Spektroszkópiai alkalmazások Képalkotó eljárások Spektroszkópiai alkalmazások
Mikroszkópok hagyományos optikai mikroszkóp konfokális mikroszkóp fluoreszcencia-élettartam mérése Endoszkópok, távcsövek Fotoelektron-sokszorozó – sokcsatornás síkdetektor (photomultiplier) (microchannelplate detector) kapuzható képerősítő (gated image intesifier) Streak camera
szekréciós mirigy az epidermisz felszínén Bazsalikom levél, szekréciós mirigy az epidermisz felszínén (a kék-zöld fluoreszcencia a sejtfal anyagok pl., ferulasav, viaszok, illetve a flavonoidok fluoreszcenciaja) lexc= 351 nm lemi= 385-470 nm kék 515-550 nm zöld > 650 nm vörös 100 m
Fluoreszcencia réteg felvételek cirok levélen B D C A A B D C 32 mm A Sorghum levél felszine: lexc= 351 nm lemi= 385-470 nm kék 515-550 nm zöld > 650 nm vörös 100 mm A B D C Fluoreszcencia réteg felvételek cirok levélen A felszínen a sejtfal alkotók kék-zöld fluoreszcenciája dominál, beljebb a fotoszintetizáló sejtek klorofilljáé.
DanePy infiltrált spenót levél, a felszíntől 15 m mélységben (mezofill sejtek) l em > 650 nm 505 nm < l em <550 nm l exc = 351, 364nm, Ar laser
Összetett kép (zöld + vörös fluoreszcencia) és intenzitás eloszlás a jelzett egyenes mentén
DanePy infiltrált spenót levél, fotoinhibíciós kezelés 45 min után: a levél fotoszintetikus aktivitásának kb. 2/3-a elvész, ha proteináz inhibitor jelenlében végezzük el a kísérletet, akkor kb 15% D1 protein károsodás detektálható jelentős pigment bleach (total pigment) és lipid peroxidáció még nincs 0’ 15’ 30’ 45’ l exc = 351, 364nm l em > 650 nm 505 nm < l em <550 nm
A több-fotonos gerjesztés alapelve
Fluorescence lifetime imaging
Hőmérséklet-mérés foszforeszcencia- élettartam alapján
Fotoelektronsokszorozók
Fotoelektronsokszorozó működési elve
Microchannel plate detector működési elve
Kapuzható képerősítő működési elve
Példa a kapuzott képerősítő használatára
Streak camera működési elve
Streak camera használata fotokróm spirobenzopirán vizsgálatában
Egy felvétel