Escherichia coli baktérium és géntechnológiai alkalmazási lehetőségei Készítette: Tóth Gergely
Jellemzése Fakultatív anaerob, Gram-negatív, spórátlan pálca, thermotoleráns, coliform enterobaktérium, ostorokkal és pílusokkal rendelkezhet Laktóz-fermentációnál sav és gáz képződik A mikrobiális genetika kedvelt modellje, és az egyik legszélesebb körben tanulmányozott baktérium Elsősorban nem patogén, de vannak patogén törzsei (O157:H7) Emlősök bélcsatornájában a normál flóra tagja Közegészségügyi indikátor, élelmiszer-vizsgálatok (fekáliás szennyeződés kimutatása, 1882 óta) Ismert a genomjának teljes bázissorrendje kb. 3 MB genom (cirkuláris, kétszálú DNS) Több plazmidja is lehet (3-20 kB, cirkuláris DNS)
Sejtalkotók
Miért ilyen kedvelt tesztorganizmus az E. coli? Haploid életciklus Gyors szaporodás (ideális körülmények között: 20 percenként osztódik) – pár napos genetikai kísérletek Kevés génnel rendelkezik az emberi DNS-el szemben Nincsenek intronok, felesleges bázisszekvenciák A T4-fág és l–fág fertőzni tudják (klónozó vektorok lehetnek)
Escherichia coli géntechnológiai alkalmazása A belőle kinyert restrikciós endonukleázokkal DNS-hasítás (pl. EcoRI-nél GAATTC palindrom szekvenciánál) EcoRI linkerek + EcoRI DNS gyűrűvé zárása Genetikai betegségek kimutatása molekuláris technikával Plazmid-kinyerése és transzformálása gazdasejtbe E. coli K12 felhasználása fág gének finom-szerkezeti térképezésére Gén-térképezés megszakított konjugációval Fehérjék, prohormonok extracelluláris termeltetése
Legújabb kutatások Nehézfém megkötésére alkalmas petidek gyártása, valamint bioakkumuláció szennyezett területen Tetrahydrobiopterin (BH4) gyártás Etanol gyártás (Zymomonas mobilis enzimek beültetésével)
Köszönöm a figyelmet!