Az előadás letöltése folymat van. Kérjük, várjon

Az előadás letöltése folymat van. Kérjük, várjon

Dr. Reismann Péter Semmelweis Egyetem II.sz. Belgyógyászati Klinika.

Hasonló előadás


Az előadások a következő témára: "Dr. Reismann Péter Semmelweis Egyetem II.sz. Belgyógyászati Klinika."— Előadás másolata:

1 dr. Reismann Péter Semmelweis Egyetem II.sz. Belgyógyászati Klinika

2 A szervezet védekező rendszere Természetes immunválasz - veleszületett, általánosabb - aktiválódásakor akut fázis reakciót indít el - gyulladásos folyamat indul be Szerzett immunválasz - tanult - specifikusabb - lassabb folyamat

3 Toll receptor Toll-like receptor 1985: dorso-ventralis fejlődés Antifungalis- antimikróbás feladat

4 PAMP: pathogen associated molecular pattern kórokozóhoz kapcsolt molekuláris minta DAMP: danger associated molecular pattern veszélyhez asszociált molekuláris mintázat PRR: pattern recognition receptor minta felismerő receptor PAMP PRR DAMP sejtmag monocita gyulladásos citokinek PAMP-PRR

5 Toll-like receptorok

6 Toll-like receptor Interleukin-1 szupercsalád az intracelluláris homológia miatt 1-es típusú transzmembrán protein 21 leucinban gazdag motívum, amely a ligandkötésben és a dimeralizációban vesz részt.

7 citoplazma sejtmag MKK JNK NEMO (IKK  ) IKK  IKK  AP-1NF-  B IBIB MyD88 IRAK TRAF-6 IKK complex TLR-4 CD14 MD-2 LPS Fibrinogén, fibronektin oxLDL Taxol RSV F-protein Hsp 60 and 70 IL-1, IL-6, TNF-  TRIF IRF3 Szabad zsírsav

8 TLR aktiváció a T-sejteken TLR expresszió mind az antigén prezentáló sejteken, mind a T reg sejteken! Autoimmun és gyulladásos folyamat szabályozás: már az aktiváció elején elindítja a folyamat szabályozott csillapítását!

9 Toll-like receptorok és diabetes 1-es típusú diabetes mellitus: proinflammatorikus áll. - Monocyta TLR2 és TLR4 expresszió és aktiváció fokozott T1DM-ben - TLR2 és TLR4 ligandok szintje emelkedett T1DM-ben, mint a Endotoxin – lipopolysaccharid Hsp60- heat shock protein 60 HMB1- high mobility group boksz 1 – késői sepsis gyulladásos mediator

10 TLR2 és 4 ligandok 1-es típusú DM Controls (n = 37) Type 1 diabetes (n = 34) Endotoxin (nmol/l) 2.53 ± ± 0.82** HMGB1 (nmol/l) 0.13 ± ± 0.06** Hsp60 (pmol/l) 18.5 ± ± 6.7** GAS6 (nmol/l) 11.2 ± ± 5.9 Table 2 Levels of ligands of TLR2 and TLR4 Data are expressed as mean ± SD **p < 0.01 vs controls

11 Inzulin hatása a TLR expresszióra A hyperglycaemia elősegíti, az inzulinkezelés csökkenti a TLR-ek expresszióját

12 Vírus precipitálta diabetes BioBreeding diabetes rezisztens (BB-DR) patkányoknál diabetes jelentkezett, ha Kliham rat vírussal (KLV) fertőzték meg. A KLV egy egyszálú DNS parvovírus. A vírus nem közvetlenül a pancreast fertőzi meg, hanem megváltoztatja az egyensúlyt a pathogének és a szabálozó sejtek arányát, főként a CD4+CD45RClo sejtek arányát. Továbbá, ha a fertőzés mellé TLR aktiváló ligandokat is adnak, akkor a 23%-os arányú csak vírus indukálta diabetes arány % közé emelkedik a különböző TLR ligandoktól függően. Ezenfelül a NOD TLR2−/− egereknél a diabetes incidendia 50%-kal csökken a NOD TLR2+/+-hoz képest.

