A PNH KIMUTATÁSA ÁRAMLÁSI CITOMETRIÁVAL: A LEGÚJABB FESTÉSI ELJÁRÁSOK Barna Gábor, Márk Ágnes, Csomor Judit, Matolcsy András I.sz. Patológiai és Kísérleti.

Slides:



Advertisements
Hasonló előadás
Szívbetegség és várandósság
Advertisements

Keringési szervrendszer betegségei
Auto immun betegségek.
Hisztamin szerepe az elhízásban: génexpressziós vizsgálatok vad és hisztamin hiányos egereken O B E K O N Tamási Viola, Éder Katalin, Tölgyesi Gergely,
Az orvosi biotechnológiai mesterképzés megfeleltetése az Európai Unió új társadalmi kihívásainak a Pécsi Tudományegyetemen és a Debreceni Egyetemen Azonosító.
MELLÉKVESEKÉREG ELÉGTELENSÉG
Malignus Lymphomák Molnár Zsuzsa O.O.I..
Creutzfeldt-Jakob betegség (szubakut szivacsos agysorvadás)
T-SEJT DIFFERENCIÁCIÓ A THYMUSBAN
T-SEJT DIFFERENCIÁCIÓ A THYMUSBAN
A hepatitis B elterjedése világszerte
A T sejtek ontogenezise III. Matkó János,
C mIg H mIg L TCR  TCR  T-SEJT  C V Antigén receptor TCR A B- ÉS T-SEJTEK ANTIGÉN FELISMERŐ RECEPTORAI HASONLÓ SZERKEZETŰEK TCR =  +  A.
IMMUNKOMPLEXEK KIALAKULÁSA, AGGLUTINÁCIÓ, PRECIPITÁCIÓ
A cukorbetegség dr. Bierer Gábor.
Az emésztőszervek betegségei
A hasnyálmirigy.
B LIMFOCITÁK IMMUNOLÓGIA INFORMATIKUS HALLGATÓKNAK Dr HOLUB MARCSILLA
Genetikai, Sejt- és Immunbiológiai Intézet
Dr. Falus András egyetemi tanár B lymphocyták (ontogenezis, aktiváció, osztály/izotípus, humorális immunitás)
GENETIKA- GÉN-ETIKA?? Falus András
Dr. Falus András egyetemi tanár B lymphocyták (ontogenezis, aktiváció, osztály/izotípus, humorális immunitás)
Funkcionális emésztőszervi betegségek a családorvosi gyakorlatban
Funkcionális emésztőszervi betegségek a családorvosi gyakorlatban
Stabil angina pectoris június Dr. Andréka Péter Semmelweis Egyetem II. sz. Belgyógyászati Klinika.
Az amyloidosis klinikuma
Proteinuriák differenciál
Parathormon extrasceletalis hatásai Semmelweis Egyetem II. sz. Gyermekgyógyászati Klinika, Budapest egyetemi tanár Prof. Dr. Szabó András.
Vér Vér 2007/03/06.
Vérszegénység Olyan állapot, amikor a vérben található vörösvértestek száma jelentősen a normál érték alá csökken. Ez gyengeség, energiahiány, rövidült,
Stroke.
Táplálkozási szervrendszeri betegségek,tünetek,kezelések
A csontvelő átültetés indikációi gyermekkorban
Az intermedier anyagcsere alapjai 3.
Géntechnikák Labor FÁG DISPLAY
Interstitialis nephritis Boeck sarcoidosisban
A nyirokkeringés zavarai
Epeúti betegségek.
Az izomdystrophiák molekuláris genetikai vizsgálata
A herediter sensorimotoros neuropathiák (HSMN) – Charcot-Marie-Tooth betegségek (CMT) genetikai háttere Karcagi Veronika FJ Országos Közegészségügyi Központ.
Dr. Domján Gyula Dr. Gadó Klára. WEGENER GRANULOMATOSIS BELGYÓGYÁSZATI VONATKOZÁSOK Dr. Domján Gyula, Dr. Gadó Klára Szent Rókus Kórház I. Belgyógyászat.
