A génexpresszió és az ezzel kapcsolatos struktúrák

Slides:



Advertisements
Hasonló előadás
Utazás a sejtben Egy átlagos emberi sejt magja megközelítőleg 510-15 gramm mennyiségű és 1,8-2 méter hosszúságú (3000 millió bázispárnyi) DNS-ből,
Advertisements

IV. rész DNS-RNS-fehérje eukariótákban
BIOTECHNOLÓGIA D MsC gyakorlat
Sejtmag és osztódás.
A mutagenezis célja, haszna Mutáció Az egyed megjelenése (fenotípusa) megváltozHAT Ebből visszakövetkeztethetünk a mutációt szenvedett gén funkciójára.
III. rész DNS-RNS-fehérje prokariótákban
A sejtmag szerkezete és működése és működéseI. Dr. habil. Kőhidai László SE, Genetikai, Sejt- és Immunbiológiai Intézet 2008.
Készítette: Bacher József
Genetikai szabályozó hálózat B. Subtilis-ban
DNS replikáció DNS RNS Fehérje
DNS replikáció DNS RNS Fehérje
DNS replikáció: tökéletes másolat osztódáskor
DNS replikáció DNS RNS Fehérje
A humán genom projekt.
A génaktivitás szabályozása
Természetismeret DNS RNS A nukleinsavak.
Fehérjeszintézis Szakaszai Transzkripció (átírás)
Az intergénikus régiók és a genom architektúrájának kapcsolata Craig E Nelson, Bradley M Hersh és Sean B Carrol (Genome Biology 2004, 5:R25) Bihari Péter.
Az élő szervezeteket felépítő anyagok
A génszabályozás prokariotákban és eukariótákban
Kedvenc Természettudósom:
Nukleotidok, nukleinsavak
A sejtmagon kívüli genom
génszabályozás eukariótákban
Génexpresszió (génkifejeződés)
SV40 infekció transzformált sejt. „korai” gének (early - E) „késői” gének (late - L) 4.7 kb SV40 genom - kicsiny „tanulóvírus” fertőzést követően először.
Öröklődés molekuláris alapjai
ALLOSZTÉRIA-KOOPERATIVITÁS
A nukleinsavak.
A nukleinsavak.
Nukleusz A sejt információs rendszere
Epigenetika és életmód
Poszttranszlációs módosítások Készítette: Cseh Márton
Egészségügyi mérnököknek 2010
Egészségügyi mérnököknek 2010
Nukleotid típusú vegyületek
Arabidopsis thaliana tip120/cand1 T-DNS inszerciós mutáns jellemzése.
NUKLEINSAVAK MBI®.
A genetika (örökléstan) tárgya
Protein szintézis Protein módosítás 3. Protein transzport.
Nukleinsavak és a fehérjék bioszintézise
Nukleotid típusú vegyületek: nukleinsavak és szabad nukleotidok
Sejtmag és osztódás.
A P elemek felfedezése, felépítése és mobilitásuk mechanizmusa
A P elem technikák: enhanszerek és szupresszorok azonosítása
Nukleinsavak énGÉN….öGÉN.
Replikáció, transzkripció, transzláció
Sejtmag II. Dr. habil. Kőhidai László
2004-es kémiai Nobel-díj. Díjazottak Aaron Ciechanover Avram HershkoIrwin Rose The Nobel Prize in Chemistry 2004 was awarded jointly to Aaron Ciechanover,
DNS szintézis, replikáció Információ hordozó szerep bizonyítéka Avery-Grifith kísérlet Bakterifágos kísérlet.
34. lecke A fehérjék felépítése a sejtben. Lényege: Lényege:  20 féle aminosavból polipeptidlánc (fehérjelánc) képződik  A polipeptidlánc aminosav sorrendjét.
24. lecke Nuklein- vegyületek. A nukleotidok Összetett szerves vegyületek építőmolekulái: építőmolekulái:  5 C atomos cukor (pentóz)  Ribóz  Dezoxi-ribóz.
Nukleinsavak. Nukleinsavak fontossága Az élő szervezet nélkülözhetetlen, minden sejtben megtalálható szénvegyületei  öröklődés  fehérjék szintézise.
Polimeráz Láncreakció:PCR, DNS ujjlenyomat
Génexpresszió szabályozása mRNS érés, kis RNS-ek szerepei
Génexpresszió szabályozása I
Replikáció Wunderlich Lívius 2015.
DNS replikáció DNS RNS Fehérje
The lactose (lac) operon - an example for prokaryotic gene regulation
A nukleinsavak szerkezete
A sejtmag szerkezete és működése I. Dr. habil. Kőhidai László
Új molekuláris biológiai módszerek
Nukleinsavak • természetes poliészterek,
Dr. Röhlich Pál prof. emeritus
Sejtorganellumok az exocytotikus útvonalon
Sejtmag, kromatin, kromoszóma. Replikáció.
Dr. Röhlich Pál prof. emeritus
Génexpresszió és az azzal kapcsolatos sejtorganellumok
Sejtmag, kromatin, kromoszóma. Replikáció.
EPIGENETIKA OLYAN JELENSÉGEKKEL FOGLALKOZIK, AMELYEK KÖVETKEZTÉBEN
Előadás másolata:

A génexpresszió és az ezzel kapcsolatos struktúrák Dr. Szabó Arnold szabo.arnold@med.semmelweis-univ.hu Semmelweis Egyetem Humánmorfológiai és Fejlődésbiológiai Intézet 2014. 09. 16.

