Többdimenziós kromatográfia

Az előadások a következő témára: "Többdimenziós kromatográfia"— Előadás másolata:

1 Többdimenziós kromatográfia

2 Deans kapcsolás Áramlás irányának megváltoztatása,
az áramlási sebesség változása nélkül.

3 A Fluidic Modulator To Address Temperature Limitations
Three-port valve is outside oven. F2’’ > F1 > F2’ > 0 Simultaneous fill and flush. Generates pulses by switching valve. Minimal pressure disturbances. No inherent temperature limitations.

4 Deans kapcsoló

5 Deans kapcsolók Nincs benne mozgó alkatrész, és kémiailag aktív felület.

6 Deans kapcsolás előnye a nyomelemzésnél

7

8 A modulátoron kifagy, fókuszódik a minta.

9 Az együtt eluálódó csúcsok szétválasztása második dimenzión

10 Modulation of a Pentane Peak
F1 = 1.0 ml min-1 F2 = 20.0 ml min-1 Peak widths near the theoretical limit are observed

11 Klórozott peszticidek GC x GC analízise

12 Benzin GC x GC analízise

13

14 HPLC X GC kapcsolás A folyadék mozgófázis nem tartalmazhat lerakodó anyagokat.

15 HPLC X GC kapcsolás

16 HPLC X HPLC

17

18 Mágneses szektorú MS működése
Minnél nagyobb a tömeg, annál nagyobb az ív. Gyakorlatban a mágneses tért változtatják (scann), hogy mindegyik ion érje a detektort.

19 Quadrupol tömegspektrométer működési vázlata

20 Totál ionkromatogram (TIC) és szelektált ion monitorozó (SIM) mód összehasonlítása
A SIM több nagyságrenddel érzékenyebb mint a TIC.

21 Fragmentáció vázlata Folyamatok Elektronütközés Molekula ion képződés
Fragmentáció több formában Átrendeződés EI általában 70EV energiával történik, ami kompromiszzum eredménye. A fragmentáció információgazdag, nem teljes.

22 Total ion kromatogram (TIC) és szelektált ion kromatogram (SIM) összehasonlítása

23 Quadrupol működési elve

24 On-line LC/MS kapacsolás előnye

25 Alkalmazott ionizációs módok

26 Electron ütközésest ionzáció (EI)

27 Fragmentáció szemléltetése
A fragmensekből összerakható az eredeti molekula.

28 Kémiai ionizáció (CI) Pozitív (PCI) Negatív (NCI)
NH3 + e -> NH e reagens gáz ionizáció NH M > NH3 + [M+H] + protonállt molekula NH M > [M + NH4] ammónium addukt Negatív (NCI) NH3 - e -> NH reagens gáz ionizáció NH M > NH2 + [M+H] - deprotonállt molekula NH M > [M + NH2] ammónium addukt A CI ~ 1Torr nyomáson történik NH3, CH4, isobután gázokkal

29 Kémiai ionizáció előnye
1 Torr Torr A Reagens gáz nagyobb nyomása miatt a CIben nagyobb az ütközés és az ionizáció valószínűsége. A használt gázoknak kedvező az ionizálhatóságuk, ezért ionátvivőként is szolgálnak. A CI kisebb fragmentációt ad mint a EI.

30 GC-MS mérés negatív kémiai ionizációval
Az érzékenységet heptafluorobutánsav (HFBA) Elektonbefogó származékkal, fokozzák

31 GC és MS on-line kapcsolat

32 Izotópszelektív GC-MS

33

34 Gyors analízisek LC/MS-sel
Ha más a fragmentáció akkor nem kell két anyagot elválasztani.

35 MS/MS kapcsolás

36 LC/MS kapcsolatok

37 HPLC/MS elektrospray ionizációval

38 HPLC/MS elektrospray ionizációval

39 HPLC/MS atmoszférikus elektrospray ionizációval

40 HPLC/MS atmoszférikus kémiai ionizációval (APCI)

41

42 APCI elmélete

43

44

45 Ion csapda MS Az ionokat parkoló pályán gyűjti és csak időnként
engedi a detektorra.

46 LC/MS készülékekben általában elektrospray (ESI) az ionizáció
Az LC eluenst beporlasztják az MS ionizáló terébe, ahol korona kisülés történik. Az oldat egyre töményedik, miközben mikro cseppekké esik szét A vizsgálandó anyag a puffer molekuláival adduktot képezve jut a mágneses térbe. Általában a fragmentáció csekély.

47

48 Fragmentogram értékelése
Fragmentogramon mérjük a csúcsok helyét a tömeg/töltés (m/z) skálán. A csúcsok intenzitását a magasságukkal mérjük. Legnagyobb csúcs (base peak) a100%, többit ehhez mérjük. Azonos körülmények között felvett fragmentogramon egy anyag mindig ugyanolyan csúcseloszlást mutat. A mennyiségi kiértékelés alapja egy adott kiválasztott ion (SIM), vagy az összion (TIC) áramerősége.

49 PCI és NCI spektrumok összehasonlítása

50 Különböző ionizációs módok más fragmentációt eredményeznek

51 Elektospray ionizáció (ESI) vázlata
1 torr torr

52 Elektospray ionizáció (ESI) elve

53 Növényvédőszerek LC/MS-MS meghatározása