Földigiliszta akut toxicitási teszt OECD 207-es számú teszt Készítette: Papp Bálint

Tesztorganizmus jellemzése Latin neve: Eisenia foetida Magyar neve: trágyagiliszta Gyűrűsférgek törzsébe tartozik Mérete 1,5 és 30 cm között változik Szelvényszáma: 50-250 Mivel a földigiliszta a talajjal táplálkozik, ez az élőlény alkalmas a talajban található szennyezőanyagok toxicitásának vizsgálatára Petével szaporodnak

Tesztorganizmus tenyésztése Petével szaporodnak Laboratóriumi körülmények között 50:50 eloszlású marha vagy sertés trágya és tőzeg keverékében nevelhetők (egyéb hulladék is használható) 20°C-on Ph: 7 Kis vezetőképesség: 6 mS alatt Ne tartalmazzon túl sok ammoniát (kevés vízelet) A tenyésztéshez fa dobozok: kb. 50x50x15cm, jól ódó fedéllel A peték 3-4 múlva kelnek kis és újabb 3-4 hét múlva lesznek felhasználhatóak 300-600 gramm tömegűek használhatók fel

Teszt jellemzése A tesztben a trágyagilisztát használjuk a talajban található szennyező anyagok toxicitásának vizsgálatára Két fajta vizsgálat: papír kontakt vizsgálat és mesterséges talaj vizsgálat Mindkettő során a végpont a letalitás ill. a túlélés Olcsó, laboratóriumi körülmények között könnyen végrehajtható Pontos Reprodukálható Akut teszt: 7 ill. 14 napig tart (a papír kontakt teszt 48 ill. 72 órán át).

Szükséges eszközök Földigiliszta tenyészet Szűrőpapír (80-85 g/m2; 0,2mm vastag; normál minőségű) Mesterséges talaj ami a következőkből áll: 10% sphagnum (felláp) tőzeg 20% kaolinos agyag (min. 30% kaolin tartalom) 70% ipari homok Nedvesség tartalom ~35% Üveg tartályok Egy 400-800 lux fényerővel megvilágított szekrény

Papír kontakt teszt A vizsgált anyagot vízben feloldjuk (1000 mg/l koncentrációban) ha nem oldódik vízben akkor valamilyen szerves oldószerben (pl. aceton) Ebből az oldatból egy 5 tagú hígítási sort (100-10-4) készítünk majd mindegyik tagból 1ml-et csepegtetünk a az előzőleg kivágott és az üvegedény aljára helyezett 8x3 cm-es szűrőpapírdarabra Hagyjuk megszáradni, majd száradás után 1ml desztvizet csepegtetünk rá Mindegyik üvegbe egy gilisztát rakunk A gilisztákat előtte 3 órán át desztvizes papíron tartjuk hogy a béltartalmuk eltávozzon, megmossuk őket és úgy helyezzük be az edénybe

Papír kontakt teszt Legalább 10 ismétlést csinálunk, mindegyik hígításhoz 10 desztillált vizes kontroll minta 20°C-os sötét szekrénybe zárjuk és 48 ill. 72 óra elteltével megszámoljuk az elpusztult állatokat Minden szokatlan eseményt fel kell jegyezni

Talaj teszt 0,01; 0,1; 1,0; 10; 100; 1000 mg/kg koncentrációjú vizsgált anyag+talaj keveréket kell készíteni, ügyelni kell hogy a vizsgált anyag és a talaj jól elkeveredjen Ha szennyezett talajról van szó akkor különböző százalékos arányban kell keverni a szennyezett vagy a kontroll talajt 750 g talajt bemérünk egy üvegedénybe Belehelyezünk 10 földigilisztát (a talaj tetejére) A földigilisztákat előtte 24 óráig tiszta kontroll vagy mesterséges talajban kell tárolni, és behelyezés előtt meg kell mosni őket.

Talaj teszt Az edényeket óvni kell a kiszáradástól 4 párhuzamos mérés ajánlott 4 kontroll edény ajánlott Az edényeket állandó 20°C-os helyre rakjuk, ahol folyamatosan világítjuk őket, hogy a giliszták a talajban maradjanak A teszt időtartama 14 nap A 7-ik és a 14-ik napon vizsgáljuk a mortalitást Az elején és a végén is meg kell határozni a nedvesség tartalmát a talajnak Minden szokatlan eseményt fel kell jegyezni

Kiértékelés A kapott eredményeket logaritmikus-normál beosztású diagramon ábrázolni kell és ebből meg lehet határozni az LC20 és az LC50 értéket Fel kell jegyezni az élő giliszták számát valamint az átlagos élőtömeget a kísérlet kezdetén és végén

Kiértékelés A Jegyzőkönyvnek tartalmaznia kell Vizsgált anyag: kémiai azonosító adatok, alkalmazás módja Grafikont Nedvesség tartalom a mérés kezdetén és végén pH a mérés kezdetén Kísérleti állatok: kor, tartási és tenyésztési körülmények, beszerzési forrás Bármilyen a kísérlet körülményeiben bekövetkező változást A kísérleti állatokon bekövetkező bármilyen fizikai, patológiai vagy magatartásbeli változást

Köszönöm a figyelmet

Források http://titania.sourceoecd.org/vl=1786249/cl=29/nw=1/rpsv/ij/oecdjo urnals/1607310x/v1n2/s8/p1 http://biogreenproductshungary.com/Laboratory_Report.html http://mek.oszk.hu/03400/03408/html/img/brehm-18-002-4.jpg http://4.bp.blogspot.com/_ilOJhC__6Fk/Si6vWxMgu0I/AAAAAAA ACyA/YLtIqjW4f28/s400/Redwiggler2.jpg