Előadást letölteni
Az előadás letöltése folymat van. Kérjük, várjon
KiadtaHenrik Kovács Megváltozta több, mint 10 éve
1
Szántay Csaba ?! SOTE, 2006 május 10
2
POTENCIÁLIS ÜZENETEK NMR mint szerkezet- kutatási eszköz a kutató gyógyszeripari K+F+QC MS
3
Ez még nem definiálja a szerkezetet! CH 3 CH 2 OOC C 22 H 26 N 2 O 2 konstitúció
4
4 különböző sztereoizomer (azonos mólsúly, különböző térszerkezet) = 4 különböző molekula! (biológiai hatás, szintézis, stb…)
5
Pl. metabolit szerkezetfelderítés (ID) Pl. MS alapján + 16 OH azonos mólsúlyú regioizomerek ? CH 3 CH 2 OOC
6
Pl. metabolit ID Pl. + 16 OH Nem elég bebizonyítani, hogy pl. ITT van az OH… !
7
? A térhelyzetet is tudni kell (konfiguráció) !
8
Egy szerkezet ismerete = konstitúció megállapítása, regio- és sztereoizomerek megkülönböztetése + azonosítása, a mért spektrális jellemzőkkel konzisztens egyéb szerkezetek MEGFONTOLÁSA, ezek tudatos KIZÁRÁSA !
9
NMR komplementer információ MS elemi összetétel konfiguráció konformáció dinamika MÓLSÚLY (HRMS, LRMS)↓ összegképlet… + fragmentáció konstitúció (regioizomerek)
10
NMR MS konstitúció (regioizomerek) konfiguráció konformáció dinamika valójában: non-invazív mérési módszerek sokasága (több ezer, nagyon különböző időigénnyel!)
11
THE NMR MAGNET Probe AZ NMR MÁGNES
12
H RF pulzus
13
több pulzus egymás után különböző irány, erősség, hosszúság, frekvencia pulzus szekvenciák:
14
Mindennek mi értelme??? A szomszédok “látják” egymást! Többdimenziós spektrumok is készíthetők: a kötéseken és téren át ható atomi kapcsolatok mérhetők és jellemzőek a (tér)szerkezetre!
15
1H1H 19 F 31 P 13 C 15 N
16
HOMONUCLEAR 2D COSY (COrrelation SpectroscopY) HAHA HBHB HAHA HBHB Kötéseken keresztüli kapcsolatok: H A és H B csatolnak 3 J(H A, H B )
17
HETERONUCLEAR 2D 1 H- 13 C HSQC (Heteronuclear Single Quantum Correlation) HAHA H Bx HAHA H By Kötéseken keresztüli kapcsolatok: H A - C A és H Bx, H By – C B skalárisan csatolt magok. 1 J(H A, C A ) – közvetlen csatolás H Bx H By CACA CBCB CACA CBCB
18
HETERONUCLEAR 2D 1 H- 13 C HMBC (Heteronuclear Multiple Bond Correlation) HBHB HCHC HCHC HBHB Kötéseken keresztüli kapcsolatok: H B, H C, H D és C A egymástól három kötésnyi távolságra. 3 J(H B, C A ) – távolható HDHD HDHD CACA CACA
19
HOMONUCLEAR 2D NOESY (Nuclear Overhauser Effect SpectroscopY) HAHA HBHB HCHC HDHD HAHA HBHB HCHC HDHD Téren keresztüli kapcsolatok: H A, H B, H C, H D csatolnak NOESY intenzitás ~ r -6
20
f(t) F( ) FT
21
H
22
H
23
A szerkezetmeghatározás IDEÁLIS esete (SOK és TISZTA mintánk van) ?
24
Példák a szerkezet megfejtésének illusztrálására 1 H-NMR RGH-10885 13 C spektrum 1 H spektrum NMR:
26
A spektrumok együttes értelmezésével egyértelműen eldönthető, hogy “ki kicsoda”! Asszignáció
27
A különböző NMR mérések segítségével egyértelműen (de nem könnyen!) megfejthető a szerkezet!!!
28
NMR+…NMR+… lélektanlélektan
29
Az NMR-es szerkezetbizonyításnak különböző szintjei vannak!
30
t A „konzisztencia” teljesülése: A szerkezetvizsgálat adott mélységéig az NMR adatok elfogadható mértékben egybevágnak az elképzelt szerkezettel!
