2009. november 26. Transzgének expressziós profiljának felvétele Transzgének expressziós profiljának felvétele Kukoricabogár- és herbicid-rezisztens növények.

Slides:



Advertisements
Hasonló előadás
Utazás a sejtben Egy átlagos emberi sejt magja megközelítőleg 510-15 gramm mennyiségű és 1,8-2 méter hosszúságú (3000 millió bázispárnyi) DNS-ből,
Advertisements

BIOTECHNOLÓGIA D MsC gyakorlat
„az emberek hazudnak, de a bizonyítékok nem”
Programcsomag fejlesztése "multiplex microbead assay" eredmények kiértékelésére •Soft Flow Hungary Kft. •7628 Pécs, Kedves u. 24 Lustyik György
KŐVIRÁG 6.
“Valós idejű” polimeráz láncreakció (RT-PCR)
BioGén tábor 2006 DNS szekvencia analízis, internetes adatbázisok a genetika szolgálatában Kósa János Semmelweis Egyetem ÁOK I.sz Belgyógyászati Klinika.
Készítette: Bacher József
A polimeráz láncreakció Gurbi Bianka március 4. Emelt Biotechnológiai Számítások.
DNS replikáció Szükséges funkciók Iniciáció
Génexpresszió más (nem-E.coli) prokariótában
DNS replikáció DNS RNS Fehérje
DNS replikáció DNS RNS Fehérje
A DNS Szekvenálás 2008 Géntechnikák labor.
A T sejtek ontogenezise III. Matkó János,
Fehérjeszintézis Szakaszai Transzkripció (átírás)
A universal method for automated gene mapping Peder Zipperlen, Knud Nairz, Ivo Rimann, Konrad Basler, Ernst Hafen, Michael Hengartner and Alex Hajnal Genome.
EKG kapuzott (ECG gated) szív vizsgálat
Real-Time PCR gyakorlati alkalmazások bevezetés Párosítsuk a gélfotóra felvitt mintákat a megfelelő olvadáspontú termékekkel!
Strukturális genomika Gyakorlati feladatok. SNP-k és vizsgálatuk Mi az SNP?
Molekuláris genetika Falus András.
A PMP22 gén mutációs analízise
Kedvenc Természettudósom:
Nukleotidok, nukleinsavak
génszabályozás eukariótákban
Génexpresszió (génkifejeződés)
Polimeráz láncreakció (PCR)
MUTÁCIÓ ÉS KIMUTATÁSI MÓDSZEREI
Buccalis kenet a connexin-26 gén 35delG mutációjának non-invazív szűrésére kisgyermekeken Torkos Attila 1,2, Magnus Teschner 2, Peter Erfurt 2, Gerrit.
MOLECULÁRIS GENETIKA/GENOMIKA 2..
Polimeráz láncreakció
Készítette: Leidecker Orsolya
DNS amplifikáció pl . DNS szekvenálásnál nagy jelentősége van
DNS chipek, DNS hibridizáció
FLUORESZCENS IN SITU HIBRIDIZÁCIÓ
Egészségügyi mérnököknek 2010
Gyors mikrobiológiai módszerek
Nukleotid típusú vegyületek
Arabidopsis thaliana tip120 inszerciós mutáns jellemzése
Arabidopsis thaliana tip120/cand1 T-DNS inszerciós mutáns jellemzése.
A gélelektroforézis Alkalmazása: különböző molekulák (nukleinsavak, fehérjék) -méret szerinti elválasztását, -detektálását -mennyiségének meghatározását.
Nukleinsavak és a fehérjék bioszintézise
Génsebészet Cseh Zsófia.
Dr. Bugyi István Kórház Szülészeti és Nőgyógyászati Osztály,
Phytophthora fajok hatása az erdei fák egészségi állapotára Nyugat-Magyarországi Egyetem Erdőmérnöki Kar Erdő- és Faanyagvédelmi Intézet.
1, GÉNKÖNYVTÁRAK ALKALMAZÁSA
IN VITRO MUTAGENEZIS Buday László.
A P elem technikák: enhanszerek és szupresszorok azonosítása
A P elem technikák: enhanszerek és gének csapdázása
Készítette: Czigléczki Gábor
Génexpressziós chipek mérési eredményeinek biklaszter analízise.
Antisense RNS.
Gének kifejeződésének vizsgálata pontyivadékokban különböző takarmányok alkalmazásának hatására Jakabné Sándor Zsuzsanna, Shivendra Kumar, Adorján Ágnes,
DNS szintézis, replikáció Információ hordozó szerep bizonyítéka Avery-Grifith kísérlet Bakterifágos kísérlet.
Primer tervezés qPCR-hez
Új molekuláris biológiai módszerek
Polimeráz Láncreakció:PCR, DNS ujjlenyomat
Replikáció Wunderlich Lívius 2015.
KÓRHÁZI ACINETOBACTER BAUMANNII TÖRZSEK JELLEMZÉSE
DNS replikáció DNS RNS Fehérje
Új molekuláris biológiai módszerek labor
Molekuláris biológiai módszerek
Új molekuláris biológiai módszerek
Molekuláris biológiai módszerek
Új molekuláris biológiai módszerek
Molekuláris biológiai módszerek
Készítette:Tóth Karolina
A génexpresszió és az ezzel kapcsolatos struktúrák
Új molekuláris biológiai módszerek
Hattagú heterociklusos vegyületek
Előadás másolata:

