Transzdukció Készítette: Őri Zsuzsanna Emese 2007.március 30.

Az előadások a következő témára: "Transzdukció Készítette: Őri Zsuzsanna Emese 2007.március 30."— Előadás másolata:

1 Transzdukció Készítette: Őri Zsuzsanna Emese 2007.március 30.

2 Transzdukció fogalma Fágok közvetítésével bakteriális gének új gazdasejtbe való bejutása Vírusok segítségével eukarióta DNS szakaszok közvetítése eukarióta sejtekbe Bakteriális transzdukció típusai Specializált Általános

3 Specializált transzdukció Temperált fág pl. E. colinál λ- fág DNS-e viszi át a a gazda DNS egy darabját A lizogén fertőzésnél a beépülés általában helyspecifikus A pontatlan kivágódás eredményezi Kb. 5 kb lehet a felvett szakasz mérete

4 Általános transzdukció E. colinál pl. P1- fággal valósítható meg A fej a saját DNS-e helyett viszi át a gazda DNS-ét Ez a hibás pakolás eredménye, a fágnak fejméretű pakolási mechanizmusa van 90 kb is lehet a transzdukált mennyiség

5 Alkalmazási lehetőségei Gén/gének átvitele egyik baktériumból egy másikba Közeli genetikai bélyegeket lehet vele térképezni 1 génen belüli finomtérképezésre is alkalmas Génsorrend meghatározására

6

7 Adeno- asszociált vírusok Parvovírusok, dependovírusok nemzetsége állati és humán vírus, széleskörű gazdaspecificitás Kis méretű, ikozaéder, ssDNS Helper vírusra van szüksége a replikációhoz Helper hiányában helyspecifikusan beépül a genomba

8 Adeno- asszociált vírusok DNS-e 4,68 kb, azaz kicsi →kis génátvivő kapacitás 2 végén ITR(145 b) Rep fehérjék: szabályoznak, replikációhoz fontosak, helyspecifikus rekombinációt irányítják Rep gének nagyok → kiveszik → nincs helyspecifikus inzerció Transzdukciós hatékonyság nagy

9 Adeno- asszociált vírusok Átvitt gén stabil, hosszú ideig kifejeződik Gyenge immunválasz kiváltása (több szerotípus) Osztódásban lévő és nem oszódó sejteket/szöveteket is megfertőz rAAV gyártás drága

10 Adeno- asszociált vírusok Hibrid vektorokat is készítenek: –HSV1+AAV –Rep génes vektor+ITR határolta transzgén vektor Alkalmazás: genetikai/örökletes betegségek kezelése –Izomban: lacZ, β- galaktozidáz gén bevitele adenovírus jelenlétében/hiányában Öregség/betegség okozta izomtömeg csökkenés kezelése

11 Adeno- asszociált vírusok –Szívbetegségek, érrendszeri betegségek, rák, stb. kezelésére→ Ígéretes génterápiás eszköz

12 Köszönöm a figyelmet!

13

14