Anesztézia és eutanázia az állatkísérletekben

Az előadások a következő témára: "Anesztézia és eutanázia az állatkísérletekben"— Előadás másolata:

1 Anesztézia és eutanázia az állatkísérletekben
Dr. Szombath Dezső SE ÁOK Kórélettani Intézet

2 AZ ÁLLATKÍSÉRLET VÉGZÉSÉNEK ALAPVETŐ FELTÉTELEI Az állatkísérlet általános szabályai (1998. évi XXVIII. törvény) 28. § (1) Az állatkísérletet általános vagy helyi érzés-telenítéssel, fájdalomcsillapítással, avagy más, az idegi megrázkódtatást, fájdalmat, szenvedést vagy az állat károsodását kizáró módszerrel kell végezni, kivéve, ha ezek alkalmazása a kísérleti állat számára nagyobb megterheléssel járna, mint mellőzésük, illetőleg az a kísérlet eredményét értékelhetetlenné tenné.

3 Cold-restraint fekély patkányban

4 Beavatkozás az állaton (1998. XXVIII. évi törvény
9. § (2) Beavatkozás érzéstelenítés nélkül csak akkor végezhető, ha az érzéstelenítés, illetőleg az ehhez szükséges rögzítés legalább akkora fájdalommal járna mint a beavatkozás. A gazdasági…..

5 A fájdalomcsillapítás és az eutanázia az állatkísérletes munka szerves része
A fájdalommentesítés, de annak hiánya is befolyásolja a viszgálati eredményeket Kállai: Laborállat könyv

6 Terminológia Anesztézia (érzéstelenítés)
Általános érzéstelenítés (narkózis; general anaesthesia) Helyi érzéstelenítés (lokálanesztézia) Analgesia (fájdalomcsillapítás) Kábító fájdalomcsillapítók (opioidok: morfin) Nem-szteroid gyulladásgátlók „adjuváns” fájdalomcsillapítás (antidepresszánsok: hatásfokozás)

7 A narkózis (általános érzéstelenítés) gyakorlati alapja
A narkotikum a szervezetben közel egyenletesen oszlik meg, azaz koncentrációja a szervekben közel azonos A neuronok és idegpályák narkotikum iránti érzékenysége különböző (analgesia és izomrelxáció működő vasomotor központ mellett)

8 Az általános érzéstelenítés jellemzői
Analgesia Amnesia Öntudatlanság (emberben) Szenzoros ás vegetatív reflexek hiánya Vázizom relaxáció

9 Az anesztézia kivitelezése
Előkészítés Anesztéziás állapot kiváltása Inhalációs anesztézia Injekciós anesztézia (iv.; ip.; transzkután) Utógondozás

10 Narkózis (anesztézia) előkészítés célja
Az állatokra ható stressz – szituáció hatásainak mérséklése (előző állatok szaga, zaj, stb.) Kevesebb anesztetikum használata Mellékhatások kivédése

11 Narkózis (anesztézia) előkészítése Előkezelés patkányon
Atropin ,05 mg/kg sc sekréció/bradycard Diazepam ,5 mg/kg ip amnézia/szedatív Acepromazin 2,5 mg/kg ip hányás/neurolept. Fentanyl/fluanison 0,4 ml/kg ip fájdalom Xylazin mg/kg sc szedáció

12 Az anesztézia időtartama
Rövid (ultrarövid) Középhosszú Hosszú

13 Minimális alveoláris koncentráció (% v/v), MAC (az egyedek 50 %-a areflexiás fájdalomra)
Éter Halotán Izoflurán N-oxidul Ember 1, ,75 1, Majom ,15 1, Egér 3, ,95 1, Patkány 3, ,10 1, Macska 2, ,82 1, Kutya 3, ,87 2, Sertés 1,45 Juh 1,58

14 Inhalációs anesztézia patkányban
Éter induló: %, fenntartó: 5 % Halotán induló: 4-5 %, fenntartó: 1-2 % Izoflurán induló: 4 %, fenntartó: 1,5-3 %

15 Éteres altatás patkányban

16 Rövid hatású anesztézia patkányban
Propofol mg/kg iv. Tiopenton mg/kg iv. Methohexiton mg/kg iv.

17 Közép hatású anesztézia patkányban
Ketamin/ 90 mg/kg ip Xylazin 10 mg/kg ip. Pentobarbiton mg/kg ip.

18 Hosszú hatású anesztézia patkányban
Chloralóz 130 mg/kg ip.

19 Narkózis I. Stádidum (bódulat szaka, stadium analgesiae)
Narkózis kezdetétől az öntudat (emberben) elvesztéséig tart Csökkent fájdalomérzés Amnesia Fényre reagáló normális tágasságú pupillák Kisebb sebészeti beavatkozások végezhetők

