KÓRHÁZI ACINETOBACTER BAUMANNII TÖRZSEK JELLEMZÉSE

Az előadások a következő témára: "KÓRHÁZI ACINETOBACTER BAUMANNII TÖRZSEK JELLEMZÉSE"— Előadás másolata:

1 KÓRHÁZI ACINETOBACTER BAUMANNII TÖRZSEK JELLEMZÉSE
Krucsó Barbara, Pászti Judit, Országos Epidemiológiai Központ 2005.

2 Az Acinetobacter baumannii néhány jellemzője
fakultatív patogén baktérium, leggyakrabban intenzív terápiás osztályokon hospitalizált betegek infekciója során kap jelentőséget, a következő nozokomiális infekciók kialakításáért felelős: bacteraemia, húgyúti infekciók, másodlagos meningitis, pneumonia, egy magyarországi felmérés alapján intenzív osztályokon a környezeti mintákban előforduló második leggyakoribb kórokozó, a törzsekre magasfokú rezisztencia jellemző

3 Mi is lenne tipizálásunk célja : epidemiológiai oknyomozás: mi a terjedés módja és forrása
Munkánk során 9 különböző forrásból származó 109 izolátum vizsgálatát végeztük el , melyek kórházi környezetből, nozokomiális megbetegedésekből származtak. járvány (2 vagy több összefüggő eset) során izolált törzsek járványügyileg összefüggőeknek tekinthetőek-e; az epidemiológiai vizsgálat során vett higiénés mintákból izolált törzsek megegyeznek-e a betegekből származó törzsekkel; a járványt követő időszakban izolált törzsek megegyeznek-e a járvány törzzsel; a különböző tipizálási módszerek összehasonlítása

4 A vizsgált Acinetobacter baumannii törzsek megoszlása
minta forrás szerint

5 Milyen tipizálási módszert válasszunk?
-a tipizálhatóság nem 100%-os -a fágok és antiszérumok széleskörben nem hozzáférhetőek -jelenleg nem vagy csak kevés helyen alkalmazzák -járvány esetén a törzsek gyors elkülönítésére szolgál szero- és fágtipizálás biokémia, antibiotikum érzékenységi vizsgálat plazmidprofil analízis, protein profil analízis, PCR-különböző primerekkel (REP, AP, ERIC, DAF4) PFGE-különböző restrikciós enzimekkel(ApaI, SmaI) AFLP, ribotipizálás -jelenleg ritkán vagy nem alkalmazzák -jó reprodukálhatóság, tipizálhatóság -viszont pénz, esetenként időigényesek

6 A. baumannii törzsek ERIC PCR mintázata
(Enterobacterial Repetitive Intergenic Consensus PCR) Nem ismert szekvenciák amplifikációján alapul. Az eltérő mintázatokat típusokba (pl.:A, B, C), és altípusokba soroltuk (pl.:A1, A2). A típusok elkülönítése a kapott termékek száma, és elhelyezkedése alapján történt. 2 csík különbség már új típust jelent. bp bp 2645 1605 1198 676 517 676 460 396 350 517

7 ERIC PCR vizsgálatok eredményei
és azok megoszlása mintaforrás szerint

8 A.baumannii törzsek PFGE (pulzáltatott-mezejű gélelektroforézis) mintázata
M M Kromoszómális DNS emésztése ApaI restrikciós enzimmel. A törzsek további diszkriminálását teszi lehetővé. Acinetobacter baumannii esetén ApaI enzimmel ~15-20 fragmentet kapunk. kb B D 436,5 388 339,5 291 242,5 194 145,5 97 48,5

9 ….és a gél alapján készített családfa
A típusok, altípusok elkülönítése a fragmentek száma és elhelyezkedése alapján történt. Egy PFGE típust alkotnak azok a törzsek, melyek 80%-nál nagyobb genetikai hasonlóságot mutatnak.

10 Acinetobacter PFGE vizsgálat eredménye, a B és D típus
izolálása Magyarországon Komárom-Esztergom megye hemokultura 2004 Pest megye járvány: vér, liquor, orr, torok,seb, genny környezeti minták Hajdú-Bihar megye környezeti minták: textília, levegő orr, torok 2002        Heves megye halmozódás: vér, liquor 2002 -B típus -D típus

11 Összefoglalás Mind a B, mind a D pulzótípusú A. baumannii klón előfordult a beteganyagból és a környezeti szűrés során izolált törzsek között is. Molekuláris epidemiológiai módszerek alkalmazásával igazoltuk között genetikailag rokon Acinetobacter baumannii törzsek előfordulását. Munkánk felhívja a figyelmet un. ’virulensebb’ klónok perzisztálására, és a kórházi higiéné fokozott betartására.