Mi az a gén? A gének a DNS, ill. kromoszóma olyan egységei, amik egy génterméket kódolnak. A legtöbb gén fehérjéket kódol (Proteint kódoló gének), míg mások RNS-molekulák (tRNA, rRNA, snRNA, stb.) létrejöttéért felelősek (RNS-t kódoló gének).

Mi az a génexpresszió?

Hogy rendeződnek a gének a kromoszómákon? Egyetlen kromoszóma több száz vagy akár ezer gént tartalmazhat. De: a DNS 90-95%-a „üres”, tehát nem tartalmaz kódoló szekvenciát. Sok nem-kódoló DNS szekvencia jelentősége még ma sem ismert. A közbülső DNS szakaszoknak különböző funkcióik lehetnek, ilyenek: a gének szabályozásában szerepet játszó, génregulációs proteineket kötő DNS-szakaszok (promotor, enhancer, silencer), ismétlődő (repetitív) szekvenciák (pl. a kromoszómák végein a telomerák vagy a centromera régió), transposonok (rövid, „ugráló” DNS szakaszok), kis gátló funkciójú RNSeket (miRNS, siRNS) kódoló szekvenciák, stb. X-gén génregulációs helyei promotor A-gén kódoló szakasza X-gén replikációs kezdőhely telomera t-RNS gén telomera promotor Z-gén kódoló szakasza Y-gén génregulációs helyei ismétlődő szakaszok Z-gén regulációs helyei Y-gén promotor promotor centromera régió (ismétlődő szakaszok) rRNS-gének

Hogy épül fel egy átlagos eukarióta gén? Vég-pont Enhancer Exon Intron Exon Intron Exon 5’ 3’ 3’ 5’ Terminator Start-pont TATA-BOX Promoter Kódoló szakasz A promoter és az enhancer a gén szabályozó régióihoz tartoznak. A transzkripció előtt mindkét elemhez transzkripciós faktorok kötődnek. Ezek felelősek a gén aktiválásáért. Bizonyos gének silencer szekvenciákkal is rendelkeznek, melyek aktiválásával a gén transzkripciós aktivitása lecsökken. A kódoló szakasz exonokból és intronokból áll. Csak az exonok tartalmaznak aminosav szekvenciát kódoló adatokat. Az intronok ezzel szemben némák, és az általuk tárolt információ nem jelenik meg az aminosav szekvenciában.

RNS: az alapok RNS: Egyszálú Timin helyett Uracil Dezoxiribóz helyett ribóz Negatív töltés a foszfátcsoport miatt Sokféle 3’- és 5’-vég Lineáris

Transzkripció mRNS transzkripció: a fehérjét kódoló gén átíródik mRNS-re. Átalakítás után kijut a cytoplasmába és ott a fehérjeszintézishez (transzláció) szolgáltatja a mintát. tRNS és rRNS transzkripció: tRNS és rRNS átírása a megfelelő génekről. Mindkét RNS (fehérjékhez kötve) a transzláció fontos segédeszköze a cytoplasmában. További kis RNS-ek transzkripciója.

Transzkripció 3’ Ende primer transzkriptum

Egy gén mekkora részlete kerül átíródásra? Vég-pont Enhancer Exon Intron Exon Intron Exon 5’ 3’ 3’ 5’ Terminator Start-pont TATA-BOX Promoter Kódoló szakasz Transzkripciós egység Az átírt primer transzkriptum túl nagy, éretlen és nemcsak az exonok, de az intronok átiratát is tartalmazza. Az éretlen RNS–molekula kémiai módosítása még a sejtmagban megtörténik (mRNS processzálás).

mRNS processzálás 5’-sapka (cap): egy guanin nukleotid kötődik az 5’-végre. A 5’-sapka szignálfunkciót tölt be a magból a citoplazmába történő transzport és a transzláció során is. Poly-A farok: A 3’-vég adenin nukleotidok hozzáépülésével meghosszabbodik. A poly-A farok határozza meg az mRNS élettartamát. Splicing: Az összes intron eltávolításra kerül. A folyamatban ún. ribonukleoproteinek (RNS-protein komplexek) (Spliceosoma) játszanak szerepet. Minden fent említett folyamat még a sejtmagban történik.

mRNS processzálás: Splicing

Alternatív splicing Az alternatív splicing során az intronok mellett exonok is eltávolításra kerülhetnek. Az a mechanizmus lehetővé teszi, hogy ugyanazon génről több, kicsit vagy nagyon eltérő fehérjék képződjenek. Az így kialakult variánsokat splice variánsoknak híjuk.

