ORTHOMYXOVÍRUSOK (influenzavírusok) influence- csillagok állása befolyásolja? e ndemia, pandemia 100 (80-120) nm átmérőjű, gömb, v. hosszúkás genom: negatív egyszálú RNS, 8 szegmentből áll !!! (antigenitás változás!) ( C vírus 7 szegment) strukturális fehérjék: PB1, PB2, PA (RNS polimerázok) nucleoprotein (NP) matrix fehérje (M1), membrán protein (M2) lipid tartalmú burok Hemagglutinin (HA) és Neuraminidáz (NA): 10 nm-es glicoprotein nyúlványok, melyek a felszíni antigenitást meghatározzák A B C típusok a NP és M fehérjék alapján subtipusok: a HA (H1-H15) és NA (N1-N9) alapján

Downloaded from: StudentConsult (on 12 March :00 PM) © 2005 Elsevier

Downloaded from: StudentConsult (on 12 March :00 PM) © 2005 Elsevier

Downloaded from: StudentConsult (on 12 March :04 PM) © 2005 Elsevier

HA –hemagglutinin jelentősége: Fogékony sejthez kapcsolódás (sziálsav) Anti-HA ellenanyagok neutralizáló hatásúak Variabiltás, járványok Hemagglutináció 16 különböző H, amberben H1, H2, H3 NA (Neuraminidáz) jelentősége: enzim aktivitás, sziálsav hasítás, sejtből történő kijutás, Mucin rétegen átjutás Antigenitás 9 különböző N Emberben N1, N2 Antigén „Drift”: kisfokú antigén változás (pontmutációk) Antigén „Shift”: nagyfokú antigén változás,REASSZORTÁCIÓ, új szubtípus (genetikai rekombináció) csak A vírus esetében

Nomenclatura Gazda szervezet, földrajzi eredet, törzs számozása,az izolálás éve ( HA és N típusa) A/ swine/Iowa/3/70 (H1N1) Emberi eredet nincs feltüntetve, pl. A/Scotland/42/89(H2N2)

Downloaded from: StudentConsult (on 12 March :04 PM) © 2005 Elsevier HA kötődik a sejtfelszíni glycoproteinek sziálsav részéhez Endocytozis Intracelluláris vezikulum, endosoma „uncoating”, nucleocapsid a cytoplazmába jut Transzkripció, replikáció a sejtmagban mRNA-ról protein képzés a cytoplazmában A HA és a NA glycoproteinek az ER-ba ésa Golgi-ba jutnak Az M2 protein a sejtmembránba kötődik, a HA és a NA a felszínre jut. A vírus „bimbózással” kijut a sejtfelszínről, kb. 8 órával a fertőzés után Replikáció

Pathogenitás 1. cseppfertőzés, inkubáció 1-4 nap felső légúti megbetegedés Csillószőrös hámsejtek pusztulása. NA elősegíti a bejutást és a terjedést Vírus a sejtek apikális felszínén szabadul ki. 2.Alsó légutakban a bronchiális és alveoláris sejtek pusztulása A pneumonia lehet virális, vagy baktérium felülfertőzés eredménye Viraemia interferon, cytokine válasz a fertőzést követő 2. naptól; láz, vírusürítés Tünetek: láz, rosszullét, fejfájás, hidegrázás, torok gyulladás, köhögés, myalgia, 2-10 nap Immunválasz: humorális: protektív HA és NA ellenanyagok, specifikusak. Celluláris (T): általánosabb(nukleocapsiddal, M2 proteinnel szemben

Komplikációk: Bakteriális pneumonia ( Haemophylus influenzae, Str. Pneumoniae, S.aureus 1918: millió halál eset Myositis ENCEPHALITIS Reye syndroma (acut encephalitis, máj degeneráció) Guillain-Barré syndr.

Influenza B. valamivel enyhébb, de hasonló tünetek. Gyermekek: hányással Influenza C. lázzal járó felső légúti megbetegedés, elsősorban gyermemekek. Járványok nem fordulnak elő.