C mIg H mIg L TCR  TCR  T-SEJT  C V Antigén receptor TCR A B- ÉS T-SEJTEK ANTIGÉN FELISMERŐ RECEPTORAI HASONLÓ SZERKEZETŰEK TCR =  +  A.
Immunrendszer sejtjeinek jellemzése és elválasztása Áramlási citometria, FACS Az immunrendszer sejtjeinek funkcionális vizsgálata (1.): poliklonális limfocita.
A HIV FERTŐZÉS IMMUNPATHOGENEZISE. A HUMÁN IMMUNDEFICIENCIA VÍRUS (HIV)
Autoimmun betegségek.
VÉRSZEGÉNYSÉG Amennyiben a vörösvértestek, vagy a hemoglobin száma egy bizonyos határ alá csökken, vérszegénységről, más néven anaemiáról beszélünk.
A szerotípus hatása az optimális kezelési stratégia felállítására myasthenia gravisban Pál Zsuzsanna, Boczán Judit, Bereznai Benjamin, Lovas Gábor, Csépány.
Modern Orvostudományi Technológiák a Semmelweis Egyetemen Terápiás modul Molekuláris medicina Balla András, Erdélyi László, Hunyady László Élettani Intézet.
A vérkeringés szerepe.
Hitek és tévhitek az influenzáról
ANYAGCSERE CSONTBETEGSÉGEK 2003 SE ÁOK I. Belklinika.
SLE és vesebetegség Sütő Gábor.
A Wnt5a és Wnt11 szignálmolekulák expressziójának vizsgálata dohányfüst indukálta légúti gyulladásmodellben Immunológiai és Biotechnológiai Intézet Farmakológiai.
A molekuláris evolúció neutrális elmélete
Diabetes gondozás a gyakorlat szempontjából
VITAMINOK.
Készítette: Szabó Elza 2012 május Mivel szerzői jogvédelem alatt nem áll, ezért bárki, bármikor felhasználhatja! Szeretettel!
Dr. Falus András egyetemi tanár Genetikai, Sejt- és Immunbiológiai Intézet Semmelweis Egyetem Általános Orvostudományi Kar B lymphocyták (ontogenezis,
Újdonságok a haematológiában Dr. Kovács Gábor Semmelweis Egyetem, II. sz. Gyermekgyógyászati Klinika Vasanyagcsere A vasanyagcsere szabályozásában.
PLAZMA SEJT ANTIGÉN CITOKINEK B-SEJT A B – SEJT DIFFERENCIÁCIÓT A T-SEJTEK SEGÍTIK IZOTÍPUS VÁLTÁS ÉS AFFINITÁS ÉRÉS CSAK T-SEJT SEGÍTSÉGGEL MEGY VÉGBE.
Glutén-érzékenység, Lisztérzékenység
Túlérzékenységi reakciók Tornóci László Semmelweis Egyetem Kórélettani Intézet.
Post-partum atípusos HUS sikeres kezelése eculizumabbal Post-partum atípusos HUS sikeres kezelése eculizumabbal Semmelweis Egyetem I. sz. Belgyógyászati.
Bödör Csaba MTA-SE Lendület Molekuláris Onkohematológia Kutatócsoport, I. sz. Patológiai és Kísérleti Rákkutató Intézet, Semmelweis Egyetem Személyre szabott.
Márk Ágnes, Barna Gábor, Csomor Judit, Kriston Csilla, Matolcsy András
Johan Béla Országos Epidemiológiai Központ
Heveny rosszullétek Szív és érrendszeri megbetegedések
2. Táplálkozástani Alapfogalmak és Koncepciók
GYULLADÁSBAN RÉSZTVEVŐ Humánmorfológiai és Fejlődésbiológiai Intézet
1. évfolyam 1. félév 35. előadás, Dávid Csaba
Előadás másolata:

