Az előadás letöltése folymat van. Kérjük, várjon

Az előadás letöltése folymat van. Kérjük, várjon

Élősejtszám meghatározás 2. gyakorlat. Értékelés  Telepszámlálás  MPN.

Hasonló előadás


Az előadások a következő témára: "Élősejtszám meghatározás 2. gyakorlat. Értékelés  Telepszámlálás  MPN."— Előadás másolata:

1 Élősejtszám meghatározás 2. gyakorlat

2 Értékelés  Telepszámlálás  MPN

3 Telepszámlálás  Az inkubálás után megszámoljuk a telepeket  A telepeket valamennyi, legfeljebb 300 telepet tartalmazó, lemezen megszámoljuk  Az értékelésben a 10 és 300 közötti telepet tartalmazó lemezek vesznek részt

4 Telepszámlálás  Problémák – Szétfutó telepek – Összefolyó telepek Lehetséges megoldás a lemez részekre osztása, és az így kapott mikrobaszám extrapolálása

5 Az eredmény kiszámítása 90 mm átmérőjű Petri-csészék használatakor:  Maximálisan számolható telep: 300/lemez  Ha a Petri-csésze átmérője nem 90 mm (vagy membránt használtunk) a számolható telepek mennyiségét méretarányosan növelni, vagy csökkenteni kell

6 Az eredmény kiszámítása  Két hígításból számolunk, úgy hogy legalább 10 telep legyen egy Petri-csészén  A minta mikrobaszámának megadása (N) a következő egyenlettel történik: Ahol  C a két lemezen megszámolt összes telep V az inokulum térfogata (ml) d az első megszámolt lemez hígítási foka (a hígítatlan mintáé 1)

7 Az eredmény kiszámítása Példa: az első megszámolt hígításban (d=10 -2 ): 168 telep a második megszámolt hígításban: 20 telep Inokulum (V): 1 ml az eredmény: 1,7 x 10 4 cfu/g(ml)

8 MPN (Most Probable Number) módszer  Meghatározzuk a különböző hígításokhoz tartozó pozitív csövek számát  A pozitív csövek száma alapján kulcsszámot képezünk  Kulcsszám alapján MPN értéket (táblázatból) határozunk meg  MPN alapján a hígítás figyelembe vételével kiszámítjuk a kiinduló sejtszámot

9 Értékelés Példa: hígításonként 3 párhuzamos leoltás A kulcsszám első tagja az az utolsó hígítás, amelyben még maximális a pozitív csövek száma: 300 A figyelembe veendő hígítás (d): Hígítás (d) Pozitív csövek száma 33000

10 Értékelés  A kulcsszámhoz tartozó MPN érték (táblázatból) MPN d (300) = 2,3 KulcsszámMPN 3002,3 3104,3 3209,

11 Értékelés  A minta sejtszámának (MPN 0 ) kiszámítása a kulcsszám és a hígítás figyelembe vételével: MPN 0 = MPN d /d = 2,3/10 -2 MPN 0 = 2,3 x 10 2 /g(ml)

12 Értékelés  Kategóriák (a kulcsszámok előfordulásának valószínűsége szerint) Figyelembe venni általában csak az 1.és néha a 2. kategóriába tartozó eredményt szabad. A 0. kategóriába tartozó eredmény nem vehető figyelembe!


Letölteni ppt "Élősejtszám meghatározás 2. gyakorlat. Értékelés  Telepszámlálás  MPN."

Hasonló előadás


Google Hirdetések