Drogok fejlesztésének lépései: preklinikai, és I, II, III, IV fázisok GLP/ GCP

A gyógyszerkutatás főbb fázisai

GMP- GLP- GCP Gyógyszeripari hatósági előírások, követelményrendszerek GMP (Good Maunfacturing Practice) GLP (Good Laboratory Practice) GCP (Good Clinical Practice) Felügyeleti hatóságok (FDA, OGYI, EMEA) ICH (adatok kölcsönös elfogadása, eljárások gyorsíása)

Farmakokinetikai és metabolizmus vizsgálatok- ADMET ADMET- rendszer preklinikai és klinikai (humán) Abszorpció (felszívódás) Disztribució (megoszlás) Metabolizmus (biotranszformáció) Elimináció (kiürülés- inaktív gyógyszermolekula) Toxikológiai (biztonsági) vizsgálatok in vitro→in vivo vizsgálatok

In vitro vizsgálatok Viszonylag olcsó, gyors Primer metaboliznus mechanizmusa CYP 450 izoenzimek vizsgálata (500 féle, enzimszabályozás, hiánya, szerepe a biotranszformációban) Humán és állati sejtvonalak alkalmazása (hepatocyták, mielóma sejtek, őssejtek, primer sejtek) Metabolizmus gyors megismerése, toxikológiai vizsgálatok tervezése (prediktív)

Alkalmazott módszerek Immun-analitikai módszerek (fehérjék, DNS, RNS) ag-ae kimutatásán alapuló módszerek (precipitáció, agglutináció) jelzéses technikák (ELISA, fluoreszcens jelölés) PCR, qPCR, real-time PCR (génexpresszió→sejt állapotának kifejeződése) Microchipek (DNS, fehérje, RNS kimutatása) Szelektívek (pl.:monoklonális antitestek), nagy mintaszám, kis mennyiségű minták Validált módszerek (GLP)

In vivo vizsgálatok ADMET-rendszer In vitro vizsgálatok során kapott adatok alapján tervezik meg a vizsgálatokat Egér, patkány, nyúl, kutya, törpesertés, majom stb. Plazma, vizelet, szövet (reziduum), nyál, anyatej Egész szervek hogyan viselkednek, vér-agy gáton való átjutás, karcinogentiás vizsgálata

Alkalmazott módszerek Immun-analitikai módszerek (fehérjék, DNS, RNS)→ pl.: ELISA PCR, qPCR, real-time PCR (szekvenálás (génexpresszió, mutációk kimutatása) Mikrochipek Főleg kapcsolt elválasztási technikák alkalmazása az iparban (LC-MS, GC-MS) Validált módszerek (GLP)

GCP Humán fázisvizsgálatok GLP előírásainak megfelelően végzett és dokumentált preklinikai vizsgálatok kellenek 4 fázis, szigorú egymásra épülés Vizsgálóhelyeken GCP előírásainak betartása Általában 60-65 vizsgálat, 5000-7000 ember bevonása

I. II. III. IV. Átlagos időigény Alanyok Cél 1év 2 év 3-4 év Gyógyszer egész piaci élete folyamán Alanyok 20-200 egészséges önkéntes 100- 300 önkéntesen vállalkozó beteg 5000- 7000 Beleegyező betegek Cél -Biztonságosság - Maximálisan tolerálható humán dózis meghatározása -Hatásosság Mellékhatások (rövid távú értéklés) (középtávú értéklés) (hosszú távú értékelés)

Gyakran I.- II. fázis összevonása (farmakokinetikai és metabolizmus vizsgálatok) Citosztatikumok esetén I. fázis II. fázis jelleggel is bír (etikai okok, expozíció) Originális gyógyszermolekula→ I.- IV. Generikus gyógyszermolekula→ bioekvivalencia vizsgálat (kémiai, farmakológiai, biológiai egyenértékűség)

Farmakogenetika Bizonyos gyógyszerek azonos dózisban történő alkalmazásakor eltérő terápiás választ kapunk Farmakokinetikai variábilitás→ nagyságrendekben eltérő dózis a vérbe Farmakodinámiás variabilitás→más terápiás válasz (azonos vérkonc.) a betegekben Okok: polimorf metabolizmus (CYP 450) egyéni receptorérzékenység interakciók (enzimgátlás, illetve indukció)

Farmakogenomika A génszerkezet (egyedi gyógyszermetabolizáló képesség DNS-ben kódolva) és a gyógyszer terápiás válaszának kapcsolatát vizsgálja „találati valószínűség” javítása→ betegek kiválasztása Genotípus- jelenleg 60 féle (DME, DME-receptor, transzporter gén) Fenotípus (endogén, exogén tényezők) Genotípus- fenotípus meghatározása által megjósolható a gyógyszermetabolizmus Draft gudlines!

Alkalmazott módszerek Genomiális DNS izolálása limfocitákból Adott DNS részlet amplifikációja (PCR) Emésztés restrikciós enzimekkel Megtalálja vagy nem az adott vágási pontot→ különböző méretű fragmentek keletkeznek→ RFLP (rest. fragmentum hosszúság polimorfizmus) vizsgálat során genotípusok elkülöníthetők. További technikák: mikrochipek, real-time PCR (jelölt oligonukleotidok) Fenotipizálás: polimorf jeleggel metabolizálódó gyógyszer(ek) adása a betegnek, standard körülmények, metabolizációs ráta meghatározása vízeletből.

A jövő Gyógyszerfejlesztés mikrochipen (interakciók) Metabolizációs útvonalak modellezése (in silico módszerek)