Specifikus hatások mérésére:

Az előadások a következő témára: "Specifikus hatások mérésére:"— Előadás másolata:

1 Specifikus hatások mérésére:
Bio-assay: Ismert érzékenységű biológiai objektum vizsgálandó hatásra adott válaszának mérése Toxicitás mérések (pl. LDH-kibocsájtás, caspase assay, stb) Specifikus hatások mérésére: „Riporter” sejtvonalak Pl.: WEHI-164: TNFa B9 : IL6 Fázis-kontraszt b-galaktozidáz RARE-LacZ riporter F9

2 Nagy áteresztő képességű tesztelés (HTS: high-trough-put screening)
Automatizált mikroszkópia Image Xpress; Molecular devices 2x,4x,10x,20x,40x,and 60xoil, and filter sets DAPI, CFP, GFP, FITC, YFP, TRITC, Cy3, TxRed, and Cy5.

3 Nagy áteresztő képességű tesztelés (HTS: high-trough-put screening)
Kémiai-optikai

4 Nagy áteresztő képességű tesztelés (HTS: high-trough-put screening)
Elektromos paraméterek alapján Electric cell-substrate impedance screening Automated patch clamp

5 Sejt-alapú bioszenzorok
Biológiai hatások detektálása élő (sejt) rendszeren → a jelek „átfordítása” érzékeny, jól mérhető fizikai jelekké szenzor Mérendő hatás (ható/szennyező anyag, fizikai hatás) detektor Sejt-válasz regisztrálása Bioelektromos sejt-válasz, Sejt-letapadás változása; Fény-kibocsájtás Feszültség / áram/ impedancia, Optikai válasz; Wang J., et al.,. Biosensors 2012. Jelölés-függő Jelölés-mentes

6 „laboratórium egy chip-en”; „lab-on-a-chip”
Gyógyszerfejlesztés : automatizálható, nagy-áteresztőképességű, Klinikum: hordozható – táv-mérések, betegágy melletti, vagy elsősegély számára gyors-diagnosztika, miniatürizálható Környezet-ellenőrzés : terepen is működő, automatizált „laboratórium egy chip-en”; „lab-on-a-chip” NASA patent: biohazard chip bakteriális toxin detektálásra (nem sejtes szenzor!)

7 Sejtek életben maradását biztosító környezet
Szenzor: élő sejt ↔ mesterséges felület „interface” + sejt-élet és mérés feltételeit biztosító kamra Szenzor-felület Detektáláshoz szükséges felület ↔ sejt-letapadás, túlélés ! Elektromos mérésekhez : jó vezetőképesség; szigetelés Optikai mérésekhez : plasmon; törésmutató; MEA: multielectrode array Adhezív anyagokkal való bevonás Sejtek életben maradását biztosító környezet Hőmérséklet – ha „melegvérű” szervezet sejtjeiről van szó ITO (~ 90% In2O3, 10% SnO2): áram hatására melegszik – fűtő réteg; átlátszó Tápanyag / gáz -ellátás Hatóanyag-adagolás mikrofluidika Kwang W. 2012

8 Sejt-válogató chip Méret alapján IMEC Cytonome

9 Sejt-elrendező egyedi sejt-analízishez
ETH, Zürich

10 Keringő tumorsejtek (CTCs) kiválogatása a vérből
Méret + jelölés alapján NIH Biotechn. Inst.