A.)Termékképzéshez egyszerre több különböző szubsztrát kell, hexokináz glükóz + (Mg)ATPGlükóz-6-foszfát + (Mg)ADP foszforilezés két termék B.) A másik esetben a reakció keverékben egy enzim és több különböző, lényegében alternatív szubsztrát. példák: a legtöbb biopolimer hidrolizáló enzim amiláz, amilo-glikozidázok, cellulázok proteinázok. Függetlenül attól, hogy ezekben az esetekben exo- vagy endo- enzimekről van-e szó, a reakció-keverékben egyidejűleg több, különböző polimerizációs fokú szubsztrát van (lesz) jelen. 5. TÖBBSZUBSZTRÁTOS REAKCIÓK BIM BSc 2007 Két tipus

Random bi-bi reakciók Határozott sorrendű bi-bi reakciók Ping-pong mechanizmus 5. TÖBBSZUBSZTRÁTOS REAKCIÓK A1 véletlenszerű, mind S mind P oldalról BIMOLEKULÁS sebesség meghatározó lépés Random bi-bi reakciók

5. TÖBBSZUBSZTRÁTOS REAKCIÓK A2 E mechanizmus és a nemkompetitív vagy a lineáris kevert típusú inhibíció között az a különbség, hogy itt a ternér EAB komplex katalitikusan aktív, azaz belőle termékek képződnek ( míg az ESI komplex inaktív).

5. TÖBBSZUBSZTRÁTOS REAKCIÓK A3 Határozott sorrendű bi-bi reakciók k 3 a legkisebb, EAB EPQ a sebesség meghatározó rapid ekvilibrium

5. TÖBBSZUBSZTRÁTOS REAKCIÓK A4 Ping-pong mechanizmus St-st levezetéssel: E F EP EA FB EQ AQ P B Mg(ADP) glükóz Mg(ATP) glükóz-6P HEXOKINÁZ FOSZFORILÁLT HEXOKINÁZ

5. TÖBBSZUBSZTRÁTOS REAKCIÓK A5 Lineweaver-Burk ábrázolás: Az egyenlet szimmetrikus, A és B felcserélhetõk). Ping-pong mechanizmus Rögzített B mellett A hatása DE!!! Hexokináz : nem kapunk ilyen ábrát. = nem ping-pong mechanizmusú a foszforiláció

5. TÖBBSZUBSZTRÁTOS REAKCIÓK A6 A valódi görbesereg ezen az ábrán láthatóhoz hasonlít, Ping-pong mechanizmus Nem elég a mechanizmus tisztázásához: mind az 1) mind a 2) modell ugyanolyan L-B görbesereget mutat. A hexokináz reakció valódi mechanizmusának kiderítéséhez egy sor egyéb kinetikai vizsgálatot is el kell végezni

többszubsztrátosunkompetitiv emészteni való!!!!

5. TÖBBSZUBSZTRÁTOS REAKCIÓK B Sok enzim képes egynél többféle szubsztrátnak az átalakítására is. Ilyen esetekben a különféle alternatív szubsztrátok versengenek egymással az enzim aktív helyé(i)ért. Hidrolitikus depolimeráz enzimek: sok azonos kötésre hatnak, pl. lizozim: komplex muko-poliszaharidokat, a sejtfal mureinjét bontja ( Gram+ baktériumokat elpusztítja). Az ilyen polimerekben a monomereket összekapcsoló kondenzációs kötések úgy viselkednek, mint egy-egy különálló szubsztrát. Az ilyen polimerek abban az értelemben sem tekinthetőek közönséges egyszerű szubsztrátoknak, hogy általában már eleve különböző lánchosszúságú polimerek keverékei. A hidrolitikus enzimek némelyike szelektivitást mutat aszerint, hogy a polimer mely részét bontja: exo-hidrolázok - láncvégi vagy közel láncvégi kötések endo-hidrolázok - láncon belüli kötések statisztikusan celluláz komplex, pektinázok, amilázok

5. TÖBBSZUBSZTRÁTOS REAKCIÓK B1 MODELL: L. KOMP. INH.-nál K app ≠0 eset! Külön- külön Együttes eredő, ha mindkét S i -ből ua termék lesz β-amiláz→maltóz, glükoamiláz→glükóz Ha csak az egyik S van jelen

END VÉGE AZ 5. FEJEZETNEK