POSZTTRANSZLÁCIÓS MÓDOSÍTÁSOK

Az előadások a következő témára: "POSZTTRANSZLÁCIÓS MÓDOSÍTÁSOK"— Előadás másolata:

1 POSZTTRANSZLÁCIÓS MÓDOSÍTÁSOK
HT G fehérjék: Alfa alegység (Gi és Go) N-terminális mirisztoiláció Alfa és RGS: reverzibilis palmitoilálás N-terminálison Gamma alegység C-terminális farnezilálás Monomer GTPázok ARF – mirisztoilálás Többi: farnezilálás (Ras – palmitoilálás is)

2 A Rac prenilációja eukarióta sejtekben
Prenyl- transzferáz RAC RAC 189CAAX 189C

3 PRENYLTRANSZFERÁZOK Enzim Felismert szekvencia Szubsztrát FTase CAAM/S Ras GGTase-I CAAL Rac/Rho Rap GGTase-II CXC/CC Rab

4 A Rac kis G fehérje szabályozása
GAP Rac·GTP Rac·GDP GEF RhoGDI·Rac·GDP GAP = GTPáz aktiváló protein GEF = Guanin nukleotid kicserélő faktor GDI = Guanin nukleotid disszociáció inhibitor

5 A RhoGDI -Cdc42 komplex szerkezete
Cell Fig. 1a

6 A Rho-GDI és a prenylált Cdc42 interakciója
Cell Fig. 3b

7 A membrán-lokalizált GAP hatása prenilált és nem-prenilált Rac-ra

8 A GAP domén és a teljes hosszúságú p50GAP hatása prenilált és nem-prenilált Rac-ra

9 A p50RhoGAP GST fúziós fehérjeként kifejezett fragmensei
Sec14 PP GAP 1 439 49 87 121 169 198 211

10 Különböző p50RhoGAP fragmensek hatása
Nem-prenilált Rac-ra Prenilált Rac-ra

11 Különböző p50RhoGAP fragmensek hatása az
oxidáz aktivitásra a tisztított rendszerben Nem-prenilált Rac Prenilált Rac

12 A p50RhoGAP GST fúziós fehérjeként kifejezett fragmensei
Sec14 PP GAP 1 439 49 87 121 169 198 211

13 Preniláció hatása a Rac-p50GAP interakcióra
élesztő két-hibrid rendszerben

14 A pRac-p50GAP interakció modellje
Zárt konformáció Interakció prenilált Rac-al Nyitott konformáció Moskwa et al. JBC 2005

15 G-fehérjék poszttranszlációs módosítása
Ins-R G-fehérjék poszttranszlációs módosítása Prenil- transzferáz RAC RAC 189CAAX 189C

16 TOVÁBBI PÉLDÁK A PRENILÁCIÓ SZEREPÉRE
Trio (GEF) RhoA Ig-like domain Cdc25 (yeast GEF) Ras2p N-terminal domain Rab-GAP Rab3A ?? INTRAMOLEKULÁRIS INTERAKCIÓ p120RasGAP Ras N-terminal PH domain

17 IRODALOM Hoffman et al., 2000, Cell Molnár et al., 2001, Biochemistry Moskwa et al. 2005, J. Biol. Chem Finlayson et al. 2003, Metabolism Ligeti E. and Settleman J. 2006, Methods Enzymol

18 Science Fig. 5c

19 Dependence of the fluoride effect on the Rac :GAP ratio

20 Effect of fluoride on the interaction of Bcr with prenylated or non-prenylated Rac

21 Effect of fluoride on the interaction of GAP with prenylated and non-prenylated Rac

22 Effect of fluoride on the interaction of prenylated and non-prenylated Rac with GAP
p50RhoGAP Bcr

23 Dependence of the effect of fluoride on the presence of aluminium