20 Narkózis II. Stádium (izgalmi szak, stadium excitationis)
Az öntudat (emberben) elvesztésétől a szemhélyzárási reflex eltűnéséig tart Kérgi gátlás megszűnte: heves mozgási reakciók, hányás csuklás, szapora pulzus és légzés Fényre reagáló tág pupillák, garatreflex megtartott Célszerű a reakciókat csökkenteni premedikációval, ill. gyorsan túlvezetni a stádiumon a narkózist Narkománok, alkoholisták, izmos egyének erőteljes reakciója

21 Narkózis III. Stádium (sebészi narkózis szaka, stadium tolerantiae)
A szabályos légzés megjelenésétől a légzés leállásáig tart Kéreg alatti motoros magok kikapcsolnak Csökkenő izomtónus, gerincagyi reflexek kialszanak A III. stádium 4 fázisra osztható A sebészi beavatkozásra a III/2. fázis a legalkalmasabb; jellemzője a cornea reflex eltűnése

22 Narkózis IV. Stádium (túlaltatás, stadium asphyxia; vagy hűdéses szak, stadium paralyticum)
Süllyedő vérnyomás, szapora pulzus Tág, fényre nem reagáló pupillák (adrenalin túlsúly) Légzésbénulás, majd bradycardián keresztül szívmegállás Azonnali beavatkozással az állapot visszafordítható (altatószer felfüggesztés)

23 A narkózis fontosabb jelenségei Kállai: Laborállat könyv

24 Az anesztézia mélységének ellenőrzése a kísérleti állaton
Megfordulási reflex Lábreflex Szemhélyreflex Nyelési reflex Farokcsípési reflex Fülcsípési reflex

25 Anesztézia (műtét) utáni gondozás
Az állat hőmérsékletnek kontrolálása (fűtőlap, automata infralámpa) Egyedi elhelyezés; faforgács mentes körülmények Folyadékpótlás (vérveszteség + lázas állapot + fokozott perspirációs veszteség) Postoperatív fájdalomcsillapítás (kb. 72 órán át; ópiátok, helyi érzéstelenítők, esetleg aspirin)

26 Testhőmérséklet kontrol

27 Helyi érzéstelenítés (lokálanesztézia) formái
Infiltrációs (pl. appendectomia) Felületi (nyálkahártyákon) Vezetéses (fogászati alkalmazások) Subcutan regionalis Intravénás regionális (leszorított végtagon) Spinalis (liquor helyett, azzal azonos fajsúlyú oldat) Periduralis (szülészet-nőgyógyászat, urológia) Periduralis és spinalis opioid analgesia (kombinált)

28 A helyi érzéstelenítés szerei
Prokain (Novocain), vezetéses érzéstelenítés Lidokain (0,5-2,0-os oldatban) általános szer Bupivakain Prilokain Szabály, hogy az állatot szedálni kell

29 A fájdalom és kellemetlen érzet jelei I.
A fajtól függően ezek a következők lehetnek: Kellemetlen érzet hangadásai (nem mindig észlelhető a humán hangtartományban) Küszködés/erőlködés Menekülési kísérlet Defenzív vagy saját maga ellen irányuló agresszió Megdermedés/mozdulatlanság Zihálás/lihegés

30 A fájdalom és kellemetlen érzet jelei II.
Fokozott nyálelválasztás Vizelet- és bélsárürítés és az analis mirigyek ürítése Pupillatágulat Tachycardia (szapora szívverés) Izzadás A vázizmok reflexes kontrakciója, amely izomrángásokat, remegést, vagy egyéb izomgörcsöt okoz

31 A fájdalom kezelésének különböző lehetőségei (Fürst: Farmakológiai)

32 A fájdalomcsillapítás elvi lehetőségei
Gyógyszerek Ópiátok NSAIDs Adjuvánsok (antidepresszánsok, görcsgátlók, szteroidok) TENS (transcutan elektromos idegingerlés) Regionális idegblokád Idegsebészeti eljárás (thalamotomia) Pszichoterápia (emberben)

33 Rágcsálók reakciója fájdalmat kiváltó ingerek hatására
INGER REAKCIÓ Mechanikai inger (nyomás) a farok elhúzása (E, P) Sugárzó hő (fényforrásból, a farok elhúzása, a hátbőr fókuszálva) rángása (E, P, Tm) Kontakt hőinger (56, vagy a talp megnyalása 65 oC-os lemez) Elektromos inger (farok) a gerinc hátrafeszítése, ill visítás (Tm, E) E=egér, stb Kállai: Laborállat könyv

