Spektrofotometria 2009. november 13..

Az előadások a következő témára: "Spektrofotometria 2009. november 13.."— Előadás másolata:

1 Spektrofotometria 2009. november 13.

2 Az elektromágneses spektrum
λ E

3 A foton energiája Ahol: h: Planck állandó h=6.63*10-34Js
: frekvencia  1 1/s = 1 Hz c: fénysebesség: 3*109 m/s : hullámhossz: m  1 nm = 10-9 m

4 Kölcsönhatás az anyaggal
Az anyagok kölcsönhatása az EM sugárzással: átengedik (transzmisszó) elnyelik (abszorpció) visszaverik (reflexió) szín

5 A spektrofotométer I.

6 A spektrofotométer II.

7 A spektrofotométer III.

8

9 Az abszorpció mennyiségi jellemzése

10 Az abszorpciós spektrum

11 A mennyiségi sejtés

12 A Lambert-Beer törvény
Ahol: A: abszorpció (extinkció) ε0: moláris abszorpciós koefficiens (moláris extinkciós koefficiens)  cm2/mol c: koncentráció (mol/dm3) l: a küvetta hosszúsága (cm)

13 A NAD+/NADP+ kutatása spektrofotométer

14 DNS I.

15 DNS II. – melting point

16 Fehérjék mennyiségi meghatározása

17 Fluoreszcencia és foszforeszcencia

18 GFP

19 Biolumineszcencia

20

21 Luciferin / luciferáz

22 A luciferáz felhasználása

23