Izotóp Intézet Kft. Radiokémiai szennyezők vizsgálata etilén-diamin-tetrametilén-foszfonát (EDTMP) és ón(II)-klorid tartalmú liofilizátumok öregedését modellező rendszerekben Paál Margit, Antalffy Mária, Környei József

Multibone kit: liofilizátum EDTMP: 25 mg (57,3 μmol) EDTMP: 25 mg (57,3 μmol) Sn(II)-klorid: 1 mg ( 4,4 μmol) Sn(II)-klorid: 1 mg ( 4,4 μmol) Jelezhetőség: leképezésre: 99m Tc leképezésre: 99m Tc terápiára: 90 Y, 153 Sm, 177 Lu terápiára: 90 Y, 153 Sm, 177 Lu Cél: a lejárati idő kiterjesztése

I. Vizsgálati terv 1. Tárolásos stabilitásvizsgálat (nemzetközi ajánlások szerint) – „statikus öregedési modell” – szennyezők spontán kialakulása várható 2. Provokatív vizsgálat („dinamikus modell”) a gőzsterilezés által okozott hősokk hatásának vizsgálata, potenciális és / vagy látens folyamatok észlelhetővé tétele

II. Megfontolások a.) A jelzést követően várható radioaktív komponensek 1. Jelzett EDTMP (etilén-diamin-tetrametilén-foszfonát) [ 99m Tc(HO 3 P-CH 2 ) 2 N-CH 2 -CH 2 -N(CH 2 -PO 3 H) 2 ] 2. Sn(II) vagy Sn(IV) és EDTMP kölcsönhatása révén létrejövő, 99m Tc radionukliddal jelezhető szennyezők létrejövő, 99m Tc radionukliddal jelezhető szennyezők 3. Ligandumokkal kölcsönhatásba lépő 99m Tc-vegyületek: szabad pertechnetát és / vagy redukált – hidrolizált technécium

99m Tc (400 MBq) = nmol Sn(II)-tartalom = 4,4 μmol II. Megfontolások, folytatás b.) A hordozómentes jelzés megfontolása

II. Megfontolások, folytatás Rendszer Jellemző Whatman ET-31 papíron aceton eluens 10 perces kifejlesztési idő 10 perces kifejlesztési idő 99m TcO 4 - mindig a fronton, minden nem-lipofil a starton ITLC SG rétegen fiziológiás sóoldat eluens 10 perces kifejlesztési idő 10 perces kifejlesztési idő redukált – hidrolizált 99m Tc mindig a starton, minden nem-lipofil vegyület a fronton Kieselgel 60 rétegen EtOH : H 2 O 1:1 (v/v) eluens 2,5 órás kifejlesztési idő 2,5 órás kifejlesztési idő a különböző jelzett vegyületek különböző R f -értéknél jelentkeznek c.) Radioaktív komponensek elválasztása

III. Elvégzett vizsgálatok + Sn(II) in situ 0,44  mol, 1/10 Multibone kit egy ampullájának tartalma feloldva 2 ml fiziológiás sóoldatban, EDTMP / Sn(II) mólarány 12,9 : m TcO 4 - hőkezelés 121 o C perc frissen összemért EDTMP és Sn(II) oldat EDTMP / Sn(II) mólarány 12,9 : 1 és 1 : 1 hőkezelés 121 o C perc + 99m TcO 4 -

III. Elvégzett vizsgálatok, folytatás h ő kezelés után liofilizált EDTMP és Sn(IV) oldat EDTMP / Sn(IV) mólarány 1 : 1 frissen összemért EDTMP és Sn(IV) oldat EDTMP / Sn(IV) mólarány 12,9 : 1 és 1 : m TcO 4 - hőkezelés 121 o C perc + Sn(II) in situ 0,44  mol, 1/ m TcO Sn(II) in situ 0,44  mol, 1/10

III. Elvégzett vizsgálatok, folytatás Infravörös spektroszkópiás mérések az MTA KKKI Molekulaspektroszkópiai Osztályának közreműködésével a Multibone kitben { Sn(II)-EDTMP } az Sn(IV)-EDTMP liofilizátumban referencia: EDTMP önmagában, ón-ortofoszfát

IV. Vizsgálati eredmények Kieselgel 60 réteg – EtOH : H 2 O 1:1 (v/v) Whatman ET-31 papír – aceton – aceton cps cm szabad 99m TcO 4 - redukált - hidrolizált 99m Tc

IV. Vizsgálati eredmények, folytatás Kieselgel 60 réteg – EtOH : H 2 O 1:1 (v/v) Whatman ET-31 papír – aceton – aceton Multibone, {EDTMP/Sn(II) = 12,9 : 1} hőkezelt Multibone R f =0,67 R f =0,90 csak 99m TcO 4 -

IV. Vizsgálati eredmények, folytatás a liofilizátum gyártásától eltelt napok száma ón(II) tartalom, % az EDTMP liofilizátumban

IV. Vizsgálati eredmények, folytatás Kieselgel 60 réteg – EtOH : H 2 O 1:1 (v/v) Whatman ET-31 papír – aceton – aceton R f =0,67 nincs 99m TcO 4 - csak 99m TcO 4 - frissen összemért EDTMP / Sn(II) = 12,9 : 1, hőkezelés után frissen összemért EDTMP / Sn(II) = 12,9 : 1, azonnal felhasznált

