Márk Ágnes, Barna Gábor, Csomor Judit, Kriston Csilla, Matolcsy András KÜLÖNBÖZŐ PROGNOSZTIKUS MARKEREK ÁRAMLÁSCITOMETRIAI VIZSGÁLATA MYELOMA MULTIPLEXBEN Márk Ágnes, Barna Gábor, Csomor Judit, Kriston Csilla, Matolcsy András Semmelweis Egyetem, I. Sz. Patológiai és Kísérleti Rákkutató Intézet, Budapest

Plazmasejtes myeloma (myeloma multiplex) Klinikai kép: Csontvelői működés elégtelensége Fertőzésre való fogékonyság Csontfájdalom Patológiás csonttörések Hypercalcaemia veseelégtelenség Kenneth H. Shain and William S. Dalton 201210.1007/978-94-007-5028-9_4© Springer

Célkitűzés Olyan sejtfelszíni markerek (CD27, CD28, CD81, CD20, CD19) vizsgálata, amelyek előrejelezhetik a betegség prognózisát és a betegek kezelésre adott válaszát. A plazmasejtek proliferációját és keringésbe kerülését befolyásoló β1 integrin molekula (CD29) aktivitásának vizsgálata

CD27 CD28 CD29 TNF receptorcsalád tagja British Journal of Haematology Volume 132, Issue 2, pages 168-170, 8 NOV 2005 CD27 CD28 CD29 TNF receptorcsalád tagja Memória B-sejtek plazmasejtekké differenciálódásához CD27-CD70 interakció kell Génexpresszió (c-Jun és NFƘB) Apoptózis indukció (Siva) Fiziológiás funkció: infekció esetén plazmasejtek ellenanyag termelésének fokozása. Integrinmolekula (beta1) Fiziológiás szerep: plazmasejtek csontvelőben tartása (adhézió) Proliferáció, túlélés, sejtadhézió mediált gyógyszerrezisztencia. Myeloma sejtek elveszítik a betegség előrehaladtával a CD27 molekulát Overall survival csökken CD29 aktív formáját mutatták ki az MM esetek többségében (Luque et al.) Myeloma sejtek felszínén magas CD28 expresszió detektálható PI3K/AKT szignál aktiválása túlélési szignálok FoxO3a transzkripciós faktor inaktiválása proapoptotikus fehérjék (pl.: Bim) expressziójának csökkentése

Anyag és módszer Csontvelői aspirátumok Áramlási citometriai panelek: CD38-FITC, CD29 (HUTS21)-PE, CD27-ECD, CD28-PC7, CD29 (MAR4)-APC CD81-FITC, CD138-PE, CD38-ECD, CD19-PC5.5, CD45-PC7, CD56-APC, CD20-AF750 Mérés: Két lézeres Navios áramlási citométer (Beckman Coulter) Analízis: Kaluza szoftver 22 myelomás és 2 egészséges esetben végeztük el a markerek vizsgálatát

Anyag és módszer Genetikai változások vizsgálata >15-20% myelomás sejt FISH vizsgálat 13/22 4 esetben 1q21 ampl 3 esetben t(11;14) 1 esetben t(4;14) FISH-próbák: FGFR3/IGH DC t(4;14) t(11;14), t(14;16) CEP17/LSI p53 p53 deléció 1q21/1p36 1q21 amplifikáció

Eredmények Pozitív esetek 68% CD27 36% CD28 Aktív CD29 24% Ezeket az expressziós adatokat összevetettük a rutin diagnosztikus panelben vizsgált fehérjék (CD19, CD20, CD81) expressziójával

CD27 expresszió t(11;14) 1q21 ampl. 1q21 ampl. t(11;14) 1q21 ampl

CD28 expresszió A CD28 és CD20 expresszió összefüggést mutatott 1q21 ampl. 1q21 ampl. t(4;14) t(11;14) CD28 CD20 A CD28 és CD20 expresszió összefüggést mutatott

24% Aktív CD29 t(11;14) t(4;14) t(11;14) össz. CD29 expresszió

Összefoglalás CD27 CD28 CD29 CD27 CD28 CD29 A vizsgált esetek 32%-ában vesztették el a myelomás sejtek a CD27 expressziót, 36% mutatott CD28 expressziót és a CD29 aktív formáját a betegek 24%-ában detektáltuk. CD81 és CD19 expressziót a normál plazmasejteken detektáltunk, myelomás sejteken nem jelentek meg. A CD28 expresszió és a CD20 expresszió összefüggést mutatott, ezekben a betegekben a csontvelői infiltráció nagymértékű volt. A myeloma sejtek genetikai változásai és a fehérjeexpresszió között eddig nem találtunk szignifikáns összefüggéseket További terveink az esetszám emelése és a betegség követése, a klinikai és fehérje expressziós adatok összehasonlítása. 32% 36% 24%

Köszönöm a figyelmet!