Műszerezettség és mintaelőkészítés kapcsolat

Az előadások a következő témára: "Műszerezettség és mintaelőkészítés kapcsolat"— Előadás másolata:

1 Műszerezettség és mintaelőkészítés kapcsolat
Kiegészítések

2 1. Nagy műszerezettség és mintaelőkészítési szükséglet
Fogalmak: On-line Off-line At-line In-line

3

4 Folyadékkromatográf, mint mintaelőkészítő egység!
Kolonna követelmény: rövidebb, mert az MS, mint elválasztó egység működik. Feladata a mátrix interferencia elkerülése! Ionelyomás vagy érzékenyítés elkerülése!

5 Mi különbség az LC-MS és az LCMS-MS nyújtotta teljesítmény között?
LC-MS: minőségi információ kevés! LC-MS-MS: minőségi információ, interferencia mentes mennyiségi analitika!

6 Tömeganalizátorok használata 2012!
Q kvadrupol IT ioncsapda TOF repülési idő analizátor IMS ion mobilitási spektométer ICR ion ciklotron tömegspektrometer LIT lineáris ioncsapda

7 LC-MS-MS

8

9

10

11

12

13 Mátrixot tartalmazó mintáknál és nagyon eltérő polaritásúaknál, a minta előkészítést a folyadékkromatográfiában grádienselucióval végezzük! Elsődlegesen oldószergrádienssel!

14 Folyadékkromatográfiás módok hatékonysága és elemzési időszükséglet
összefüggése a grádienselúcióban! Mérőszáma:csúcskapacítás(P). A csúcsfelbontó kapacitás a vegyületek molekulatömegétől, a folyadékkromatográfiás módtól és a töltet morfológiájától függ!

15 Az elválasztást csúcskapacitással(P)jellemezzük.
Fizikai értelme, hány komponenst tudunk elhelyezni, szorosan egymás mellett, hogy a felbontás,Rs=1. Feltételezve, hogy csúcsok egyenlő szélességűek(w) P=tg/w, vagy P=1+tg/w

16 Folyadékkromatográfiásan kis molekulatömegű anyagok

17 Választási lehetőségek
HPLC UPHLC megvalósítása: az alábbiakkal 2 mikrométer alatti töltetek:teljesen porózus vagy héjszerű HTLC:kolonna stabilitás Héjszerű töltetek: 3 vagy 2 um alatti töltetek

18

19 Nagy molekulatömegű anyagok

20

21 QxQ: mennyiségi analitikára.
Nincs tökéletes kolonna, amelynél a mátrix zavarás kiküszöbölhető lenne! Kísérő vagy kettős belső standard alkalmazása szükséges a false pozitív vagy false negatív hiba kiküszöbölésére!

22 Mátrixhatás kiküszöbölése:
1.Mátrixra való kalibrálás:szpájk. 2.Kisérő standard vagy kettős belső standard 3.Izotóp higításos módszer

23 Izotóp hígításos módszernél vagy deuterizált vagy szén izotóp jelzett.

24

25 Minőségi meghatározásra:
MADI-TOF Nem alkalmas mennyiségire! MALDIxQqQ, mind mennyiségi, mind minőségi analitikára!

26 Trendek: Kis felbontású készülékek helyett nagy felbontásúak!

27 HPLC-MS, helyett UHPLC-MS

28 2D-LC-MS

29 Szoftver segítség az adatfeldolgozáshoz! Orbitrap analizátor bevezetése!

30 Ion mobilitási spektrométer elve
Megjelentek az ion mobilitás spektrométer (IMS) kombinációk!

31 Spektrum. IMS: gyors felvételek

32

33

34

35

36

37

38

39

40

41

42

43

44 Ma oz off-line technika a döntő

45 LC-SPE on line Off-line oldószercsere SPE-NMR on-line

46

47 Követelmények az SPE-vel szemben:
Adott mozgófázisnál az oszlop visszatartása nagy legyen. Ezt segíti a mozgófázis gyengébbik komponensének adagolása! Össze kell hangolni a folyadékkromatográfiás módszert, az SPE kémiájával

48 RPLC-víz NPLC-n-hexán HILIC-AN Minden esetben a fókuszáló hatást kell kihasználni!

49 RPLC: Ha vegyület logP vagy logD értéke 2 alatt van, akkor a fókuszáló hatás kevésbé érvényesül! Ha logP vagy logD értéke 2, akkor a víz hozzáadására a visszatartás jelentősen nő,érvényesül a fókuszáló hatás!

50 SPE mintadúsító és tisztító oszlopok felületi kémiája nagy átfedést mutat a folyadékkromatográfiás kolonnákéval! Szilikagél alapú alkilmódosítottak! Poláris fordított fázisú töltetek! C-8 módosítás Szerves polimer alapúak ioncserélők

51 NMR jel függ a kolonna elejének koncentráló hatásától!

52 LC-FTIR, nincs újabb fejlesztés.
Ok: érzékenység megfelelő oldószer kiválasztása a méréshez az on-line csatolásnál Off-line technika nehézkes

53 Új trend a GC-MS technikában:
GC-MS-MS a GC-MS helyett Elemanalitikában a speciációs elemzés előtérbe kerülése, Így GC-ICP-LRMS vagy HRGC-HRMS LC-ICP-LRMS vagy UHPLC-HRMS

54 IC-ICP-MS helyett IC=ionkromatográf CIC=capillary ion chromatograph CIC: kisebb mozgófázis fogyasztás nagyobb érzékenység