13 TLR4 és inzulin rezisztencia ? obezitás?inzulin rezisztencia Obesitás - - krónikus proinflammatórikus állapot Lymphocyta beszűrődés a zsírsejtek körül a zsírszövetben. Fokozott proinflammatórikus citokin szint a zsírszövetben és a keringésben (pl. TNF , IL-6) De hogy mi váltja ki, még nem teljes mértékben ismert! a keringő zsírsavak szintje túlsúlyosságban emelkedett, és a zsírsavak emelik a proinflamm. citokinek szintjét TLR4 Az egyik kapocs: TLR4

14 TLR4 és szabad zsírsav TLR4 expresszió növekszik obesitásban Szabad zsírsav fokozza a TLR4 aktivációt

15 TLR4 és szabad zsírsav

16 TLR4 és inzulin rezisztencia

17 Monocyta-adipocyta sejtkultura monocyta TLR4 TLR4-ligand Proinflammatorikus cytokinek adipocyta Inzulin receptor inzulin IRS GLUT4

18 RAGETLR4 Diabetes és diabeteses szövődmények Természetes immunválasz PRR pattern recognition receptor ?

19 A TLR4 gén polimorfizmusa 9q32-33, két gyakori koszegregációs polimorfizmus (10%) cDNS-en start kodontól 3 ’ irányba 896. pozícióban: Adenin Guanin 299. pozícióban: AsparaginsavGlicin cDNS-en start kodontól 3 ’ irányba pozícióban: CitozinTimin 399. pozícióban: Threonin Izoleucin

20 TLR4 gén polimorfizmus hatása Az extracelluláris régiót érinti  -helikális struktúra felbomlik,  fonal alakzattá alakul át A helyi töltési viszonyok változnak Zavart okozhat a TLR4 sejtmembránba szállításába Zavart okozhat a receptor-ligand kapcsolódásakor Zavart okozhat a co-receptorok megkötésében

21 TLR4 gén polimorfizmus klinikai jelentősége -csökkenti a belégzett LPS-re létrejövő válaszreakciót Arbour N et al TLR4 mutations are associated with endotoxin hyporesponsiveness in humans. Nature Genetic 25: , növeli az esélyét Gram-negatív baktériumok okozta fertőzésnek Schwartz DA TLR4 and LPS hyporesponsiveness in humans. Int J Hyg Environ Health 205:221-7, csökkenti a carotis-atheroszklerózis rizikóját Kiechl S, Lorenz E, Reindl M, Wiedermann CJ, Oberhollenzer F, Bonora E, Willeit J, Schwartz DA Toll-like receptor 4 polymorphisms and atherogenesis. New Engl J Med 347:185-92, növeli a pravastatin kardioprotektív hatását Boekholdt SM, Agema WRP, Peters RJG, Zwinderman AH, van der Wall EE, Reitsma PH, Kastelein JJP, Jukema JW, REGRESS Study Group Variants of Toll like Receptor 4 modify the efficacy of statin therapy and the risk of cardiovascular events. Circulation 107: , 2003 TLR4 hatása nem fertőző eredetű, de krónikus gyulladásos folyamatokban?

22 I. Diabetes mellitus és a természetes immunitás 1-es típusú DM: TLR függő interferon-  aktiváció insulinitist okoz 2-es típusú DM: akut fázis reakció, krónikus gyulladás, akut fázis proteinek (CRP, IL-6) Szövődmények: Intracelluláris stressz, Nf-kB aktiváció

23 Diabetes és TLR4 Kérdésfelvetés és célkitűzés: A TLR4 gén Asp299Gly/Thr399Ile funkcionális polimorfizmus vizsgálata  1 -es és 2 -es típusú cukorbetegségben  a diabeteses nephropathia és a perifériás neuropathiaval összefüggésben