34 Az állat életének kioltása (1998. évi XXVIII. törvény)
11. § Az állat életét elfogadható ok vagy körülmény nélkül kioltani nem szabad. Elfogadható oknak, körülménynek minősül különösen az élelmezési cél, a prém termelése, …, a tudományos kutatás 12.§ (1) Az állat életének kioltása – a (2) bekezdésben foglaltak kivételével – kizárólag kábítás után történhet. (2) A kábítás kötelezettség nem vonatkozik a gerinctelen állatokra, …

35 AZ ÁLLATKÍSÉRLET VÉGZÉSÉNEK ALAPVETŐ FELTÉTELEI Az állatkísérlet általános szabályai (1998. évi XXVIII. törvény) 29. § (2) Az állatkísérlet befejezésével a véglegesen vagy súlyosan károsodott állat életét kíméletesen ki kell oltani.

36 Az eutanázia célja Olyan halál az állatok számára, amely
Fájdalommentes, gyors eszméletvesztéssel és Minimális rögzítéssel (stresszel) jár, Visszafordíthatatlan, Elfogadható látványú a végrehajtó részére.

37 Az euthanasia kivitelezésének helyszíne
Alapszabály: A többi állattól elszigetelten kell végezni, ill. Ha a kísérlet altatott állaton zajlik, a kísérlet helyszínén altatószer túladagolással.

38 Az eutanázia körülményei megválasztásának fontossága
Tarkóütés, más helyiségben; Éternarkózis, más helyiségben; Altatás Nembutallal, más helyiségben; Az állatok megölése az elpusztításra váró állatok jelenlétében; Mint a 4., de a közvetlen látványtól elzárva; Mint az 1., de a vérrel átitatott kendőt látják az állatok; i.p. injekció adása, majd tovább, mint az 1. csoport.

39 A halál felismerése Szívverés és légzés megszűnése Reflexek hiánya
Testhőmérséklet 25oC alá süllyedése (kistestű rágcsálók)

40 Az eutanázia elfogadott módszerei I.
Fizikai módszerek Lelövés (nagy hüllők, emlősök) Rázkódás/ütés (nyulak, macskák, kétéltűek, halak, stb.) Elektromos kábítás (halak, kétéltűek, sertés, kecske, stb.) Nyaki dislocatio (szárnyasok, fiatal rágcsálók, stb.) Lefejezés (rágcsálók, madarak, halak, kisebb nyulak, stb.) Maceratio (naposcsibék) Mikrohullámú besugárzás (neurobiológiai gyakorlatban; az agy kiválasztott területére fókuszált sugárzással)

41 Az eutanázia elfogadott módszerei II.
Kémiai módszerek Széndioxid (60 tf. % konc. felett), szénmomoxid (6 tf. % felett); kevés CO2 +O2 keveréssel Illékony narcotikumok (halotán, enfluran, isofluran) Barbiturátok (Na-pentobarbitál, dózisa: 18 %-os {200 mg/ml} koncentrációban 200 mg/kg) T-61 (tetracain chloratum + kurariform hatású keverék) i.v. Uretán (béka) Ketamin/xylazin kombináció

42 Eszméletlen rágcsálók esetében elfogadott módszerek
Gyors fagyasztás (folyékony hidrogén, csupasz állatoknál) Kivéreztetés Légembólia Kálium-klorid Etanol (70%-os oldat i.p.)

43 Rágcsálók eutanáziájára nem elfogadott módszerek
Hypothermia (fagyasztó készülék) Nitrogén (hosszú fulladásos halál) Kéjgáz (lassú fulladásos halál) Ciklopropán (állatbarát, de nem humánus, az alkalmazóra veszélyes!) Éter és kloroform (nyálkahártya irritáció miatt erőteljes stressz + környezetre veszélyesek)

44 Rágcsálók eutanáziájára tiltott módszerek
Vákuum, egyáltalán: fulladásos halál (pl. vízbefojtás) Triklór-etilén (főleg fájdalomcsillapító; karcinogén) Hidrogén-cianid (heves görcsök + veszélyes az alkalmazóra) Sztrichnin, nicotin, klorálhidrát Magnézium-szulfát (izombénulás eszméleten lévő állapotban) Kurare származékok és egyéb neuromuscularis bénítók

45 Irodalom Recommendations for euthanasia of experimental animals.
Laboratory Animals (1996) 30, and (1997) 31, 1-32. Farmakológia Szerk.: Fürst Zsuzsanna, Medicina 2001. Laborállat könyv Kállai, Kallé-K Kft

46