A PNH KIMUTATÁSA ÁRAMLÁSI CITOMETRIÁVAL: A LEGÚJABB FESTÉSI ELJÁRÁSOK Barna Gábor, Márk Ágnes, Csomor Judit, Matolcsy András I.sz. Patológiai és Kísérleti Rákkutató Intézet Semmelweis Egyetem

A PNH észlelhető tünetei Érzékelhető tünetek Kimerültség: Fáradtság Napi feladatok ellátása nehézségekbe ütközik Gyengeség Fájdalom Gyomor fájás Lábfájás vagy dagadás Mellkasi fájdalom Hátfájás Más tünetek: Sötét vizelet Légzés elégtelenség Nyelési nehézség Sárgaság Erekció zavar A paroxismális nocturnális hemoglobinurea (PNH), egy ritka őssejt eredetű megbetegedés. Vérrögök Vesebetegség Szervkárosodás Stroke szívinfarktus Jelek, amelyeket nem mindig érzünk

A PNH klinikai tünetei Intravasculáris hemolízis (hemoglobin urea), emelkedett plazma hemoglobin szint Megmagyarázhatatlan hemolízis: vas-hiány vagy, hasi fájdalom vagy nyelőcső görcs vagy thrombózis, vagy granulocytopénia és/vagy trombocitopénia Coombs negatív, nem-schistocytás, nem fertőzés eredetű hemolítikus anémia Thrombózis szokatlan tulajdonságokkal: Szokatlan helyen: hepatikus vénákban (Budd-Chiari syndroma) más hasivénákban cerebral szinuszokban bőrvénákban Megmagyarázhatatlan cytopénia Csontvelő elégtelenség: várható vagy bizonyított aplastikus vagy hypoplasztikus anémia refrakter cytopénia egyvonalas diszpláziával ismeretlen eredetű cytopénia

A PNH molekuláris háttere A PNH egy ritka, klonális hematopoietikus őssejt (HSC) eredetű megbetegedés. A HSC-ben mutálódik az X-kromoszómán levő PIG-A gén. PIG-A: phosphatidylinositol glycan anchor biosynthesis, class A Ez a gén játszik szerepet a glycosyl-phosphatidylinositol (GPI) anchor (horgony) szintézisében. A mutációs státusz szerinti osztályozás Type I: normál sejtek Type II: missense mutáció – részleges szintézis hiba Type III: nonsense mutáció – a bioszintézis teljes hiánya

A GPI horgony szerkezete Pu JJ, Brodsky RA. Clin Transl Sci. 2011

A GPI-horgonnyal rendelkező fehérjék bioszintézise Phosphatidyl inositol Pu JJ, Brodsky RA. Clin Transl Sci N-acetylglucosamine transzfer Mannóz egységek Fehérje rész GPI szignál peptiddel

A PIG-A mutáció eredete Pu JJ, Brodsky RA. Clin Transl Sci. 2011

Richards SJ, Cytometry GPI horgonnyal rendelkező fehérjék

A komplement rendszer és a hemolízis Pu JJ, Brodsky RA. Clin Transl Sci ép erythrocyta

A nitrogén monoxid (NO) metabolizmusa Pu JJ, Brodsky RA. Clin Transl Sci A hemolízis szabad hemoglobint generál, ami NO-t köt. Az erythrocyta argináz kiszabadul a vvt-kből és csökkenti az arginin szintjét (NO képződés szubsztrátja). Csökkent az NO szint fáradság, fájdalom, thrombózis, stb.

PNH kimutatása VVT-ken CD59 Normál Type I. sejtek PNH-s sejtek Type III. és II. Eculizumab kezelés előtt után MJ Borowitz Clinical Cytometry 2010

granulocytákon monocytákon Egy paraméter vizsgálata a különböző sejtpopulációkon Normál sejtek PNH-s sejtek A granulocyták között megjelenő PNH-s klón nagysága mutatja igazán a PNH-s klón mennyiségét

FLAER hatásmechanizmusa és használhatósága FLAER: Fluorescein-labeled Aerolysin Az Aeromonas hydrophila baktérium termelte protoxin, proaerolysin, szelektíven kötődik a GPI horgonyhoz. Mivel a GPI horgonyhoz kötődik, ezért minden sejtvonalnál lehet használni. VVT-knél a glycophorin kis mértékben köti a FLAER-t, így gátolja GPI fehérjék ill. hiányuknak a kimutatását, ezért vvt-n nem ajánlott a használata.

PNH-s monocyta monocyták normál monocyta granulocyták normál granulocyta PNH-s granulocyta Összetapadt sejtek kizárása Két paraméter vizsgálata a különböző sejtpopulációkon A fals negatív sejtek kizárása!!

PNH klón kimutatása lymphocytából? A lymphocyták között megjelenő FLAER negatív populáció nem megbíz- ható a PNH-s populáció mennyiségének megítélésére.

Kisméretű PNH klón kimutatása A módszer alkalmas kisméretű PNH klón populáció kimutatására is megfelelő mennyiségű sejt/esemény mérésével. PNH-s klón 0,1 % az összes sejt között Kis méretű PNH fenotípusú klón (0,1-20 % kóros granulocyta) megjelenhet az aplasztikus anémiás esetek 60 %-ában, valamint MDS-ben is (0,01-2 % kóros granulocyta).

PNH-s vizsgálatok alakulása

Összefoglalás A technika fejlődésével egyre javul a ritka betegségek kimutathatósága. Az áramlás citometria pedig egy megfelelő módszer erre! Viszont a kapott adatokat körültekintően kell értékelni!

Köszönöm a figyelmet!