Új molekuláris biológiai módszerek

Az előadások a következő témára: "Új molekuláris biológiai módszerek"— Előadás másolata:

1 Új molekuláris biológiai módszerek
Vektorok 2016

2

3 Könyvtár- készítés cDNS, vagy genomi

4 Klónozás λ fágba λ-fág, mint vektor DNS λ-fág λ DNS
központi régió eltávolítása idegen DNS beültetése λ DNS λ „karok” in vitro „csomagolás” a kapszid fehérjékbe rekombináns, fertőzőképes λ-fág, mint vektor

5

6

7

8 M13 alapú vektorok

9 transzdukció, vagy transzformáció
Fágemid vektorok kétféle replikáció, transzdukció, vagy transzformáció

10 Kombinált klónozó/expressziós vektorok

11 PCR-termék helye téta replikációs origó „rolling circle”
ampicillin rezisztencia gén PCR-termék helye T7 promóter SP6 promóter restrikciós enzim hasítóhelyek

12

13 Kozmidok: 40-50 kbp. max., cos szekvencia,
λ-fágba, eukariotába, E. coliba Fosmid Cosmid

14 YAC: kbp. (max. 3000) feltöltés. Telomér, centromér régiók, repl. origó.

15

16 repE (helicase) parA parB parC (egyenlő elosztás) BAC: F-faktor alapú, kbp. max. feltöltés, Human Genom Projekt szekvenálás BAC

17 PAC: P1 fág alapú, könnyen rekombinálódik a
genomba, kbp.

18 Humán mesterséges kromoszóma (HAC)
centromer telomer replikációs origók gén normál kromoszóma mesterséges Humán mesterséges kromoszóma (HAC)

19 Lentivírus vektor felhasználhatósága