Virológiai detektívmunka: a kanyaró nyomában (Morbilli – in flagranti) Dr. Szomor Katalin PhD, Dr. Rigó Zita MD OEK, Kiütéses Vírusbetegségek Nemzeti Referencia Laboratóriuma 19. Országos Védőoltási Továbbképző Tanfolyam Eger, 2013. április 25-27.

Magyarország: Kiütéses Vírusbetegségek NRL (WHO Kanyaró/Rubeola NRL) WHO laboratóriumi hálózat - Measles-Rubella Laboratory Network (M/R LabNet) RRL Luxembourg RRL Berlin (RKI) RRL Moscow National Reference Laboratory (NRL) (49) Magyarország: Kiütéses Vírusbetegségek NRL (WHO Kanyaró/Rubeola NRL) Sub-National Laboratory (SNL) (20) célja: LabNet – WHO / Lab-Lab közötti információcsere molekuláris epidemiológiai adatokon alapuló surveillance ÁLLANDÓ ELLENŐRZÉS – WHO accreditation 19. Országos Védőoltási Továbbképző Tanfolyam, Eger, 2013. április 25-27.

a „közös nevező” WHO Manual for the laboratory diagnosis of measles and rubella virus infection eredmények összehasonlíthatóságának érdekében: azonos módszerek (klasszikus virológiai/molekuláris) azonos viszonyítási alap (WHO genotípus referencia adatbázis) azonos jelölés pl. MVs/Helységnév.HUN/ww.yy [genotípus] vagy: MVi/Helységnév.HUN/ww.yy [genotípus] 19. Országos Védőoltási Továbbképző Tanfolyam, Eger, 2013. április 25-27.

a vírusról egyetlen szerocsoport genetikailag nem egységes (8 klád/ 22 genotípus): A-E-F: 1-1 genotípus B1-3; C1-2; D1-10; G1-3; H1-2 a genotípus nincs hatással sem a laboratóriumi diagnosztika érzékenységére, sem a patomechanizmusra (betegség súlyossága, szövődmények előfordulásának aránya) 19. Országos Védőoltási Továbbképző Tanfolyam, Eger, 2013. április 25-27.

diagnosztikai módszerek ellenanyag kimutatás – szerológia: ELISA IgM, IgG indirekt immunfluoreszcencia IgM, IgG „pozitív” eredmény 19. Országos Védőoltási Továbbképző Tanfolyam, Eger, 2013. április 25-27.

diagnosztikai módszerek vírusizolálás: Vero-hSLAM sejtvonalon (human signaling lymphocytic activation molecule = CD150) „gold standard” DE: csak járvány idején lehetséges izolálni 19. Országos Védőoltási Továbbképző Tanfolyam, Eger, 2013. április 25-27.

diagnosztikai módszerek molekuláris módszerek: PCR konzervatív régióra tervezett primerekkel hiper/variábilis régióra tervezett primerekkel genotipizálás (nukleotid-sorrend meghatározása szekvencia analízissel, majd referencia törzsekhez való viszonyítás) WHO által meghatározott „genotípus referencia törzsek” használata nt 1126 - 1575 GENOTIPIZÁLÁS ALAPJA: N (nukleoprotein) fehérjét kódoló génszakasz „C”-terminális régiójának 450 bázisát felölelő szakasza 19. Országos Védőoltási Továbbképző Tanfolyam, Eger, 2013. április 25-27.

a kapott szekvenciák összehasonlítása >1448/2011 GTCAGTTCCACATTGGCATCTGAACTCGGTATCACTGCCGAGGATGCAAGGCTTGTTTCAGAGATTGCAATGCATACTACTGAGGACAGGATCAGTAGAGCGGTTGGACCCAGACAAGCCCAAGTGTCATTTATACACGGTGATCAAAGTGAAAATGAGCTACCAGGATTGGGGGGCAAGGAAGATAGGAGGGTCAAACAGGTCGGGGGGAAGCCAGGgAGAGCTACAGAGAAACCGGATCCAGTAGAGCAAGTGATGTGAGAGCTGCCCATCTTCCAATCAGCACTCCCCTAGACGTTGACACTGCATCAGAGTCAGGCCAAGATCCGCAGGACAGTCGAAGGTCAGCTGACGCCCTGCTCAGGTTGCAGGCCATGGCAGGAATCTTGGAAGAACAAGGCTCAGATACAGACATCTCTCGGGTGTACAATGACAAAGATCTTCTAAAC 19. Országos Védőoltási Továbbképző Tanfolyam, Eger, 2013. április 25-27.

filogenetikai analízis pl. MEGA software genotípus + epidemiológiai adatok és kronológiai információk = fertőzések „nyomvonalának” követése 19. Országos Védőoltási Továbbképző Tanfolyam, Eger, 2013. április 25-27.

Spread of MV variant “D4-Hamburg“ across Europe 2008 2009 2010 DEU GBR POL BGR GRC AUT TUR no epi-link forrás: A. Mankertz, RKI, Berlin 19. Országos Védőoltási Továbbképző Tanfolyam, Eger, 2013. április 25-27.

Geographic Distribution of Measles Genotype D4 in WHO European Region – 2010-2011 USA forrás: A. Mankertz, RKI, Berlin 19. Országos Védőoltási Továbbképző Tanfolyam, Eger, 2013. április 25-27.

Köszönöm a figyelmet! 19. Országos Védőoltási Továbbképző Tanfolyam, Eger, 2013. április 25-27.