Serum kreatinin meghatározás problémái Dr. V. Oláh Anna1 Dr. Fodor Bertalan2 tudományos főmunkatárs laboratórium vezető, főiskolai docens 1DEOEC Klinikai Biokémiai és Molekuláris Pathológiai Intézet Kémia Részleg, Debrecen 2FMC Diagnosztikai Laboratórium, Miskolc

Kreatinin Izomanyagcsere végterméke, kiválasztása a vizeletben. Egészségesekben: glomerulus filtrálja, reabsorbciója, tubuláris kiválasztása kicsi <10% Glomerulus károsodás: Scr a tubulusokból is eliminálódik. Kb. 50% glomerulusszám csökkenéstől emelkedik, belek is kiválasztják, Scr nem nő

Szérum kreatinin meghatározása Régebbi Jaffé módszerek: „klasszikus” Fehérjementesítés v. anélkül Oxidáció, extrakció, savas vak Végpontos Újabb Jaffé módszerek: Kinetikus:20-s 60s reading time automatizálható, gyors, olcsó, pszeudokreatinin interferencia Kinetikus kompenzált: fehérje, glk, C-vit, ketonok, cefalosporin miatt újrakalibrálták: -18, -26uM Jaffe No accent on ‘e’! 1886 Cheap 1p/test By M. Jaffe (Submitted to the editor on 26th June 1886)

Egyéb kreatinin meghatározások Enzimatikus módszerek: kreatinin hidrolízise, majd 3-4 enzimreakció (CK, pyruvát-kináz, LDH) Korábban a végpontos hosszadalmas volt Új kinetikus gyorsabb:érzékenysége↓, precizitása ↓ Kevesebb interferencia → alacsonyabb kreatininek Jobb korreláció az ID-MS-el, de kissé lefelé torzít Drága, deficites: már emiatt sem válhat elterjedtté HPLC: pontos standard módszer, de nem válhat rutinná ID-MS:isotope diluted mass spectrometry„gold standard”

Kreatinin mérési módszerek Magyarországon 2005

WEQAS Creatinine Scheme Total No. Participants: 390

CAP Study (2003) College of American Pathologists (2003) Fresh pooled serum, frozen immediately and specimen sent to all participants – ID-GCMS targeted (79.7µmol/L) Thirty of 50 peer groups had significant bias

A kinetikus Jaffe-módszer változott: Detektálási határ más pl. kompenzált kin. Jaffé: kiadott eredmény alsó határa:<18umol/L Torzítás: Jaffé kreatinin norm. tartományban felfelé, 200 uM-tól lefelé torzított, ez javult az új módszereknél -Enzimatikus: norm. tart. lefelé torzít Linearitás felső határa nőtt: szérum hígítás nem szükséges Régebbi manuális módszerek:~200uM Mai automaták lin. felső h: 1300-2210uM Egyéb interferenciák: Bi>170 uM-tól torzít↓, hemolízis ↑, lipémia torzít Készüléktől függő LIH-indexet mérjük

Szérum kreatinin diagnosztikai értéke: 2006. évi OEP statisztika.: ~6 M ambuláns kreatinin 1. Kreatint máj, vese, pancreas termeli, Izom: kreatin-foszfát→ kreatinin képződés, cc.~ állandó 2. Nem, kor, rassz (izomtömeg), folyadékfelvétel, diétafüggő (gulyás effektus ± 10%) 3. Egyénen belüli ingadozás biológiai CVi :4,3% 4. Klin. kémia „fenegyereke” volt- mai automatákon: havi rutin hiba (CV) csak ~4%

5. Elfogadott torzítás gyári kontrollhoz: ± 3%, külső QC: 6% 6. Diagnosztikai bizonytalanság: ~11% U=1,96x(analCV2+Biol CVi 2)1/2 Biológiailag nem szignif. különbség 100uM Scr :95-105 Bár a meghatározás precizitása nőtt, a kreatinin önmagában nem elég érzékeny marker: 50 % GFR alatt nő. Vesebetegség diagn-hoz: Scr mellett elsőként GFR kell!

+10,6 µmol/l hiba -12 % hiba a GFR számításban Bias hatása az eGFR-re Creatinine Measurement NKDEP Manufacturers’ Forum, 2005 Greg Miller, Virginia Miller, Commenwealth University, , Richmond, VA +10,6 µmol/l hiba -12 % hiba a GFR számításban 8-30 umol/l

Calibration and population estimates NHANES - White Sands, Kinetic Jaffe, Hitachi 737 (20 umol/L>CCF) MDRD – Cleveland Clinic Foundation, Kinetic Jaffe, Beckman Astra CX3 NHANES -20 umol/L Stage 3 3.2% Stage 3 12.5% Data above for non-diabetic adults only – explains why overall prevalence data slightly different from that cited in nHANES (Clase et al JASN 2002)

Bland-Altman: 4v-MDRD

A GFR érzékeny a kreatinin módszerre 1.Új kreatininnel a régi formulák durván fölébecsülnek! Enzimatikus és c-Jaffé-val várható GFR:+30% (2005.EJ Lamb, ACB,42:11) 3.Súlyos következmény: téves CKD stádium, álnegatív esetek!

Milyen módszer? végpontos Jaffé fehérjementesítés nélkül nem kompenzált kinetikus Milyen gyártó? Milyen műszer? Milyen kalibrátor? 4-v MDRD: 186 x [serum creatinine x 0.0113]-1.154 x kor-0.203 x (0.742 nő)x(1.21 fekete) Milyen módszer? kompenzált kinetikus „rate-blanked” kin. Jaffé Enzimatikus Milyen gyártó? Milyen műszer? Milyen kalibrátor? IDMS-re visszavezethető 4-v MDRD-175: 175 x [serum creatinine x 0.0113]-1.154 x kor-0.203 x (0.742 nő) x (1.212 fekete)

”Take home message” Pontatlan az eGFR: gyermekek, terhesek, ödéma, extrém kis/nagy BMI, amputáció, 70 évtől: CCLR Ismerni: a kreatinin módszer visszavezethetőségét, használható-e a kreatinin a régi GFR formulában? Az új IDMS kreatininekre csak az új 175-MDRD-t ! Csökkenteni az inter/intralaboratory kreat. CV%-t Standardizált SCr konverziók: www.ukneqas.org.uk

Alternatív markerek:  1. Cys C: megbízható endogén GFR marker izomvesztés, májcirr. esetén is - Vesefunkció romlását korán jelzi: vese Tx - Több GFR képlet validálásához alap: Cys C   - De függ: glk-corticosteroid cc, pajzsm. funkc.   2. β-trace-protein BTP: szérumból, a CysC-hoz hasonló, de steroid-független (prednison) : gyerekek, DM, vese TX követésére is ajánlott