Előadást letölteni
Az előadás letöltése folymat van. Kérjük, várjon
1
Bioaktív komponensek kimutatása növényi mintákból
Dr. Remenyik Judit PhD (Kertészettudományi és Növényi biotechnológia Tanszék Biokémiai és molekuláris diagnosztikai laboratórium)
2
Mérés menete Mintavétel Minta tárolás Minta előkészítés Mérés
3
Mintavétel Adott fajra, fajtára jellemző legyen
Adott termőhelyre jellemző legyen Nagy számú/ nagy tömegű egyed gyűjtése Homogenizálás A minta tárolása A minta szállítása
4
A minta tárolása Minden esetben a mérendő komponenstől függ! +8 °C
Liophilizálás - 70 °C
5
A minta előkészítése Homogenizálás Feltárás Kioldás Szűrés , tisztítás
6
Bioaktív komponensek Cukor tartalom- egyszerű cukrok (glükóz, fruktóz szacharóz ) Savtartalom (almasav, citromsav) Fehérje tartalom Rost tartalom (oldhatatlan, oldható) Szárazanyag Nitrát tartalom
7
Bioaktív komponensek Antioxidáns sűrűség meghatározás
Vízoldékony- és zsíroldékony antioxidánsok Vízoldékony antioxidánsok: C-vitamin Antioxidáns fehérjék (enzimek) Vízoldékony színanyagok (antocianinok, flavonoidok) B-vitaminok Galluszsav
8
Bioaktív komponensek 2. Zsíroldékony antioxidánsok Karotinoidok
Tokoferolok Szabad zsírsavak d. Izoprén származékok e. Klorofollok Polifenolok A-vitamin
9
Laboratoriumunkban vizsgált komponensek
10
Laboratoriumunkban vizsgált komponensek
11
Laboratoriumunkban vizsgált komponensek
12
Laboratoriumunkban vizsgált komponensek
α-tokoferol: R1,R2,R3=CH3 ß-tokoferol: R1,R3=CH3; R2=H γ-tokoferol: R2,R3=CH3; R1=H δ-tokoferol:R3=CH3; R1,R2=H
13
Antioxidáns kapacitás mérése kemiluminométerrel
14
A mérés elve 1.A fotoérzékeny vegyületet hν energiával besugározzuk.
S+ hv→ S.+ + O2.- A O2.- reagálnak a minta antioxidáns anyagaival. 2.A detektor vegyület lép ezután reakcióba a maradék O2.- . O2.- + D → hv 3. A kisugárzott energiát méri a detektor.
15
Minták adatanalízise (ACW)
16
Minták adatanalízise (ACL)
17
Spektrofotometria A fényintenzitás változását mérjük. Az UV-VIS tartományban az anyagok szelektíven adszorbeálják a fényt. A= ε*c*l A mérést minden estben az adszorpciós maximumon mérjük. Hibalehetőségek: Fényszóródás, oldószerpárolgás A ε nem helyes meghatározása .
18
Mérés 1. C-vitamin tartalom meghatározása
3.4. A C-vitamin (L-aszkorbinsav)
19
A mérés alapja Erősen redukáló hatású Fe3+ → Fe2+
Fe2+ színes komplexet képeznek az α,α, dipiridil reagenssel Fotometriás meghatározás Látszólagos C-vitamin tartalom Reduktonok Valódi C-vitamin tartalom
20
NAGYHATÉKONYSÁGÚ FOLYADÉKKROMATOGRÁFIA MŰSZER
oszlop: (kolonna) felépítése: minta töltet: szilikagél (módosított), adszorbens, ioncserélő, gél,… szűrő előkolonna: hőfok: szobahőmérséklet (!) 25 °C mozgófázis: folyadék oldószerek, oldószer-keverékek főkolonna HPLC-készülék felépítése: 4. oszlop detektor 1. eluens (mozgófázis) 2. pumpa 3. mintaadagoló (minta) 5. detektor 6. rekorder nagy nyomás biztosításához pumpa: „pulzálás-mentes” (több pumpa) mintabevitel: fecskendő szelepes megoldás detektor: UV spektrofotometriás, fluoreszcencia, vezetőképességi, tömegspektrometriás,.. UV-detektor I. oszlopkromatográfia: 1. klasszikus, 2. GC, 3. HPLC, ionkr. II. rétegkromatográfia : papírkr vékonyrétegkr.
21
A kromatogram értékelése
Hasonló előadás
© 2024 SlidePlayer.hu Inc.
All rights reserved.