24 Módszerek: Genotipizálás A polimorfizmus meghatározása PCR és restrikciós endonukleáz felhasználásával történt PCR-hez polimorfizmusra specifikus primerek Hasítás - Asp2999Gly esetén NcoI - Thr399Ile esetén HinfI endonukleázzal történt Diabetes és TLR4

25 Genotipizálás: Vad típus Asp299Gly Vad típus Thr399Ile Diabetes és TLR4

26 Beteg kiválasztás: - diabeteses járóbeteg rendelésen megjelent 1-es és 2-es típusú diabetes mellitusban szenvedő betegek - előzetes írásbeli beleegyező nyilatkozat - egyetemi etikai bizottság engedélyével - részletes antopometriai, fizikai állapot, anyagcsere állapot felmérés: 776 beteg került bevonásra es típusú DM es típusú DM Diabetes és TLR4

27 1-es típusú DM 2-es típusú DM Heterozigóta Asp299Gly/Thr399Ile 26 / 246 (HA: 10.6%) 65 / 530 (HA: 12.3%) Homozigóta Gly299Gly/Ile399Ile 0 1 / 530 (HA: 0.2% ) Diabetes és TLR4 eredmény: Nincs szignifikáns különbség (p = 0.63) HA: hordozási arány

28 1-es típusú diabetes2-es típusú diabetes Vad típus Asp299Gly & Thr399ILe p-értékVad típus Asp299Gly & Thr399ILe p-érték n = 220n = 26n = 465n = 65 Diabetes időtartalma (év) 19 [7.9;29.7]21 [19.3;22.7] [10.7;12.3]11 [8.6;12.8]0.45 Nők aránya (%) 50.0 [43.4;56.6] 42.3 [23.3;61.3] [39.4;48.4] 45.3 [33.1;57.5]0.79 Életkor (év)47 [45,4;48.6]50 [44;56] [64.5;66.5]64 [61.2;66.4]0.15 Dohányzás (%) 26.5 [19.5;33.5] 23.8 [5.6;42.0] [20.6;30.5] 24.3 [10.5;38.1]1.00 Magas vérnyomás(%) 32.7 [26.5;38.9] 26.9 [9.9;44.0] [67.7;75.9] 65.6 [54.0;77.3]0.38 HbA 1 c érték (%)7.3 [7.0;7.6]7.1 [6.5;7.6] [7.2;7.4]7.0 [6.7;7.3]0.19 Koleszterin szint (mmol/l) 4.9 [4.8;5.1]5.0 [4.6;5.3] [4.9;5.2]4.9 [4.6;5.3]0.49 Triglicerid szint (mmol/ll) 1.1 [0.9;1.2]0.9 [0.7;1.1] [1.8;2.0]1.9 [1.6;2.3]0.86 BMI 25.6 [21.3;29.9] 24.7 [21.3;28.1] [26.0;36.6] 34.4 [29.5;39.3]0.49

29 Polim.Vad Polim. 2-es típusú DM 1-es típusú DM Diabetes és TLR4 eredmény:

30 Következtetések: I. vizsgálat: Diabetes és TLR4 Közvetlen összefüggést a TLR4 gén polimorfizmusa és a diabetes mellitus típusa között nem találtunk. Szoros összefüggés mutatkozott a TLR4 gén polimorfizmusa és a polyneuropathia előfordulása között 2 -es típusú diabetes mellitusban. Hasonló összefüggést 1 -es típusú DM-ben, vagy nephropathiával kapcsolatban nem tudtunk kimutatni.

31 Következtetések: I. vizsgálat: Diabetes és TLR4 A diabeteses polyneuropathia pathogenesise különbözhet az 1-es és a 2-es típúsú DM-ben A természetes immunválasz szerepet játszhat a 2-es típusú DM polyneuropathiájának kialakításában?

32 Köszönöm a figyelmüket!


Letölteni ppt "Dr. Reismann Péter Semmelweis Egyetem II.sz. Belgyógyászati Klinika."

Hasonló előadás


Google Hirdetések