Table Diseases Associated with Influenza Virus Infection Diseases Associated with Influenza virus infection DisorderSymptoms Acute influenza infection in adultsRapid onset of fever, malaise, myalgia, sore throat, and nonproductive cough Acute influenza infection in childrenAcute disease similar to that in adults but with higher fever, gastrointestinal tract symptoms (abdominal pain, vomiting), otitis media, myositis, and more frequent croup Complications of influenza virus infectionPrimary viral pneumonia Secondary bacterial pneumonia Myositis and cardiac involvement Neurologic syndromes: Guillain-Barré syndrome Encephalopathy Encephalitis Reye syndrome

Új influenza törzsek megjelenésének magyarázata Szegmentált RNS genom Replikáció emberi és állati (madár, sertés) gazdaszervezetben Coinfectio esetén a genom szegmentek random kapcsolódhatnak, új vírusok alakulhatnak REASSZORTÁCIÓ Antigén drift miatt kb. 2-3 évente megjelenő új influenza A és B járványok Antigén „shift” miatt nagyobb (világ) járványok influenza A genom kicserélődéssel ( Influenza B elsősorban human vírus, nincs lehetőség a cserélődésre állati vírusokkal) A sertések sejtjein mind a humán, mind az avian törzsek számára vannak receptorok!!!

Downloaded from: StudentConsult (on 12 March :04 PM) © 2005 Elsevier

Downloaded from: StudentConsult (on 12 March :00 PM) © 2005 Elsevier

Mind a 8 szegmens madár eredetű 3 új szegmens (HA, NA, PB1) madár eredetű, a többi a 1918-ból ered 2 új szegmens (HA, PB1) madár eredetű, a többi a ból származik De Clercq Nature Reviews Drug Discovery 5, Dec 2006

Madár (avian) influenza 1997 és 2006 között 256 esetben identifikálták a H5N1 törzset emberben, 151 halálos Egyéb avian törzsek: H9N2, H7N2, H7,N7, H7N3 enyhe humán fertőzések, H7,N7:conjunctivitis H5N1-emberi fertőzések IS, akár halálos. Szoros kontaktus a madarakkal!!! Nem igazán ember pathogén. Az avian törzsek eltérő szerkezető receptorokhoz kötődnek.Veszély: shift, mutáció Sertésben mindkét tipusú receptor megtalálható

Table Laboratory Diagnosis of Influenza Virus Infection Test Detects Cell culture in primary monkey kidney or Madin-Darby canine kidney cellsPresence of virus; limited cytopathologic effects Hemadsorption to infected cellsPresence of HA protein on cell surface HemagglutinationPresence of virus in secretions Hemagglutination inhibitionType and strain of influenza virus or specificity of antibody Antibody inhibition of hemadsorptionIdentification of influenza type and strain Immunofluorescence, ELISAInfluenza virus antigens in respiratory secretions or tissue culture Serology: hemagglutination inhibition, hemadsorption inhibition, ELISA, immunofluorescence, complement fixationSeroepidemiology Genomics: RT-PCRIdentification of influenza type and strain

Laboratoriumi Diagnozis Teszteredmény: Sejtkultura: majom vese, vagy Madin-Darby canine kidney(MDCK)vírus cytopathiás hatása Hemadsorptio (a sejtkulturán) HA jelenlétének kimutatása Hemagglutináció virus jelenlétének igazolása Hemagglutináció gátlás influenza virus típusa Hemadsorptio gátlás influenza vírus típusa Immunofluoreszcencia, ELISAInfluenza virus antigén a vizsgálati anyagban vagy a sej tkulturában Serologia: hemagglutináció gátlás hemadsorptio gátlás, ELISA, szeroepidemiológia immunofluoreszcencia, complement kötési reakció (csak típust!) Reverz transzkriptáz PCR( RT-PCR) influenza tipus és subtipus

HEMADSORPTION

Therápia, prevenció Amantadin, Rimantadin: „uncoating” gátlása.target : M2 protein Csak Influenza A Zanamivir(Relenza), oseltamivir (Tamiflu): neuraminidaze gátlás Influenza A és B órán belül! Védőoltások: Elölt vírus: emrionált tojásban szaporítva (allergia! „split vaccina” … vaccina Élő: nasalis spray formájában Trivalens: 2 A és 1 B típus HA és N antigénjét kell tartalmazzák („strains of the year”)

Paramyxovírusok Genusok: Morbilli vírus- kanyaró vírus Paramyxovírus – Parainfluenza vírusok Mumps vírus Pneumovírus - respiratory syncytial(RSV) vírus metapneumovírus Nipah vírus, Hendra vírus

Negatív, egyszálú RNS Helikális nucleocapsid, burok (envelope) NP (nucleoprotein) P (polimeraze phosphoprotein) L (large) protein, M (matrix) protein Burokban F (fuziós) protein, HN, N, vagy G protein Replikáció indulása: HN, vagy H vagy G kötódik a sejt felszíni sziálsavhoz Morbilli: CD46-hoz (membrane cofactor protein, és CD150-hez (aktivált T,B sejteken) A paramyxovírusok syncycium képzést (óriás sejtek) indukálnak Replikáció a cytoplazmában, bimbózással jut ki

