POSZTTRANSZLÁCIÓS MÓDOSÍTÁSOK HT G fehérjék: Alfa alegység (Gi és Go) N-terminális mirisztoiláció Alfa és RGS: reverzibilis palmitoilálás N-terminálison Gamma alegység C-terminális farnezilálás Monomer GTPázok ARF – mirisztoilálás Többi: farnezilálás (Ras – palmitoilálás is)

A Rac prenilációja eukarióta sejtekben Prenyl- transzferáz RAC RAC 189CAAX 189C

PRENYLTRANSZFERÁZOK Enzim Felismert szekvencia Szubsztrát FTase CAAM/S Ras GGTase-I CAAL Rac/Rho Rap GGTase-II CXC/CC Rab

A Rac kis G fehérje szabályozása GAP Rac·GTP Rac·GDP GEF RhoGDI·Rac·GDP GAP = GTPáz aktiváló protein GEF = Guanin nukleotid kicserélő faktor GDI = Guanin nukleotid disszociáció inhibitor

A RhoGDI -Cdc42 komplex szerkezete Cell 100. 345. Fig. 1a

A Rho-GDI és a prenylált Cdc42 interakciója Cell 100. 345. Fig. 3b

A membrán-lokalizált GAP hatása prenilált és nem-prenilált Rac-ra

A GAP domén és a teljes hosszúságú p50GAP hatása prenilált és nem-prenilált Rac-ra

A p50RhoGAP GST fúziós fehérjeként kifejezett fragmensei Sec14 PP GAP 1 439 49 87 121 169 198 211

Különböző p50RhoGAP fragmensek hatása Nem-prenilált Rac-ra Prenilált Rac-ra

Különböző p50RhoGAP fragmensek hatása az oxidáz aktivitásra a tisztított rendszerben Nem-prenilált Rac Prenilált Rac

A p50RhoGAP GST fúziós fehérjeként kifejezett fragmensei Sec14 PP GAP 1 439 49 87 121 169 198 211

Preniláció hatása a Rac-p50GAP interakcióra élesztő két-hibrid rendszerben

A pRac-p50GAP interakció modellje Zárt konformáció Interakció prenilált Rac-al Nyitott konformáció Moskwa et al. JBC 2005

G-fehérjék poszttranszlációs módosítása Ins-R G-fehérjék poszttranszlációs módosítása Prenil- transzferáz RAC RAC 189CAAX 189C

TOVÁBBI PÉLDÁK A PRENILÁCIÓ SZEREPÉRE Trio (GEF) RhoA Ig-like domain Cdc25 (yeast GEF) Ras2p N-terminal domain Rab-GAP Rab3A ?? INTRAMOLEKULÁRIS INTERAKCIÓ p120RasGAP Ras N-terminal PH domain

IRODALOM Hoffman et al., 2000, Cell 100. 345-356. Molnár et al., 2001, Biochemistry 40. 10542-10549 Moskwa et al. 2005, J. Biol. Chem. 280. 6716-20. Finlayson et al. 2003, Metabolism 52. 1606. Ligeti E. and Settleman J. 2006, Methods Enzymol. 406. 104-17.

Science 277. 333. Fig. 5c

Dependence of the fluoride effect on the Rac :GAP ratio

Effect of fluoride on the interaction of Bcr with prenylated or non-prenylated Rac

Effect of fluoride on the interaction of GAP with prenylated and non-prenylated Rac

Effect of fluoride on the interaction of prenylated and non-prenylated Rac with GAP p50RhoGAP Bcr

Dependence of the effect of fluoride on the presence of aluminium