Alternatív splicing: példa Exon 1 Intron Exon 2 Intron Exon 3 Gen Transzkripció Exon 1 Intron Exon 2 Intron Exon 3 Prä-mRNA Alternatív splicing Exon 1 Exon 2 Exon 3 Exon 1 Exon 2 mRNA Transzláció Transzláció Ligandfelismerő domén Transzmembrán domén Protein Sejtmembrán Intracelluláris domén

Az érett mRNS-molekula AUG Methionin UGA UAG UAA Kodon: Az mRNS bázistriplettje. A 64 kodon közül három a stopkodon nem kódol aminosavat. Az első kodon mindig AUG (startkodon), ami egyben methionint is kódol. A további 19 aminosavat a maradék 60 kodon kódolja.

Transzkripciós faktorok A transzkripció szabályozása A génexpresszió szabályozása az élet egyik legfontosabb, központi mozzanata Szerepe: - a szervezet kifejlődésekor (differenciálódás: bizonyos fehérjék megjelennek, mások letiltódnak) - felnőtt szervezetben a környezethez való adaptálódás, sejtosztódás, külső jelekre válasz … A génexpresszió során az egyik legfontosabb szabályozási szint: a transzkripció szabályozása. Transzkripciós faktorok Specifikus transzkripciós faktorok - specifikus egy adott génre vagy géncsoportra - enhancer-hez kötődik - más specifikus transzkripciós faktorokkal kombinálódva szelektíven aktiválja a gént Általános transzkripciós faktorok - nem specifikus az adott génre, általános szerepű regulátor - a promoterhez (TATA-Box) kötődik - elősegíti az RNS-polimeráz bekötődését a promoterhez

tRNS-molekula Antikodon Rövid RNS-molekulák (<100 Nukleotid). Feladatuk az aminosavak szállítása a transzláció során. Specifikus bázistriplettjük az antikodon. A tRNS-molekulák is a sejtmagban transzkriptálódnak és processzálódnak, és csak ezt követően juthatnak ki a citoplazmába a magpórusokon keresztül. Aminosavat hordozó formáját Aminoacil-tRNS-nek hívjuk. Aminosav kötőhely Antikodon 2D-s szerkezet Lóhere alak 3D-s szerkezet szimbólum

rRNS-molekula Az rRNS molekulák is a sejtmagban, a sejtmagvacska területén transzkriptálódnak és processzálódnak. Az érett 18S rRNS 33 fehérjével együtt a kis riboszómális alegységbe épül be. Az 5S, 5,8S és 28S rRNS molekulák 49 fehérjével együtt a nagy riboszómális alegységet építik fel. Az rRNS-ek csak a riboszómális alegységekbe beépülve hagyhatják el a sejtmagot a magpórusokon keresztül.

Az eukariótákban a transzkripció és transzláció térben és időben elkülönülve zajlanak

A sejtmagban történő génregulációs támadáspontok DNS kondenzálódás, hiszton és DNS módosulások Transzkripció RNS processzálás Magpóruson keresztüli transzport

Génreguláció – kromatin struktúra A DNS citozin bázisainak metilálása (DNS metiláció) inaktiválja a gént.

Génreguláció – kromatin struktúra Acetiláció Deacetiláció Heterokromatin Eukromatin A hisztonok acetilálása fellazítja a heterokromatint, és az érintett kromatin szakasz eukromatikus lesz (génaktiválódás). A transzkripció előfeltétele, hogy az adott gén eukromatikus legyen. Fakultatív heterokromatin: olyan heterokromatin, ami szükség esetén fellazítható eukromatinná. Konstitutív heterokromatin: olyan DNS szakasz, ami örökre heterokromatikus, és ezáltal elérhetetlen marad a transzkripció számára.

További génregulációs lehetőségek Sejtmag DNS kondenzálódás, hiszton és DNS módosulások Transzkripció RNS processzálás Magpóruson keresztüli transzport RNS lebontása ribonukleáz enzimek által Transzláció Részleges proteolízis Kémiai módosítások Sorting és továbbítás a célhelyre Biológiailag aktív fehérje A fehérje ubikvitinizálódása és degradálódása a proteoszomában Lebomlott fehérje (aminosavak)

Felhasznált irodalom Neil A. Campbell, Jane B. Reece, und Jürgen Markl : Biologie, 7. Auflage Pearson Studium Alberts – Johnson – Lewis – Raff – Roberts – Walter: Molecular biology of the cell. 5. Auflage, Garland Science Dr. Röhlich Pál előadásai