megszámoljuk (nemenként, a nőstények nagyobbak) –9 – 12 napos ivadékokat is megszámoljuk –28. napon távolítsuk el a talajból az állatokat –Számoljuk meg az elpusztult állatokat –A vizsgálat végén statisztikai módszerrel határozzuk meg eredményt

 Eredmények értékelése A reprodukciós teljesítmény a fő végpont (pl. utódok száma) A statisztikai elemzés, pl. ANOVA eljárás Összehasonlító elemzés Student t- próba, Dunnett's vagy Williams "teszt A túlélő felnőttek számának dokumentálása LCX, ECx-érték meghatározása, statisztikai módszerekkel (pl. logisztikai vagy Weibull funkció, vágott Spearman- Karber módszer, vagy egyszerű interpoláció). EC50 vagy bármely más ECx meghatározása Ökotoxicitás meghatározása A vizsgálat végén a túlélő collembolák

Készítette: Vlaj Lajosné hallgató –Gazdaság és Társadalomtudományi Kar/mérnöktanár –I. éves levelező Tanári mesterszak (MA) –Gruiz Katalin: Környezettoxikológiai című tárgyához évközi feladatként Budapest, Forrás: Collembolan Reproduction Test in Soil vns&tbm=isch&tbo=u&source=univ&ei=QBmeTa3hAtH3sgbTxIGlBA &ved=0CGQQsAQ&biw=1259&bih=606http:// vns&tbm=isch&tbo=u&source=univ&ei=QBmeTa3hAtH3sgbTxIGlBA &ved=0CGQQsAQ&biw=1259&bih=606