31
A konzisztencia teljesülése nem FELTÉTLENÜL jelenti azt, hogy MEGFEJTETTED a szerkezetet!
32
Pl.(!): H H-H-NOE 1D TOCSY COSY HSQC HMBC C H-N-HMBC C-H-NOE N ADEQUATE INADEQUATE S/N igény Az NMR szűrő Z 1 Z 2 Z 3 Z 4 Z 5 Z 6 Z 7 Z7 Z7 “PROTONISZTIKUS” NMR (jó ha mérhető) “HOLISZTIKUS” NMR (NMR igazi ereje)
33
1 H, 13 C NMR alapján: OK tiazolidin N-fenil szukcinimid VÁRT: ÁMDE! AGNO 3 -tal titrálható: gyűrűs imid ???
35
Pl.(!): 1 H 13 C HSQC COSY H-H-NOE C-H-NOE
36
? !
37
A megfejtésnek örülhetünk DE vajon hány lehetséges MÁS izomert zártunk ki tudatosan?
38
a gyenge pont… ~ mg ! S ignal N oise
39
NMR MS ELŐNY: rendkívüli érzékenység ( LRMS) HÁTRÁNY: ezen túlmenően csak perifériás információ (fragmentáció) ELŐNY: mély és egzakt molekuláris információ + dinamika HÁTRÁNY: viszonylag érzéketlen (> mg !!!) MS: NMR:
40
pg ng gg mg NMR MS NMR MS tradicionális szerepkör: elsősorban szintetikus munka támogatása A NMR érzéketlensége nem jelent problémát megfelelő mintamennyiség esetén: MS + (HOLISZTIKUS) NMR információ összeadódik, MS fragmentációs zónára nincs igazán szükség…
41
Szintézis-támogató ID, tipikus protokoll: ? NMR MS ! (+ IR) (+ dinamika)
42
? A szerkezetmeghatározás KELLEMETLEN esete KEVÉS mintánk van (KEVERÉK?)
43
pg ng gg mg NMR MS metabolitok, apró szennyezők… MS
44
Mikro-komponens ID, tipikus (tradicionális) protokoll: NMR LC MS ?! ?
45
Tipikus metabolit ID helyzet MS alapján: HO OH
46
Tipikus metabolit ID helyzet MS alapján: OH
47
Tipikus metabolit ID helyzet MS alapján: OH ?
48
preparatív HPLC NMR Ha végképp nem megy NMR nélkül: hosszadalmas preparatív HPLC munka (költség, idő) min. 20 mg NMR-re
49
NMR LC NMR MS CÉL Mikro-komponens ID MS
50
NMR & MS: Mi történt (történik) ennek érdekében a világban az utóbbi időben?
51
pg ng gg mg NMR MS Érzékenység növelés + Miniatürizálás HRMS + MS-MS
52
Pl.: mért LR mólsúly = 163 C 9 H 10 N 2 O C 10 H 14 N 2 = 163.08659 = 163.12298 LRMS: nem tud különbséget tenni! HRMS: 1. mérni tudja a pontos mólsúlyt! 2. mérni tudja a különbséget!
53
LTQ-FT MS Norcotinine elméleti móltömeg: 163.08659 mért móltömeg: 163.08647 Nicotine elméleti móltömeg: 163.12298 mért móltömeg: 163.12291 NEW !
54
SNSN 500 MHz Súly: 533 kg 900 MHz Súly: 7200 kg NEW !
55
1 H 60 MHz 1 H 500 MHz 1 H 900 MHz S/N=20:1S/N=900:1S/N=2700:1 S/N változása a mágnes térerő függvényében S/N ~ B 0 7/4
56
hűtött (“krio”) mérőfej SNSN NEW !
57
“Krio fej” 3-4 szeres érzékenység növekedés! Pl. 10-ed mérési idő !!! (KVANTITATÍV fejlemény) Egy sereg mérés kivitelezhetővé válik! Pl. C spektrum ! 2D spektrumok !!! (KVALITATÍV fejlemény) NEW ! KVANTITATÍV KVALITATÍV
58
60 g gHMBC ; 18 óra KRIO-fej 500 7 napig tartana konvencionális mérőfejjel ! NEW !
59
VÉGEREDMÉNY: néhány g minta protonisztikus NMR 20-30 g minta holisztikus NMR
60
Az ÚJ (technikai) lehetőség: ? NMR MS ! (+ IR) (+ dinamika)
Hasonló előadás
© 2024 SlidePlayer.hu Inc.
All rights reserved.