JELÖLÉSMENTES BIOSZENZORIKAI MÉRÉSEK Fehérjék és baktériumok vizsgálata Pallagi Patrik Jedlik Ányos Gimnázium Budapest Vecsernyés Dóra Eötvös József Gimnázium és Kollégium Tata Mentorok : Patkó Dániel Kovács Boglárka 1

Mi is az a bioszenzorika? Sokféle definíció A bioszenzor a biológiai jelek átalakítására vagy detektálására, és detektálásuk megkönnyítésére szolgáló eszköz. Interdiszciplináris: kémia, biológia, fizika kicsit lentebb csúsztattam,így nem olyan zsúfolt, kell az a netes hivatkozás? mindenhol fekete volt,ezt is átszineztem 2

Detektálás jelöléssel Jól ismert, nagy az érzékenysége Rendkívül munkaigényes Drága A felhasznált jelölő molekula megváltoztathatja a vizsgálni kívánt anyag szerkezetét, tulajdonságait. 3

A jelölésmentes bioszenzorika A minta a fizikai jelenlétével hozza létre a detektált jelet Tömeg: pl. mikromérleg Törésmutató: pl. OWLS csak a wikipedian találtál QCM chipeket?keress már légyszi egy cikket vagy gyártót és onnan linkelj be 4

Optikai hullámvezető fénymódus spektroszkópia OWLS OWLS – Optical waveguide lightmode spectroscopy Törésmutató változáson alapszik Evaneszcens tér ~200nm

Felhasznált anyagok Hullámvezető chip PBS: foszfát puffer Fehérjék: BSA: marha szérum albumin poli-L-lizin Baktériumok: Salmonella typhimurium GFP-t (zöld fluoreszkáló fehérje) fejez ki

Chipek előkészítése Savazás Vízzel átmosás Nitrogénnel szárítás Krómkénsavban áztatás Kálium-hidroxidban áztatás Szonikátorban 5-ször vízcsere Pufferes tárolás

Salmonella typhimurium Fluoreszkáló baktériumok Bürker-kamrás sejtszámlálás

Baktérium adhézió BSA-n Mérési eredmények Baktérium adhézió BSA-n BSA nem mosható le a baktériumok mérsékelten lemoshatóak

Baktérium adhézió poli-L-lizinen Mérési eredmények Baktérium adhézió poli-L-lizinen PLL vízben oldva a baktériumok nem mosódnak le

Baktérium adszorpció hidrofil hullámvezetőn Mérési eredmények Baktérium adszorpció hidrofil hullámvezetőn viszonylag jól kitapadnak a baktériumok

Baktérium adszorpció hidrofób hullámvezetőn Mérési eredmények Baktérium adszorpció hidrofób hullámvezetőn buborék a rendszerben rosszul tapadnak ki a baktériumok

Refraktométeres mérés Refraktométer: törésmutató mérésére szolgáló berendezés Anyag Törésmutató n(H2O) 1,33192 n(PBS) 1,33366 n(PLL) 1,33226 n(Baci) 1,33363 n(BSA) 1,33387

Köszönetnyilvánítás Prof. Dr. Bársony István Dr. Daróczi Csaba Sándor Dr. Radnóczi György Zoltán Patkó Dániel Kovács Boglárka

Köszönjük a figyelmet!