Downloaded from: StudentConsult (on 22 March :14 PM) © 2005 Elsevier

Morbilli (kanyaró) vírus 5 kiütéses gyermekbetegség: rubeola, roseola, fifth disease, bárányhimlő, kanyaró Egyetlen serotipus Felszíni Hemagglutinin, (NA nincs) F protein: hemolyzin

pathomechanizmus A vírus először a légutak epitheliális sejtjeit fertőzi. Óriás sejt képzés Generalizált fertőzés,viraemia Conjunctiva, légutak, hugyutak, nyirok rendszer, erek, idegrendszer Kiütések alapja: T sejtes aktivitás a kapillárisok fertőzött sejtjeivel szemben Kp. idegrendszeri szövődmények –Postinfekciós encephalitis, –SSPE („lassú vírus”) fertőzés

A kanyaró klinikai tünetei Nagy contagiozitás (Faroe szigetek 1840)! Cseppfertőzés, inkubációs idő 7-13 nap Magas láz, köhögés, coryza, conjunctivitis, photophobia 2 nap után megjelennek a Koplik foltok a buccalis mucosán (24-48 órán át) Maculopapulozus kiütések testszerte(fül mögül indulva), később confluens

Komplikációk: Pneumonia, később bakteriális superinfekció is lehet Encephalitis SSPE subacut sclerotizáló panencephalitis 2 éven aluli első fertőzésnél gyakoribb, progrediáló degeneratív elváltozás Defektív vírus ? Sclerosis multiplex, Paget kór, Crohn?autoantitestek?

Diagnózis Klinikai kép alapján Sejt mintákon immunfluoreszcencia alapjám Tenyésztés: nehézkes, humán fibroblaszt, Vero sejt Serologia, KK

Védőoltás A haemolitikus F proteinnel szemben kialakuló immunitásnak a sejtről sejtre terjedést kell megakadályozni Élő, attenuált törzs (Schwarz vaccina) MMR (morbilli, mumps, rubeola) Fejlődő országokban, afrikában még ma is probléma

Parainfluenza vírus Pneumovirus genus, HA, N nincs, felszíni G lipoprotein F protein: syncytium képzls Croup, tracheitis, laryngitis Bronchiolitis, csecsemők Respiratorikus vírus fertőzések kb. 6-9 %-a 3-6 nap inkubáció Elsősorban gyermekek, vagy idősek (idős otthonok) SIDS sudden infant death syndr Nincs védőoltás Dg: immunofluorescens technika, gyors tesztek a vizsgálati anyagból, molekuláris dg(RT-PCR) Hemadsorptio Szezonalitás, oktober, november

Therápia 1. tüneti: oxigenizáció, esetleg intubálás 2. Ribavirin (aerosol) nem túl hatásos 3. Hiperimmun savó, monoclonális ellenanyag kivételes veszély helyzetben

Human metapneumovírus Hollandia Hasonló az RS vírushoz Nincs HA, N Gyermekekben bronchiolitis, magas lázzal, crepitációval, RTG tünetekkel Nem új vírus. Dg: RT-PCR Szezonalitás hasonló az RS vírushoz. Therápia- védőoltás-

Mumps vírus Egyetlen serotípus Cseppfertőzés, napos inkubáció Nyálmirigy gyulladás, parotitis Influenza szerű tünetek, parotitis, fájdalmas duzzadás. Lefolyás: 4-5 nap Komplikációk: meningitis, meningoencephalitis –Pubertás után: orchitis, oophoritis (pancreatitis?)

Diagnózis Elsősorban klinikai kép alapján Direkt vírus kimutatás: nyál, liquor(meningitis esetén) Sejt kulturák: majom vese, Hep2, hemadsorptio, hemadsorptio gátlás Serologia, KK –titer emelkedés! Vaccinálás: MMR trivalens, élő, attenuált.

Nipah és Hendra vírusok sertések léguti fertőzése, human encephalitis Malaysia-Nipah Bangladesh Nipah betegség (sertések kizárva) 1994 hendra vírus, lovak és emberek fertőzése A Nipah és a Hendra vírusok a paramyxovírusokon belül külön genust képviselnek Fruit bats a természetes rezervoár