A mutagenezis célja, haszna Mutáció Az egyed megjelenése (fenotípusa) megváltozHAT Ebből visszakövetkeztethetünk a mutációt szenvedett gén funkciójára.

Az előadások a következő témára: "A mutagenezis célja, haszna Mutáció Az egyed megjelenése (fenotípusa) megváltozHAT Ebből visszakövetkeztethetünk a mutációt szenvedett gén funkciójára."— Előadás másolata:

1 A mutagenezis célja, haszna Mutáció Az egyed megjelenése (fenotípusa) megváltozHAT Ebből visszakövetkeztethetünk a mutációt szenvedett gén funkciójára

2 A TIP120 fehérje néhány jellemzője  1230 AS, szimpla polipeptid  Affinitást mutat a TBP-vel és az RNS Pol II Rpb5 alegységével  Az iniciációs komplex összeszerelődését serkenti  A funkció betöltésében fontos a molekula N- terminális 1/3-a  A TIP120 fehérjét kódoló gént kimutatták patkányban, Coenorhabditisban, Drosophilában, emberben, Arabidopsisban

3 I. A TIP120 fehérje szerepe a Fehérjeszintézisben II. A TIP120 fehérje szerepe a fehérjedegradációs folyamatokban

4 A génkifejeződés SzakaszaiTranszkripció = „átírás” Transzláció = „fordítás” DNS Fehérje mRNS

5

6

7 TFIIH TFIIA A transzkripciós iniciációs komplex kialakulása TATA TBP POLII TFIIF TFIIB TIP120 TFIIE

8 Az ubiquitin-protein ligázok  Fontos típusuk az SCF-komplex (ROC1-SKP1- cullin1/cdc53-F box protein)  SCF targetjei különböző sejtciklus-kontroll és szignál- transzdukcióban fontos fehérjék

9 cul1 roc SKP1 F szubsztrát E2 Ub Nd8

10 A CAND1 fehérje szerepe az SCF komplex működésében  Gátolja a cul1-SKP1 interakciót  SKP1-cul1 komplexben nincs CAND1; CAND1-cul1 komplexben nincs SKP1  CAND1 kiütése RNS- interferenciával:SKP1-cul1 komplex mennyisége nő

11 A CAND protein gátolja az SCF komplex működését cul1 ROC SKP1 CAND1 cul1 roc SKP1 F szubsztrát E2 Ub Nd8

12 Inszerciós mutagenezis Növényi gén exon/intron promóter 5' UTR3' UTR T-DNS LBRB T-DNS inszerció Funkcióvesztéses mutáció Funkcióvesztéses mutáció

13 A H911 vonal Columbia: normál fenotípus H911/4: törpe fenotípus

14

15 T-DNS inszerció pozíciója a H911 vonalban Protein: feltételezett TBP kölcsönható fehérje (120 kD) (TBP Interacting Protein, TIP120) T-DNS inszerció: 13. exon (3301bp) Gén: At2g02560 RL 2. Krom., BAC T8K22