2009. november 26. Transzgének expressziós profiljának felvétele Transzgének expressziós profiljának felvétele Kukoricabogár- és herbicid-rezisztens növények MTA MGKI Kukoricabogár- és herbicid-rezisztens növények MTA MGKI

2009. november 26. Mintavétel Szállítás, tárolás RNS kivonás cDNS átírás Real-time PCR Kiértékelés

2009. november 26. Mintavétel és tárolás Meghatározott szervek és fenofázisok Nehézségek pollengyűjtésnél RNAlater, szárazjég — -70°C

2009. november 26. RNS kivonás Összes RNS típus kivonása (rRNS referencia) Nehézségek mag esetében Tisztaság és gyorsaság

2009. november 26. Reverz transzkripció A kivont RNS-ről random hexamer primerek és reverz transzkriptáz segítségével DNS másolatot készítünk rRNS-t és mRNS-t is átírjuk – referencia- és célgén Higítások

2009. november 26. Real-time PCR Alapelv a PCR-termék képződésével arányos a fluoreszcencia intenzitása, ezt a készülék folyamatosan méri exponenciális fázisban: arányos a kiindulási DNS mennyiséggel nincs PCR-t követő gélelektroforézis Alkalmazások  génexpresszió vizsgálata  genomban többször előforduló gének számlálása (kópiaszám meghat.)  genotipizálás

2009. november 26. Real-time PCR Detektálás a keletkező összes PCR-terméket (nem specifikus) SYBR Green: dsDNS interkaláló festék Összemérés – Qiagility robot szekvencia specifikus: 5’ nukleáz (pl. TaqMan) Q 5’3’ R R Q : riporter : quencher QR 1 3 2

2009. november 26. ciklusszám RnRn CTCT Real-time PCR Mennyiségi mérés: a „threshold” ciklus ciklusszám lg  R n CTCT MHC08_G4 küszöb („threshold”) threshold: exponenciális fázisban threshold ciklus: hányadik ciklusban lépi át az adott minta fluoreszcenciája a küszöbszintet – kiindulási DNS-mennyiséggel arányos

2009. november 26. Detektálás a reakció után: olvadáspont analízis Real-time PCR eltérő szekvenciájú DNS-szakaszok olvadáspontja különbözik lassú felmelegítésT m : két szál elválik SYBR Green jel 

2009. november 26. Kiértékelés Expressziós szintek összehasonlítása Kiértékelés Expressziós szintek összehasonlítása

2009. november 26.