IV. Vizsgálati eredmények, folytatás Kieselgel 60 réteg – EtOH : H 2 O 1:1 (v/v) Whatman ET-31 papír – aceton – aceton frissen összemért EDTMP / Sn(II) = 1 : 1, hőkezelés után R f =0,90 kevés 99m TcO 4 - nincs 99m TcO 4 - in situ Sn(II) adagolással

IV. Vizsgálati eredmények, folytatás Kieselgel 60 réteg – EtOH : H 2 O 1:1 (v/v) Whatman ET-31 papír – aceton – aceton frissen összemért EDTMP / Sn(IV) = 1 : 1, hőkezelés után hőkezelés után liofilizált EDTMP / Sn(IV) = 1 : 1, kevés 99m TcO 4 - nincs 99m TcO 4 - R f =0,67 R f =0,90 R f =0,15 R f =0,04 R f =0,90 R f =0,15 R f =0,04 nincs R f =0,67 in situ Sn(II) adagolással

IV. Vizsgálati eredmények, folytatás EDTMP Sn(II)-EDTMP Sn(IV)-EDTMP 1640 cm -1 Infravörös spektrumok Sn - O - P - C rezgések Sn (II) ill. Sn (IV) eltérő koordinációjának megfelelően: 1652 cm -1

V. Vizsgálati eredmények értékelése Frissen összemért Sn(II)-klorid és (EDTMP) Kieselgel 60 réteg – EtOH : H 2 O 1:1 (v/v) R f értékek R f =0,67 (>99%) Sn(II)-klorid és (EDTMP) liofilizátum (Multibone) R f =0,67 (80±5%) R f =0,90 (20±5%) Csak a liofilizátumról felvett IR-spektrumon észlelhető az 1652 cm -1 csúcs, ami az Sn - O - P - C kötésekre utal A Multibone kitben az ón(II) és a ligandum között a liofilizálás során legalább részlegesen olyan kölcsönhatás megy végbe, ami e komponensek frissen összemért oldatában nem lép fel. Valószínűsíthető, hogy a liofilizátumból a jelzés során kétféle komplex alakul ki: [ 99m Tc-EDTMP] és [ 99m Tc-(Sn-EDTMP) n ]

V. Vizsgálati eredmények értékelése, folytatás Hőkezelés hatására az oldatokban az Sn(II) elveszíti redukáló-képességét, ha az EDTMP ligandum feleslegben van jelen. Ugyanakkor ez a jelenség nem figyelhető meg EDTMP - Sn(II) 1 : 1 mólarány esetén. Amennyiben az EDTMP nincs feleslegben, az oligomer-képződés mellett marad szabad ón(II) a 99m TcO 4 - redukciójához. A kapott jelzett vegyület: [ 99m Tc-(Sn-EDTMP) n ] (R f = 0,9) A hőkezelés során tehát az Sn(II) Sn(IV) oxidáció legfeljebb részlegesen megy végbe, ugyanakkor valószínű, hogy az Sn-EDTMP kölcsönhatás (oligomer-képződés) teljes mértékben végbemegy.

IV. Vizsgálati eredmények értékelése, folytatás Az ón(IV)-klorid és az EDTMP hőkezeléskor és liofilizálásakor olyan rendszer képződik, amelyet feloldva és in situ ón(II) - adagolás mellett technéciummal jelezve, a jelzett vegyületek nagyobb hányada R f =0,04 és R f =0,15 csúcsokkal jellemezhető. Az R f = 0,04 csúcs redukált-hidrolizált 99m Tc jelenlétére is utalhat, azonban az R f = 0,15 csúcs megjelenése ezzel nem magyarázható. Az Sn(IV)-klorid és EDTMP hőkezelése és liofilizálása nagyobb molekulatömegű jelzett vegyületek kialakulásához vezet: [ 99m Tc-(Sn-EDTMP) x ] R f = 0,04 (?), R f = 0,15 ; x >> n [ 99m Tc-(Sn-EDTMP) n ] R f = 0,90

VI. Következtetések 1. A Multibone kit lejárati idejének kiterjesztésénél feltétlenül elő kell írni kiterjesztésénél feltétlenül elő kell írni hűtve tárolás és szállítás követelményét; hűtve tárolás és szállítás követelményét; 2. További vizsgálatok szükségesek annak eldöntésére, hogy a hordozómentes jelzés során tapasztalt jelenségek hogyan mutatkoznak meg háromértékű, nem hordozómentes fémekkel történő jelzés esetében. mindenfajta hőhatást kerülni kell.

VII. Köszönetnyilvánítás Ezúton is szeretném köszönetemet kifejezni a Magyar Tudományos Akadémia KKKI Molekulaspektroszkópiai Osztályának az infravörös spektroszkópiás vizsgálatok elvégzéséért. Külön köszönet illeti Németh Csabát, a MTA KKKI tudományos munkatársát, aki a spektrumok értékelését, értelmezését végezte. Köszönöm figyelmüket!