Különböző spéci mikroszkópok és festési eljárások

Slides:



Advertisements
Hasonló előadás
Az élelmiszerek mikrovilága
Advertisements

A SZIVÁRVÁNY.
OXIDOK TESZT.
Tallósy Szabolcs Péter, Dr. Janovák László, Prof. Dr
Elektron hullámtermészete
2010. augusztus 16.Hungarian Teacher Program, CERN1 Gyorsítók Veszprémi Viktor ATOMKI, Debrecen Supported by OTKA MB
Mikrobiológia labor Segédanyag a közös mikroszkópos gyakorlatokhoz
A NÉGY FŐELEM Tűz,víz,levegő és föld.
Metszeti ábrázolás.
Protective Paint Car Chemicals Variodur aqua - MultFinish Mixable Coating (keverhető bevonóanyag) Professzionális színesfestési javításokra. Védőanyag,
1. Anyagvizsgálat Feladat Tervezés számára információt nyújtani.
Szabad aminosavak termelésének kimutatása a talajmikroorganizmusok tenyészetében.
Egy pontból széttartó sugarakat újra összegyűjteni egy pontba
Film fénytöréshez Lencsék Film fénytöréshez
MIKROSZKÓPOS VIZSGÁLATOK
KOLLOID OLDATOK.
Pásztázó elektrokémiai mikroszkópia az elektrokémia alkalmazásának új területe.
TRANSZMISSZIÓS ELEKTRONMIKROSZKÓP (TEM)
MOLNÁR LÁSZLÓ MILÁN adjunktus február 9.
ANYAGTUDOMÁNYI VIZSGÁLATI MÓDSZEREK AZ ELEKTRONIKAI HIBAANALITIKÁBAN
Transzmissziós elektronmikroszkóp
Szerkezeti színek a természetben
Színes világban élünk.
Nukleusz A sejt információs rendszere
Képalkotó eljárások A lumineszcencia néhány alklamazásáról.
FLUORESZCENS IN SITU HIBRIDIZÁCIÓ
Egy folyékony mintában valamilyen baktérium koncentrációját szélesztést követően agarlemezes telepszámlálással határozzuk meg. Tízes alapú hígítási sort.
Dr. Nagy Géza Csóka Balázs PTE TTK Általános és Fizikai Kémia Tanszék
A Raman spektroszkópia alkalmazása fémipari kutatásokban
Képalkotó eljárások Spektroszkópiai alkalmazások.
Gyors mikrobiológiai módszerek
Veszprémi Viktor ATOMKI, Debrecen Supported by OTKA MB
Veszprémi Viktor Wigner Fizikai Kutatóközpont OTKA NK81447
Citromsav, Nátrium-acetát és szőlőcukor azonosítása
Penészgomba vizsgálat levéltári iratátvételek során
Készítette: Páncsics Nikolett Témavezetők: dr. Gergely Gréta Lukács István Endre Nagy Áron.
Ellipszométeres mérések Fehérjék és aminosavak leválasztása és optikai modell készítése Kovács Kinga Dóra ELTE Apáczai Csere János Gyakorlógimnázium és.
NAGYFELBONTÁSÚ ELEKTRONMIKROSZKÓPIA és a JEMS SZIMULÁCIÓS PROGRAM
Különböző spéci mikroszkópok és festési eljárások
A feloldóképesség határa És ami a határon túl van Csik Gabriella Semmelweis Egyetem, Biofizikai Intézet.
A polarizációs mikroszkópia
Ásványok, kőzetek vizsgálati módszerei
In vivo analízis és MRS (spectroscopy) MRI (imaging) Metabolit-koncentrációk „real time” monitorozása in vivo. Tumor, stroke, sclerosis multiplex, Alzheimer,
Megalehetőségek a nanovilágban
Kutatóegyetemi stratégia - NNA FELÜLETI NANOSTRUKTÚRÁK Dr. Harsányi Gábor Tanszékvezető egyetemi tanár Budapest november 17. Nanofizika, nanotechnológia.
Ablak a mikrovilágba.
Anyagtudományi vizsgálati módszerek
Az élővilág legkisebb egységei
OPTIKAI LENCSÉK 40. Leképezés domború tükörrel és szórólencsével.
Elektronmikroszkópia
OPTIKAI TÜKRÖK ÉS LENCSÉK
Fotokémia és Fényképezés
A FONTOSABB MÓDSZEREK:
Összeállította: Csizmazia Ferencné dr. főiskolai docens
Fajtajelleg vizsgálat eredményei
BIOLÓGIA TÁRGYA, RÉSZTUDOMÁNYAI, SZERVEZŐDÉSI SZINTEK
FARMAKOBOTANIKA I. FÉLÉV / 1. GYAKORLAT. MIKROSZKÓPOS TECHNIKÁK, PREPARÁTUM KÉSZÍTÉS.
Tekintse át Irodalom Keverési kalorimetria DSC Számítások Kvantifikáljon Makro-DTA ARC Specializált kalorimetria Méretezze VSP (szellőző méretezési csomag)
Savak és lúgok. Hogyan ismerhetők fel? Indikátorral (A kémhatást színváltozással jelző anyagok)  Univerzál indikátor  Lakmusz  Fenolftalein  Vöröskáposzta.
Molekuláris biológiai módszerek
Nanotechnológiai kísérletek
BAKTÉRIUMOK.
22. lecke A szénhidrátok.
Pt vékonyrétegek nanomintázása
Fotonikus kristályok előállítása és vizsgálata
Közönséges (a) és lineárisan poláros (b) fény (Niggli P. után)
Spektroszkópiai alkalmazások
Összeállította: J. Balázs Katalin
Mikroszkópos biológiai problémák kezelése és alkalmazása a vízbiztonsági tervekben május 09. Előadó: Fazekas Zoltán Technológiai osztályvezető.
Mikroszkópia.
Előadás másolata:

Különböző spéci mikroszkópok és festési eljárások Mikroszkópia Különböző spéci mikroszkópok és festési eljárások Készítette: Rajnai Tamás

Mikroszkópia története mikron = kicsi szkopein = nézni Mikroszkópia: szemmel láthatatlan tárgyak mikroszkópos vizsgálata Első mikroszkóp: ~ 1600: Hans Lippershey, Hans Janssen, Zacharias Janssen

Mikroszkópok fajtái: Optikai elméletet használó: Mintán áthaladó/visszaverődő sugarakat egy optikai rendszer felnagyítja Binokuláris/szimpla Fajtái: összetett fénymikroszkópok (max kb. 1500X, elméleti felbontóképesség 0,2 mikrométer ), szetereomikroszkópok, Elektronmikroszkópok (vákuum kell)

Sztereomikroszkóp Elektronmikroszkóp

Mikroszkópok fajtái Speciális fénymikroszkópok: Ultraibolya-mikroszkóp Ultramikroszkóp Fáziskontraszt-mikroszkóp Lumineszcencia-mikroszkóp Konfokális pásztázó mikroszkóp Polarizációs mikroszkóp Binokuláris mikroszkóp Sztereomikroszkóp

Mikroszkópok fajtái Elektronmikroszkópok: Pásztázó elektronmikroszkóp Transzmissziós elektronmikroszkóp

Elektronmikroszkóp

Mikroszkópok fajtái: Pásztázószondás mikroszkópok mikroszkopikus sugárszondát használnak a felület feltérképezésére : szondasugár + detektor: kölcsönhatás alapján: Atomerő mikroszkóp Elektrosztatikus mikroszkóp Mágneses erőmikroszkóp Alagútelektron-mikroszkóp Közeli mező optikai mikroszkópia Pásztázó elektronmikroszkóp Egyéb: akusztikus mikroszkóp: Hanghullámmal, minta hangvezetését méri

Fénymikroszkópia Látható fény segítségével Optikai lencse használatával Felfogó: szem, fotolemez, digitális képalkotó eszköz Korlátok: sötét vagy erős fényvisszaverésű vizsgálandó felület kell Diffrakció miatt: max felontóképesség 0,2 mikrométer Fókuszsíkól kieső pontok csökkentik a kép tisztaságát

Egy eljárás menetének bemutatása mikroorganizmusokra: 1. Tárgylemez tisztítása: zsírtalanítás 96%-os alkohollal, majd hőkezelés (max 60-70 °C-on) 2. Preparátum rögzítése (sejtek megtapadása a tárgylemezen) Sok rögzítési eljárás ismeretes; egyik legegyszerűbb: hővel való rögzítés Megjegyzés: finom ultracellulális részletek vizsgálatakor nem alkalmazható, mert a sejt ezen részében durva változásokat okoz a hő 3. Festés: egyszerű vagy összetett festési eljárással Pozitív vagy negatív festés Egyszerű: Polikróm festés, mikroanalitikai festések és indikáló festések Összetet: Differenciáló festések

Festési eljárások Láthatóbbá tehetőek velük a minták Fluoreszcens festékek: Immunfestés Zöld fluoreszcens fehérje pH alapján (mikroorganizmusok festéséhez): Bázikus színezőanyagok (metilénkék, fukszin, malahitzöld, kristályibolya, neutrálvörös) Savas színezőanyagok (eozin) Semleges színezőanyagok (rhodamin B)

Gram-pozitív baktérium: Gram-negatív baktérium:

Konkrét alkalmazás: mikroorganizmusok kimutatása: Bacillus cereus és Pseudomonas fluorescens A megfelelően előkészített tárgylemezre 1 csepp vizet cseppentünk Ebben szuszpendálunk 1-1 kacsnyit az előre kitenyésztett baktériumtenyészetekből (Bacillus cereus és Pseudomonas fluorescens) Alapos elkeverés, és a tárgylemezen minél vékonyabb rétegben történő szélesztés után a készítményt láng felett rögzítjük. Kihűlés után a festést az alábbi séma szerint végezzük: Festés genciánibolya-oldattal 1 percen át Vizes öblítés Pácolás Lugol-oldattal 1 percen át Színtelenítés 96 %-os alkohollal 0,5 percen át Kontrasztfestés szafraninnal 1 percen át Vizes öblítés, szárítás

A készítményt immerziós objektívvel vizsgáljuk. Benne a Bacillus cereus baktériumok kék színű (Gram-pozitív), a Pseudomonas fluorescens sejtek pedig piros színű (Gram-negatív) pálcikaként mutatkoznak. A preparátum értékelésekor tekintettel kell lenni arra a tényre,hogy a festés eredménye függ a tenyészet korától is. Gram-pozitív baktériumok idősebb tenyészete néha Gram-negatív jelleget mutathat. Bacillus cereus Pseudomonas fluorescens

Források: Írott források: Bruno P. Kremer – A mikroszkóp használata, Geobook Hungary Kiadó, 2008. Öveges József- A mikroszkóp és használata http://www.hefop.u_szeged.hu/hefop_kk/documents/Tananyag/EKF/Okologiai_es_kornyezetelemzesi_komplex_terepgyak.pdf http://hu.wikipedia.org/wiki/Mikroszk%C3%B3pia http://www.taki.iif.hu/hungarian/soilbio/halbrittera/mikro.html picasso.elte.hu/microscopy/pozsgai2005.ppt

Források: Képek: archive.microbelibrary.org textbookofbacteriology.net makszutov.hu auroscience.hu alphaoptika.hu mikroszkop.network.hu elektro-optika.hu mokkka.hu sirbuday.hu