KŐVIRÁG 6

egerekkel és emberekkel Szentendrei Református Gimnázium Králik Eszter 12. osztály Egy... "bella donna" esete... egerekkel és emberekkel Felkészítő tanár: Kiss Székely Zoltán

Az agykutatás peremén 2007-ben Szentendrei Református Gimnázium Králik Eszter 12. osztály Az agykutatás peremén 2007-ben Felkészítő tanár: Kiss Székely Zoltán

M T A K O K I agyar udományos kadémia ísérleti rvostudományi utató ntézet

Polimeráz láncreakció PCR Molekuláris biológia Polimeráz láncreakció PCR

molekuláris biológiai technika DNS enzimatikus amplifikálására élő szervezet igénybevétele nélkül a technika lehetővé teszi a DNS egy kis darabjának megsokszorosítását analízis vagy mennyiségi felhasználás céljából

DNS sokszorozódása a PCR reakció során Hozzávalók: templát DNS, 2 primer, dezoxi-nukleotid-trifoszfátok, DNS polimeráz enzim, reakcióközeg (víz, sók) Az energiát a trifoszfátok két foszfátcsoportjának lehasadása szolgáltatja.

Primer A primer rövid, egyes szálú, mesterségesen előállított DNS darab. A sokszorosítani kívánt DNS mindkét végére 1-1 primer kapcsolódik komplementer módon.

PCR termék kimutatása gélelektroforézissel a DNS savként képes protont leadni →önmaga negatív töltésűvé válik méret szerinti szétválogatáshoz egy kocsonyás anyagba (gélbe) helyezzük, amelynek végeire elektródákat kapcsolunk mivel negatív töltésű az elektromágneses erő hatására a pozitív sarok felé kezd vándorolni a gélben

szivacsszerű szerkezet→ a rövidebb DNS-ek szabadabban mozognak, míg a hosszabbak akadályoknak ütköznek és lelassulnak adott idő alatt a rövidebb DNS-ek nagyobb utat tesznek meg, mint a hosszabbak ismert méretű DNS-ek együttes futtatásával megbecsülhető a DNS-ek hossza festési eljárással láthatóvá tehetőek

500 bp 400 bp 300 bp 200 bp 100 bp

IVARSEJTJEIK GENOTIPUSA APA GENOTIPUSA: M/V IVARSEJTJEIK GENOTIPUSA M(mutáns) V ANYA GENOTIPUSA V/V V(vad) V/M V/V

A PCR alkalmazásai Apasági viszgálat Genetikai ujjlenyomat Örökletes betegségek kimutatása Fertőző betegségek kimutatása Ősi DNS konzerválása Történelmi minták azonosítása

Immunhisztokémia

Y Y Y Y Y Y B B C C A B A patkány agyszelet anti B anti B anti B

Y Y Y Y Y Y B B C C A B A patkány agyszelet anti B anti B anti B

Y Y Y Y Y Y Y anti B Y anti B B B Y anti B C C A B A patkány agyszelet

Y Y Y anti B Y anti B Y B B Y anti B C C A B A patkány agyszelet

Elektrofiziológia

Köszönöm hogy elmondhattam röviden e történetet.